TP de biochimie II sur l’hydrolyse enzymatique de l’amidon
Dates :
Tp réalisé le 13.01.15
Rédigé le 20.01.15
Rendu le 22.01.15

But :
Les buts de ce travail pratique étaient de mettre en évidence une réaction enzymatique, tester la spécificité de ces réactions et vérifier la sensibilité des enzymes aux hautes températures.

Introduction :

Nous avons effectué deux tests. Le premier test, est le test de Fehling. Il sert a détecter la présence de sucre réducteur grâce au réactif de Fehling. Celui-ci est un liquide de couleur bleu due au CuSO qu’il contient. On peut donc observer cette équation :
Sucres réducteurs (glucose, fructose , maltose et lactose) + CuSO OH, 100C Acide organique + Cu (rouge, orang)
Le second test est le test au lugol. Celui-ci permet de détecter seulement l’amidon. On obtient les équations suivantes :
Amidon (amylose et amylopectine) + I (lugol) complexe bleu.
Dextrines limites + I complexe violet-noir
Pour éviter l’activation des enzymes il faut les chauffer.

Matériel et préparation :
Pour réaliser cette expérience nous avons utilisé 12 éprouvettes, des pipettes automatiques, des pipettes graduées, un bec Bunsen, un incubateur, un agitateur magnétique, un vortex, de l’amidon, du saccharose, de la salive, du lugol et un réactif de Fehling.

Tout d’abord nous avons créer le substrat. Pour faire le substrat, il faut 0.5g d’amidon de riz dans 50 ml d’eau que l’on amène à ébullition à l’aide de l’agitateur magnétique chauffant. Cela pour dissoudre l’amidon puis nous l’avons laisser refroidir avant de pourvoir l’utiliser (car le saccharose se dissout facilement a froid mais ce n’est pas le cas de la cellulose.). Il faut prélever le mélange sous l’agitation. Puis on prépare deux série d’ éprouvettes : la première série va nous servir a démontrer la réaction enzymatique. Elles vont être incubée a une température de 30pendant une durée de 10 minutes. La deuxième série, quant elle, sert à détecter la présence de sucres