Coloration De Gram

Coloration de Gram des lactobacilles et streptocoques (Lactobacillus bulgaricus et streptococcus thermophilius) I. Introduction Le terme de Gram provient de Hans Christian Gram, un bactériologiste danois qui a inventé ce principe. La coloration de Gram est un outil très pratique en ce qui concerne le diagnostic de bactéries, soit dans le secteur médical, ou scientifique Cette technique peut être utilisée pour différencier la plupart des bactéries en 2 groupes, sur un côté les bactéries à

Fiche technique n°5 : Les colorations de Gram & au bleu de méthylène La coloration de Gram Principe : La coloration de Gram permet de distinguer les bactéries à Gram négatif qui apparaissent roses et les bactéries à Gram positif qui apparaissent violettes. Cette différence de coloration est liée à des différences de nature de la paroi bactérienne. Elle permet de renseigner sur : - le type Gram + ou Gram – ; - la forme des bactéries (coque, bacille) et autre détails morphologiques

Les Observations microscopiques (Etat frais et mobilité, colorations) Etudier la morphologie microbienne, au microscope photonique, c’est rechercher la forme des bactéries et leur mode de groupement. Ces renseignements peuvent être fournis par une simple préparation à l’état frais entre lame et lamelle, les bactéries étant alors observées vivantes, ou par l’observation d’un frottis coloré. Les examens microscopiques de prélèvements peuvent fournir des informations très précieuses pour

Compte Rendu ADRIEN BAC PRO BIT TERMINAL 2012/2013 Sommaire : * INTRODUCTION * IDENTIFICATION DES BACTERIES (COLORATION DE GRAM, état frais)  * Réalisation d’une dilution (10 -5). * Réalisation d’un ensemencement d’un milieu. * Réalisation d’un dénombrement microbienne dans une boite de pétrie. * Examen macroscopique des Cultures. INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT : Les micro-organismes des aliments ont 3 origines possibles :

d’azote avec des plantes de la famille des légumineuses. Cette symbiose se traduit par la formation sur les racines de la plante hôte des nodules (nodosités). But de TP : ✓ Isoler les rhizobiums partir de Medicago et les identifier par coloration de gram. Matériel utilisé : • Racines nodulées de la luzerne annuelle Medicago truncatula. • Boites de Petri contenant le milieu YMA + Rouge Congo • Plaques en verre stériles. • Tubes stériles. • Pinces stériles. • Scalpels

1- la préparation des milieux de culture pour le contrôle biologique des aliments ; (page 3) 2- recherche et dénombrement de micro-organismes (bactéries et champignons) ; (page 5) 3- isolement et identification des bactéries pathogènes (coloration de gram, tests d͛oxydase et de catalase, test sur galerie API) ; (page 8) 4- test de toxicité sur souris ; (page 12) 5- dosage des toxines protéiques (méthode de BRADFORD). (page 14) INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN

la méthode de la coloration de Gram.  Principe : 2/ Coloration de Gram :  But : Permet de diviser les bactéries en 2 groupes : Gram + (celles qui retiennent le violet de gentiane après le lavage à l’alcool), et Gram- (celles qui sont décolorées et prennent ensuite la couleur d’un second colorant).  Principe : Cette méthode est basée sur la différence de structure de la paroi chez les 2 groupes : forte proportion de lipides (20 %) chez les gram – et faible chez les Gram +. Le traitement

sont des protistes ( êtres unicellulaires), microorganismes et procaryotes ( abscence de membrane nucléaire : on parle de nucléoide) Caractérisés par substances bactériennes : peptidoglycannes, Ag O (sur LPS de bactérie gram -), Ag H sur flagelle, acide lipoteichoiques (chez gram +) On les divise en 2 domaines : Archaea et Bacteria ( intérêt médical) 2°) - Systématique :études des caractéristiques ( phénotypiques, génotypiques et protéiques) des bactéries afin d'établir classement -

suivantes : Manipulation 1 : étude d’un mélange bactérien avec un état frais et une coloration de Gram et un ensemencement sur milieux GNO, EMB, CHAPMAN et D-COCCOSEL Manipulation 2 : test antibiogramme sur des bactéries Gram – Manipulation 3 : test respiratoire sur des bactéries Gram + Manipulation 4 : dénombrement de bactéries dans une crème glacée Manipulation 5 : coloration des spores Manipulation 6 : coloration de Gram sur yaourt et frottis buccal. Ce compte-rendu de tp retracera les étapes importantes

Résultats expérimentaux I- Coloration de Gram Principe : Par la coloration de Gram, on peut déterminer s’il s’agit d’un Gram+ ou d’un Gram-. En effet, elle met en évidence les propriétés de la paroi des germes grâce à un système de coloration puis de décoloration et les résultats sont directement visibles au microscope. Une coloration rose indiquera la présence d’un germe BG- ou CG- et une coloration bleu-violet celle d’un BG+ ou CG+. Résultat : Ma coloration était rose et les germes sous