Taq polymérase

déterminer  l’ordre  d’enchaînement  des  nucléotides  (A­T­C­G)  dans   un  fragment  d’ADN particulier.   Pour  ce   faire,  quatre  microtubes  sont  nécessaires.  Chacun  contient  un  fragment  de  l’ADN  a  séquencer,  une  amorce, un ADN polymérase (enzyme)  et des désoxyribonucléotides  (dATP,  dCTP,  dTTP  et  dGTP).  De  plus,  les  tubes  contiennent  aussi  des  didésoxyribonucléotides.  Le  premier  tube  possède  le  ddGTP,  le  deuxième  le  ddATP  et  ainsi  de suite pour les deux autres tubes (ddTTp et ddCTP)

dans les deux sens. ON dit que la réplication est bidirectionnelle. L’œil de réplication va s’agrandir au fur et à mesure jusqu'à ce que tout l’ADN soit synthétisé. Le complexe multienzymatique est composé d’un tas d’enzyme (les licases, ADN polymérase…) Cet ensemble porte le nom de REPLISOME. ADN (schéma) L’ouverture du duplexe est un mécanisme qui demande beaucoup d’énergie cad qu’a chaque fois qu’une paire de base est dissociée, deux molécules d’ATP sont hydrolysé pour fournir l’énergie

l’amorce terminée, l’ADN Polymérase 3 se fixe et ajoute des nucléotides d’ADN. (Se fait de l’extrémité 5’ vers 3’ du nouveau brin). #4 : Enzyme (Primase) synthétise une amorce d’ADN. #5 : ADN polymérase 3 s’accroche à cette amorce et ajoute des nucléotides d’ADN. #6 : Plus première enzyme (Hélicase) dé-spiralise, plus Primase synthétise des amorces et ADN polymérase 3 va ajouter des nucléotides. (Pour le premier brin, seulement ajout de nucléotides). #7 : Lorsque L’ADN polymérase 3 rencontre une amorce

en division hérite d’une nouvelle double hélice contenant un brin parental et un nouveau brin. -> la double hélice d’ADN est répliquée de façon semi-conservative par l’ADN polymérase. Voir figure 2)différents acteurs et modalités a-points essentiels L’ADN est répliqué de façon semi-conservative par l’ADN polymérase L’appariement des bases est nécessaire à la réplication et a la réparation de l’ADN La croissance du nouveau brin d’ADN se fait toujours dans le sens 5’-3’ Voir figure

La réplication est le processus au cours duquel l'ADN est synthétisé grâce à l'ADN polymérase. Ce mécanisme permet à l’ADN d'être dupliqué (donc doublé). Puisque les deux chaînes de l'ADN parental se séparent et que deux nouvelles molécules sont formées, on qualifie ce processus de semi-conservateur. L'ADN a l'importante propriété de pouvoir être reproduit à l'identique, ce qui permet à l'information de se transmettre d'une cellule mère aux cellules filles. La molécule d'ADN s'ouvre comme une

ouverture de la double hélice par l'ADN hélicase qui casse les liaisons hydrogènes entre les bases azotés et détord la double hélice. Une ARN polymérase synthétise une amorce qui est complémentaire du brin d'ADN lu et dans le sens 5'-3' (ADN lu dans le sens 3'-5'). 3 Compétence 4 UE 2.2 Semestre 1 2. L'élongation: Une ADN polymérase se fixe à l'extrémité 3' libre de l'amorce. L'enzyme lit la matrice de 3' vers 5' et synthétise un nouveau brin de 5' vers 3'. Les deux brins

La PCR (réaction d’amplification en chaîne par polymérase) Historique: Cette méthode de Biologie Moléculaire a été mise au point en 1985 par Kary Mullis, qui obtint pour ces travaux le prix Nobel de Chimie en 1993. Aujourd’hui, ce procédé révolutionnaire couplé à l’utilisation d’une ADN polymerase thermorésistante permet d’obtenir, sans clonage, une amplification considérable d’un fragment donné d’ADN. Principe :  La réaction PCR (Polymerase Chain Reaction) permet d'amplifier in vitro une

Un Organisme Génétiquement Modifié (OGM) est un organisme (une plante, un animal, une bactérie, un virus) dans lequel on a introduit artificiellement un ou plusieurs gènes, soit inconnus de l'espèce à laquelle appartient cet organisme, soit appartenant à l'espèce mais ayant subi plusieurs manipulations génétiques. L'introduction de ces gènes conduit à la production de protéines qui confèrent de nouveaux caractères à l'organisme génétiquement modifié. L’intérêt des OGM réside dans les propriétés

confirmer que l’infection par le virus Ebola est bien la cause des symptômes : titrage immunoenzymatique (ELISA) tests de détection par capture de l’antigène test de séroneutralisation transcription inverse suivie d’une réaction en chaîne par polymérase (RT-PCR) microscopie électronique isolement du virus sur culture cellulaire. Les échantillons provenant des patients présentent un risque biologique extrême. Par conséquent, les analyses de laboratoire effectuées sur les échantillons non

2 anti-hypertenseurs : loxen ( inhibiteur calcique) , eupressyl ( alpha bloquant) Mis sous ATB : Augmentin, amox 02/10 : Pose de KT EER (mis sous hyno, diprivan) : epuration extra renal en femorale droite. UF : 3000. Arret des ATB PCR ( polymerase Chain reaction) positif a herpes. => confirmation encephalite herpetique. Reprise Zovirax (aciclovir) post dialyse Toujours HTA. PAM > 100. 03/10 : EER 2. UF : 3000. Données du jour : TA : FR :