Méthode Electrophorèse Sds Page

glutamines en glutamate. (voir cours chapitre 8 dia 16 sur l’hydrolyse acide) 2. (3p) Expliquez, en une page maximum, les principes de séparation et les caractéristiques essentielles de la chromatographie par échange d’ions, de la filtration sur gel et de la technique SDS-PAGE. Vous n’avez pas vu je pense… a part le SDS-Page qui est dans le chapitre 8 dia 12 3. (4p) Décrivez, en une page maximum, la signification de l’équation de Michaelis-Menten et des paramètres kcat, Km et Vmax. Chapitre

couleur(s)), pour rendre le rapport plus agréable à lire. • Les documents (photos, schémas peuvent être intégrés au milieu du texte ou placés en vis-à-vis du texte : sur le verso de la page précédente). • Proposition de plan et d’organisation du document, dans l’ordre : • Couverture transparente. • Page de garde vierge (entièrement blanche) pour pouvoir coller les bordereaux d’envoi au centre d’examen. • « Vraie » couverture : avec - Lieu du stage (entreprise, laboratoire, situation

Responsable académique : Keith DUDLEY Etudiant : Elise Absa NGOM Sommaire Introduction .....................................................................3 I) Matériel et méthodes 1- Purification de la stathmine …………………………………….5 2- Electrophorèse …………………………………………………………6 3- Western blot …………………………………………………………….8 4- Dosage de la tubuline ……………………………………………….8 5- Cosédimentation ……………………………………………………..9 II) Résultats et discussion 1-

Procédés de séparation et méthodes d'analyse des protéines Introduction : Les protéines peuvent être séparées selon leur taille mais aussi selon leur charge. Suivant le paramètre pris en compte, nous effectuerons soit une chromatographie d'exclusion, soit une chromatographie échangeuse d'ion. (1ère séance) Deux méthodes d'analyse des protéines ont été testées séparément, afin d'estimer dans un premier temps la taille de protéines et dans un second temps, la concentration protéique de solution

1- ISOLEMENT ET amplification de entD par pcr 1.1.1. LYSE CELLULAIRE AUX MICROONDES1.1.2. realisation de la PCR1.1.3. Purification de l’amplicon 1.1.4 VISUALISATION et QuantifIcAtion de l’amplicon PAR Electrophorèse SUR GEL D'AGAROSE. 1.2. Insertion de l’amplicon DANS pCR 2.1-TOPO 1.3. - TRANSFORMATION de Escherichia coli TOP10 1.3.1 - PREPARATION DES CELLULES COMPETENTES. 1.3.2

de veau fœtal kDa: kilo Dalton PBS: tampon phosphate saline PVDF : polyfluorure de vinylidène SDS : dodécylsulfate de sodium siRNA: “small interfering ribonucleic acid” TBS: “Tris Buffered Saline” Table des matières I- Introduction : 3 II- Présentation du laboratoire d’accueil : 4 III- Présentation du sujet de stage : 6 IV- Accueil et encadrement: 10 V- Matériels et Méthodes : 11 1. Culture cellulaire 11 2. Trypsination des cellules: 11 3. Transfection: 11

activité, déterminée dans les conditions décrites sous Titrage et dans l’essai des protéines, n’est pas inférieure à 100 000 UI/mg de substance active. PRODUCTION L’érythropoïétine est produite in vitro, dans des cellules de rongeurs, par la méthode dite de l’ADN recombinant. D. anhydroérythromycine A, Sauf dérogation accordée par l’Autorité compétente, les essais suivants sont effectués sur chaque lot du produit final, avant sa libération. Protéines issues de la cellule hôte : la limite

(17)) provenant de différentes fermes et régions marocaines ont fait l‘objet d‘une analyse microbiologique pour déterminer leur diversité en bactéries lactiques. 300 bactéries lactiques ont été isolées et identifiées par des méthodes biochimiques (API50 CHL), moléculaires (SDS-PAGE) et génotypiques ((GTG)5-PCR et séquençage du gène codant pour l‘ARNt phenylalanine synthase PheS). Cette étude a montré que l‘identification fiable des 300 isolats a nécessité l‘utilisation d‘une approche polyphasique incluant

espèces (par exemple, la région Aiid2 est localisée sur le chromosome 5 chez l'homme). L'objectif ce TP est de procéder à une localisation affinée du QTL grâce à l'étude d'un type de lignée congénique de rat, les lignées LEW.c10BN. II. Matériel et méthodes 1) Matériel biologique utilisé Nous disposons pour les expériences d'ADN et de sérum provenant des lignées parentales BN et LEW, ainsi que des 6 différentes lignées congéniques. Les lignées congéniques sont des lignées dans lesquelles on a remplacé

partir des rayonnements ainsi provoqués sont des spectres de raies. Ils comportent un ensemble de fréquences, caractéristiques de chaque élément. L’analyse des spectres d’émission peut donc constituer une méthode d’analyse chimique. Les métaux s’y prêtent particulièrement bien, et c’est une méthode d’analyse des Gillet Steve, D.Sc. -3- La spectrométrie. alliages. C’est aussi en analysant la lumière reçue des étoiles que l’on peut savoir quels éléments chimiques y sont présents. Les fréquences