Tubuline

milieu extra cellulaire. L’obstruction de ce canal empêche les échanges normaux de chlore. PHENOTYPE MOLÉCULAIRE : Le canal membranaire chlore appelé CFTR Coloration fluorescente du canal clore des cellules épithéliales CFTR (yellow) - Tubuline (red) Autres représentations spatiales de la protéine CFTR Domaines transmembranaires et cytoplasmiques Modèle hélice et rubans ORIGINE GENETIQUE DU CANAL CFTR Localisation chromosomique du gène CFTR : 7q3 1-2 Fragment de la séquence

S dépendantes. 4. Les poisons du fuseau : Ils sont caractérisés par leur cible, le fuseau achromatique qui permet aux chromosomes de migrer lors de la mitose. Il existe un état instable entre les tubulines α et β, qui se polymérisent en microtubules, eux même, se dépolymérisant en tubuline : on a un passage d'un état à l'autre lors de la mitose, et c'est sur ces actions de polymérisation-dépolymérisation que vont agir les poisons. Il existe 2 sous-familles : a) Vincaalcaloïdes : ex :

de base des microtubules (constituées de 13 colonnes ou tubulines) serait une 18 unité de calcul (ou de mémoire). Comme il y a en moyenne 10 tubulines dans notre cerveau cela donne une capacité de stockage 1.000 fois supérieure à celle imaginée par le projet Blue Brain. Notre hypothèse va plus loin et suppose qu’une unité de stockage mémorielle se trouve dans chaque spin d’électron contenus dans les molécules des tubulines. Chaque tubuline était faite d’un empilement de molécule allant de 25

de protéines globulaire: tubuline alpha et beta associées en dimère. Qui s’associent en formant des protofilaments. On osberve au niveau des protofilamants, un décallage des tubulines alpha et beta formant une structure hélicoïdale creuse dont le diamètre est de 25 nm. -- 13 potofilaments forme un microtubule b. construction L'organisation et la mise en place des microtubules se fait par le système MTOC,. Ce système MTOC permet la nucléation des dimères de tubuline alpha et beta. Ultérieurement

clichés de marquage fournit dans le topo du TP on peut observer que : Dans le puits du contrôle positif on a une fluorescence qu'on peut qualifier de « correcte » ou on peut voir la présence de filaments de microtubules qui marque donc existence de la tubuline dans la cellule. Dans le contrôle négatif il n'y a pas de fluorescence Dans le puits contenant de la colchicine à 10-5 on peut remarquer une modification par rapport au contrôle positif en effet les cellules ne sont pas organisées en filaments

(ongles, cheveux…), vimentine, desmine, lamines nucléaires, neurofilaments, fibrille gliale acide Contrôlent le positionnement et la distribution des organites Soutien mécanique de la cellule Microtubules (25 nm) : tubes rectilignes constitués de tubuline (fonctions cf c) Les microfilaments d’actine Composés d’actine Actine = 1 à 5% des protéines cellulaires (20% dans le muscle) Actine G (globulaire) se polymérise en actine F (fibrillaire) Un microfilament : association en hélice de 2 chaines

de substrat donné, CDK va permettre la phosphorisation de la tubuline, favorisant la polymérisation ou au contraire, des phosphatases seront mises en jeu lors de la dépolymérisation du réseau de tubuline, indispensable au fuseau mitotique. Les microtubules peuvent alors se développer harmonieusement. Les kinases apportent de l'énergie qui permet la polymérisation de la tubuline en présence de GTP, les phosphates depolymérisent la tubuline. Il s'agit en fait d'un équilibre dynamique permanent. Un autre

fondamental dans le transport axonal des vésicules, ou dans des cellules à forte activité sécrétoire. Constitution protéique, assemblage et structure - Constitution : Ils sont constitués de dimères de tubuline α et β. Chaque monomère peut s’associer au GTP mais seule la tubuline β peut échanger son GTP. C’est une protéine globulaire comme l’actine des microfilaments, à la différence des filaments intermédiaires. - Assemblage : Les microtubules sont des structures polaires comme l’actine

que la Pervenche intervient. A ce stade de la mitose des microtubules sont polymérisés c’est-à-dire que de nombreuses molécules de tubuline s’unissent pour former des longs cylindres creux; pour capturer les chromosomes au niveau de leurs centromères et les aligner sur un plan équatorial. La vinblastine bloque l’assemblage des microtubules en se fixant sur la tubuline et en empêchant donc la polymérisation des microtubules. Ainsi elle bloque la division cellulaire au stade de pro métaphase et entraîne

l’action d’EGF et augmente l’expression de la PRL (données non montrées). Le rôle de la SIRP dans la croissance cellulaire sera aussi étudié. Matériel et méthodes Matériel biologique – Les anticorps primaires anti-SIRP, anti-phosphotyrosine, anti-β-tubuline, et les anticorps secondaires monoclonaux anti-souris et polyclonaux anti-lapin ont été fournis par Sancta Cruz Biotechnologies. Les bactéries DH5( contenant le plasmide pLKO.1 dans lequel sont insérés les shARN 14, 17, 54 ou 57 ont été fournies