Western blot

(Delaugerre C, SimonF, 2009). Les tests ELISA 4G ont également été adaptés à la détection de variants rares comme les VIH-1 du groupe O. Tout test ELISA 4G positif ou indéterminé doit être complété par un test de confirmation basé sur la technique de western-blot. Il est également nécessaire de différencier entre infection par VIH-1 ou par VIH-2 à l’aide de tests discriminants (Delaugerre C, SimonF, 2009). Ils présentent une grande sensibilité y compris en primo-infection, une excellente spécificité, sont

un filtre qui élimine la lumière transmise en-dessous de 395 nm. B.2. Extraction protéine Extraction de protéine se réalise dans un tampon RIPA contenant du Tris, du NaCl pour qu’il soit en milieu hypertonique, C. RT et PCR D. Western blot Un western blot aussi appelé un transfert de protéines, est une méthode de biologie moléculaire permettant la détection et l'identification de protéines spécifiques dans un échantillon biologique (cellules). C'est un outil de diagnostic complémentaire

adultes, cette apparition d'anticorps anti-VIH est utilisée pour diagnostiquer une infection par le virus du SIDA. On recherche ainsi leur présence, par deux tests de dépistage ELISA (fixation des anticorps), puis par un test de confirmation par western blot (séparation de protéines sur gel). En cas de résultat positif, on dit que l'individu est séropositif : il possède des anticorps anti-VIH dans son sérum. Il est à noter que l'infection n'est pas décelable par cette méthode lors de la primo-infection

non spécifiques Sérologie AVEC ACCORD DU PATIENT : - dépistage par test ELISA, 2 tests pour 2 virus (VIH1 et VIH2) - confirmation par : Western-Blot recherche antigène p24 charge virale (PCR ARN VIH plasmatique) Précaution : - 2 dosage : immédiat et à 3 mois… Cinétique des marqueurs biologiques Bilan initial • • • • Sérologie VIH confirmée par Western Blot Lc T CD4+ Charge virale plasmatique Sérologie syphilis, Hépatite B, hépatite C, toxoplasmose, CMV • Tuberculose (IDR) • Radio de thorax

molécules solubles dans les liquides extracellulaires (sang et lymphe). 2) Les tests de dépistage. a. Le test ELISA. b. Le Western Blot. La séropositivité pour le VIH correspond à la présence d’anticorps spécifiques, dirigés contre certaines protéines du virus. On recherche ces anticorps par le test Elisa et éventuellement le Western blot. Comment peut-on expliquer la spécificité d’action des anticorps ? 3) La structure des anticorps explique leur spécificité d’action

immu fluorescence , immunochromatographie - détection du génome viral --> PCR , hybridation , sequencage - culture cellulaire = effet Cyto pathogène Methode indirecte - sérologie = détection d'AC dirigé contre des prots du virus --> western blot (après ELISA ) Cycles infectieux Polyovirus ( classe 4 = ARN+mARN ) --> cas de poliomyélite .

Absa NGOM Sommaire Introduction .....................................................................3 I) Matériel et méthodes 1- Purification de la stathmine …………………………………….5 2- Electrophorèse …………………………………………………………6 3- Western blot …………………………………………………………….8 4- Dosage de la tubuline ……………………………………………….8 5- Cosédimentation ……………………………………………………..9 II) Résultats et discussion 1- Purification de la stathmine ……………………………………..9 a- La pré-culture ………………………………………………………

1.8 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE • • Tests diagnostiques sérologiques : détection des anticorps 2 à 12 semaines après contamination. • Méthode ELISA en première intention : tout test positif doit être confirmé par le Western-Blot (test de référence). • Western-Blot. • VIDAS VIH DUO : méthode combinée permettant la détection simultanée des anticorps anti-VIH et de l’antigène p24. Elle a l’avantage viv-à-vis des tests antérieurément cités de réduire la fenêtre sérologique existante

sanguins. Le donneur doit également faire des Tests pour la sécurité infectieuse du don de sang afin de ne pas transmettre ces maladies au receveur. o Dépistage du virus du Sida: Le test ELISA sert au dépistage et le test de western blot sert à la confirmation de la séropositivité du sida, lorsque le test ELISA c’est révélé positif. o Dépistage du virus de l’hépatite B (test antigène HBs et test anticorps anti-HBc). o Dépistage du virus de l’hépatite C (test

l'intérieur de l'enveloppe, se trouve une matrice protéique (MA) composée de protéines p17 et, encore à l'intérieur, la capside (CA) composée de protéines p24. C'est ce dernier type de protéines qui, avec gp41 et gp120, sont utilisés dans les tests VIH western blot. Les protéines nucléocapside p7 (NC) protègent l'ARN viral en le recouvrant. La protéine p6 est exclue de la capside et se trouve entre la matrice et la capside, elle permet la sortie par bourgeonnement des virus nouvellement formés dans la cellule