Extraction, séparation et caractérisation des pigments

photosynthétiques chez l’épinard (Spinacia oleracea)

Travail présenté au

François Ouellet

BIA2101 groupe 12

Métabolisme et régulation des végétaux

par

Lauriane Gosselin-Allard :

Maxime Gauthier :


Biologie par apprentissage par problème

Université du Québec à Montréal


Mardi le 22 novembre 2011

Résumé :

Le but de ce laboratoire était d’extraire, de séparer et de caractériser les pigments photosynthétiques de Spinacia oleracea au niveau de leur spectre d’absorption. Les pigments porphyrines (chlorophylles ( et ( et les phéophytines) ainsi que les caroténoïdes (carotènes et xantophylles) furent extraits et séparés par chromatographie sur couche mince (TLC), puis solubilisés et leur courbe spectrale fut effectuée. L’ordre d’élution de la chromatographie (Tableau I) présente les pigments les plus polaires en premier avec des ratios moyens (Rf) de 0,1713 pour le premier xanthophylle et 0,3427 pour le deuxième. Par la suite, la chlorophylle ( (0,4770) suivi de la chlorophylle ( (0,6023), puis finalement la phéophytine (0,8382) et la carotène (0,9607). Au niveau des spectres d’absorption , la chlorophylle ( et ( font respectivement des pics à 430 et 670nm et 470 et 650nm (figure 1). La carotène présente un pic d’absorption à 450nm, les phéophytines à 410nm et le xanthophylle a montre un double pic à 440 et 470nm (figure 1). Finalement, le deuxième xanthophylle (b) présente un double pic à 420 et 450nm. Les résultats obtenus dans le cadre de ce laboratoire cadrent avec ce que rapporte la littérature. De plus, à la lumière de ces résultats, il est possible d’affirmer que la méthode d’extraction, de séparation et de caractérisation est efficace.

Introduction :

Le phénomène de photosynthèse qui permet le transfert d’énergie photonique à une énergie chimique est un élément clef permettant la croissance des végétaux. La