Loi De Beer

~ A2 (Les détecteurs sont incohérents!) Absorption RX Absorption de RX (absorption photoélectrique) dz I0 I(z) z  dI  I  dz I ( z)  I0 e z Loi de Beer-Lambert Absorption RX µ fluorescence Réflexion et réfraction n c  , n  1    i   10 5  10 8 ,    c ? Loi de Snellius - Descartes n ~ 1.5 - 2 cos   n cos  '   C ,  '  0  C  2 Réflexion et réfraction Miroir RX focalisent   C • 100% réflectivité

(pH) 1) Principe 2) Réactif et appareille b. Mode opératoire I.2.1 Méthodes d’analyses I.2.1.1 Analyse par spectrophotométrie UV visible 1. Principe de la méthode de l’analyse 2. Validité de la loi de Beer-Lambert 3. Preparations des solutions standards 4. Réglage de l’appareil et les données nécessaires 5. Traçage des courbes d’étalonnages de chaque élément 6. Lecture des absorbances de chaque élément et trouvé les concentrations

optimale quand la longueur d’onde choisie pour la mesure est celle pour laquelle l’absorbance est maximale . - Savoir exploiter une courbe d’absorbance (un pic dans cette courbe correspond à un maximum d’absorption par la solution) - Connaître la loi de Beer-Lambert ( voir Tp) - Savoir tracer une courbe d’étalonnage A = f(C) (A en ordonnée et C en abscisse) et savoir l’exploiter. - Savoir calculer le volume de solution à prélever pour réaliser une dilution . Savoir rédiger - savoir présenter les données

primordial d’effectuer un blanc, c’est-à-dire d’ajuster le spectrophotomètre à 0 d’absorbance avec l’eau. Ainsi, lorsque l’instrument de mesure fonctionne, il ne prend en note que l’absorbance du composé chimique présent dans la solution. La loi de Beer-Lambert exprime que l’absorption est proportionnelle à la concentration du milieu qu’elle traverse, comme mentionner précédemment. Cependant, la concentration n’est pas proportionnelle à l’infini avec l’absorbance. En effet, cette relation est

étudiée alors A(l2) = 2. L'énergie est transmise à 1 / 100 = 0,01 = 10 - 2= T Il faut régler le zéro en plaçant le solvant dans la cuve et l'absorbance doit être nulle. L’absorbance A est proportionnelle à la concentration de la solution selon la Loi de Beer-Lambert A = e x L x C avec A : absorbance de la solution (sans unité) L : longueur de la solution traversée par la lumière (en cm) C : concentration de la solution (en mol.L-1) e : coefficient d'extinction molaire (en L.mol-1.cm-1) e dépend

moment de sa mise en marche. - zéro de DO en mode absorbance avec le tube témoin en place dans le porte-cuve, appuyer sur le bouton «0 ABS » . La valeur affichée doit alors se stabiliser sur la valeur DO = O. Loi de Beer Lambert Les dosages colorimétriques s'appuient sur la loi de Beer Lambert qui indique que la densité optique (DO) ou absorbance d'un produit en solution est proportionnelle à sa concentration DO = ε . c . l ε : coefficient d'extinction molaire du produit coloré unité: M-1. cm-1

enzymatique nulle. Dans le tube T1, sans enzyme, il n’y a aucune libération de maltose et dans le tube T2 sans substrat l’enzyme n’agit pas. ▪ Cinétique enzymatique : L’absorbance mesurée rend compte de la concentration en Maltose formé (loi de Beer-Lambert A340 = l.ε). A partir des résultats obtenus des tubes 1 à 7, on trace la courbe A540 = f(t) fournie en annexe. La tangente à l’origine permet de déterminer la vitesse initiale Vo. ▪ Changement de milieu : Dans le tube 10, on

/9 a) On ne voit que la partie ultraviolette du spectre donc on ne peut pas juger sur la couleur mais une espèce chimique n’absorbant que dans l’UV sera incolore. b) On trouve !max (4-aminophénol)= 230nm et !max (paracétamol)= 245nm ; D’après la loi de Beer-Lambert : soit pour le 4-aminophénol et pour le paracétamol : Nombre d’onde ! ( cm "1 ) à 2950 et à 1500 à 3200 et à 1590 à 1600 à 1650 ! 230 = ! 245 A= ! " # ! #C donc !" = A ! #C A 1,0 = = 1,5.10 5 L.mol #1 .m #1 #2 ! "C 1,0.10 "

de la concentration molaire en fonction de l'absorbance. III-Valider Grâce à cette courbe,on peut en déduire la concentration de la solution du bonbon.L'absorbance du bonbon est égale à 0,742.Ensuite on calcule la concentration avec la loi de Beer-Lambert,A=k x C avec k=2,34 x 105.On obtient: C=A/k=0,742/2,34x105=3,17x10-6. Ensuite,on cherche la masse de bleu de patenté contenue dans un bonbon.On a donc: m=c x V x M=3,17x10-6x50x10-3x582,66=0,0923 mg. On veut maintenant trouver la masse

dilution : il consiste à prendre une solution initiale (contenant une concentration initiale et un volume initial) et de le diluer a l’aide de l’eau distille afin de modifier la solution qui contient une (concentration finale et un volume final). Loi de Beer –Lambert : c’est une équation qui met en relation une longueur d’onde, l’absorbance d’une solution qui est proportionnelle à sa concentration. Introduction Ce laboratoire permet d’analyser le phénomène de l’absorbance de plusieurs solutions