Taq polymérase

semi-conservatoire Chaque brin de l’hélice bicaténaire sert de matrice à la synthèse d’un brin fils. Chaque molécule fille d’ADN contient un brin parental et un brin fils nouvellement synthétisé. molécule parentale molécules filles 1) hélicase 2) polymérase 2 Description de la chimie de la réplication de l’ADN (a) Pendant la synthèse d’ADN, le désoxyribonucléotide 5’-phosphate à placer forme des liaisons hydrogènes avec un résidu du brin parental et devient ainsi une base appariée. Il

continu et attardé 2°) Les enzymes intervenant au niveau de la fourche de réplication 3°) Synthèse d’ADN par l’ADN polymérase ADN dépendante 4°) Synthèse du brin attardé IV. Le mécanisme de la réplication V. Terminaison de la réplication -bactéries -eucaryotes raccourcissement du brin attardé télomères VI. Erreurs de la réplication et réparation VII. Les ADN polymérases en recherche Modèle de la réplication de l’ADN proposé par Watson et Crick Figure 1 1 The “winding problem”

synthétisé 2 A A G C A Bilan : Au cours de la phase S, la quantité d'ADN double, chaque molécules d'ADN est répliquées en deux molécules filles selon un mécanisme semi-conservatif. En effet chacun des deux brins de l'ADN sert de matrice. L' ADN polymérase va séparer les deux brins matrices et former deux nouveaux brins en incorporant des nucléotides par complémentarité avec les brins d'origines. En absence d'erreur, les deux molécules d'ADN sont identique et possèdent la même séquence de nucléotides

(1 simple brin) contenant un dimère de thymine sur la double hélice d'ADN. Pour finir, une ADN polymérase va permettre de synthétiser un nouveau fragment d'ADN pour pourvoir remplacer celui qui a été éliminé. Conclusion : Après avoir analyser tous les documents, on peut en conclure qu'il existe bien des mécanismes qui permettent la réparation de l'ADN comme les enzymes ou encore l'ADN polymérase. Grâce à tous ceux-ci, les personnes qui sont atteints de la maladie de xeroderma pigmentosum peuvent

inactivée que lorsque le gène d’intérêt est introduit. Quand on met ce plasmide dans une bactérie, la réplication se fait de façon autonome. II. Principes des méthodes utilisées. 1. La PCR La PCR (polymerase chain reaction) est une technique d’amplification enzymatique in vitro. Elle permet d’obtenir à partir d’un échantillon peu abondant d’importantes quantités d’un fragment d’ADN spécifique de séquence et longueur définies. A chaque extrêmité 3’ du

processus sont étroitement couplés chez les procaryotes, alors qu'ils sont spatialement et temporellement séparée chez les eucaryotes. La transcription est le processus de copie du matériel génétique (ADN ou ARN) en ARN. Chez les eucaryotes, trois ARN polymérases (ARNpol) interviennent : l'ARNpol I ou A pour les ARN ribosomiques transcrits dans le nucléole (28S, 18S et 5,8S), l'ARNpol II ou B pour les ARNm, et l'ARNpol III ou C pour les petits ARN (ARNt, ARNr 5S, ARNsn). Intéressons-nous plus particulièrement

réplication semi-discontinue. 5) Les ADN polymérases a) Généralités Les ADN polymérases (ou désoxynucléotidyl-transférase) sont les enzymes respon-sables de la polymérisation des nucléotides lors de la réplication de l’ADN. Elles sont ADN dépendantes, c’est-à-dire qu’elles ont besoin d’une matrice d’ADN pour produire le brin néo-synthétisé, et pour se faire elles lisent le brin matriciel de 3’ vers 5’ pour synthétiser de l’ADN dans le sens 5’ vers 3’. Les ADN polymérases procaryotes sont de 3 types (I,

n’existe pas d’ADN polymerase qui puisse faire la synthèse de 3’ vers 5’, toutes les ADN polymérase font la synthèse de 5’ en 3’, et aucune ne peut amorcer de synthèse de novo, ie sans amorce ADN ou ARN préexistantes. Au niveau du brin 5’3’ la synthèse est continue, il s’agit du brin avancé ou précoce. Au niveau du brin 3’5 ‘ la synthèse se fait également de 5’ en 3’ grâce au fragment d’okasaki d’environ 1000 nucléotides, il s’agit du brin retardé. Il y a une seule ADN polymérase de type III (mais

Au cours de la réplication de l'ADN, celui-ci peut subir une modification, on parle donc d'erreurs dû a des agents mutagènes, ces derniers pouvant être de nature différente et peuvent affecter n'importe quel organisme spontanément. L'ADN polymérase est responsable de l'appariement de nouveaux nucléotides a ceux des bruns ayant subi la division. Cependant, comme le montre le doc 1, suite à un contact avec certains produits comme le benzène, ces derniers peuvent être raison de substitutions

tests ont été réalisées pendant les manipulations pour confirmer la présence de l'insert ou du vecteur à ces moments précis, notamment des électrophorèses. Nous allons donc détailler dans ce paragraphe les étapes précises de l'expérience. PCR (polymerase chain reaction) Pour réaliser l'amplification, le milieu réactionnel doit contenir 1µL de plasmide pJET contenant l'insert, 0,4 µL d'amorce sens de Sac I (gec1 cis577ss), 0,4 µL d'amorce reverse Hind III (gec1 cis577rev). Un tampon d'amplification