Coloration De Gram

SOMMAIRE Introduction 4 I- Manifestations cliniques et paracliniques II- Le prélèvement III- Examen à l’état frais IV- Examen après coloration de Gram V- Choix de milieu de culture et culture VI- Ensemencement et Incubation VII- Lecture des colonies et Isolement VIII- Identification par des tests biochimiques IX- Antibiogramme Conclusion INTRODUCTION La propreté et l’hygiène personnelle et sociale ont été, dans de nombreuses

obligatoire: la paroi Morphologie et structure des procaryotes Structure obligatoire: la paroi Coloration de Gram Morphologie et structure des procaryotes Structure obligatoire: la paroi des procaryotes gram + Morphologie et structure des procaryotes Structure obligatoire: la paroi des procaryotes gram - Morphologie et structure des procaryotes Un problème de décoloration Gram + Gram - coloration décoloration Morphologie et structure des procaryotes Structure obligatoire: la paroi Rôles

et de DO ½ afin de pouvoir vérifier lorsque la culture va passé du stade de latence à celui exponentiel. Suite à ces grandes manipulations, nous allons effectués d'autres expériences tel qu'un isolement, un ensemencement de tube de veillon et une coloration suivie d'une observation au microscope. Matériel et méthode: Travaillé en stérilité: Lors des manipulations en laboratoire avec des bactéries, il faut toujours veiller à travaillé en stérilité afin d'éviter une contamination par d'autres

Cette coloration (ou noncoloration) est révélatrice d’une différence structurale de la paroi. Organisation : La coloration de Gram (en 1844). C’est une étape préliminaire pour la reconnaissance d’une bactérie. Cette coloration est réalisée en présence d’iode, puis on lave à l’alcool : on trouve alors deux cas distincts : - les bactéries sont décolorées : ce sont des gram- les bactéries gardent la coloration : ce sont les gram+. La paroi des gram+ est 1000 fois plus grande que celle des gram-.

champignons 5 4. Les lichens (association champignon-algue) 5 V. Taille des micro-organismes 5 VI. Besoin des micro-organismes 6 A. Lieux de vie 6 B. Associations 6 VII. Les bactéries 6 A. Identification des bactéries 7 1. Coloration de Gram 7 2. Les formes 7 B. Mode de vie 7 1. Métabolisme 7 2. Respiration 8 C. Mobilité des bactéries 8 D. Développement et reproduction 8 1. Cycle de vie 8 2. Reproduction 9 E. Quelques exemples d’actions des bactéries

morphologie macroscopique (taille, forme, couleur... des colonies sur milieux de culture gélosés) -de leur mobilité (mobilité ou immobilité à une température donnée) -de la présence de spores (à l'état frais ou après coloration) -du résultat de la coloration de Gram (coloration de Gram positive ou négative) -du type respiratoire (aérobie, anaérobie strict, aéro-anaérobie facultatif, microaérophile..) -des besoins nutritionnels (nécessité de substances particulière pour le développement) -de la

(ci-après) sur une boîte de milieu LB gélosé 2) - Incuber la boîte à 37°C pendant la nuit. Résultats à J+1 (TP2) Après incubation de la boîte, que peut-on conclure ? Deux colonies d’aspect différentes seront utilisées pour effectuer une coloration de Gram. Travaux Pratiques de Microbiologie Générale MGG, LSV2 Fig.1 Méthode des stries 4 Fig. 2 Carte du plasmide pBS D) Préparation du TP2 a) Réplique sur tampon de velours. - Inoculer les 5 souches bactériennes (fournies par les

 COLORATION AU BLEU DE MÉTHYLÈNE La coloration au bleu de méthylène est une coloration rapide, économique et d'usage courant I. Solution simple de bleu de méthylène A. Préparation Bleu de méthylène 0.1 g Sérum physiologique 100 ml Mélanger les cristaux et le liquide jusqu'à dissolution complète des cristaux. Filtrer une petite partie du liquide réagité avant chaque utilisation. L'idéal est de pouvoir laisser le bleu de méthylène s'oxyder pendant quelque semaines avant

elles Sur la base d'un coloration développée par Christian Gram (1884), il apparaît évident que les bactéries se divisent en deux groupes majeurs: Gram + Gram coloration au cristal violet mordant (iode) décoloration à Et-OH contre coloration à la safranine enveloppe constituée d'une épaisse couche de PG enveloppe constituée d'une fine couche relâchée de PG (7 à 8 nm) dans le périplasme et d'une membrane externe La membrane externe des bactéries Gram négatives est asymétrique

Bactéries 2) Les enveloppes Paroi (suite1) • Paroi des Gram + – peptidoglycane seul, très solide • Paroi des Gram ‐ – espace périplasmique (gel polysaccharidique) – peptidoglycane en couche très mince – membrane externe = LPS (lipopolysaccharide)  qui a un pouvoir toxique (=endotoxine) – porines = protéines de transport Bactéries Acides Teichoique Peptido-glycane Parietal β-lactamases Transport actif Mb. Cytoplasmique Paroi Gram Positif PLP Bactéries Porine LPS Mb. Externe Peptido-glycane