Electrophorese
Dans cette expérience la technique d’électrophorèse SDS-PAGE a été utilisée pour tracer la droite logarithmique du poids moléculaire en fonction de la distance de migration en utilisant comme référence deux standards qui contiennent des complexes SDS-polypeptide, puis les poids moléculaire d’inconnus ont été déterminés.
Il a été trouvé que la protéine phosphorylase B est celle avec la migration la plus précise, puisque en comparant les poids moléculaires (PM) théorique et expérimental, le % d’erreur obtenu est de 0.75%, en revers l’albumine est la protéine avec la migration la moins précise puisque le % d’erreur obtenu est de 13.2%.
INTRODUCTION
L’électrophorèse de protéines en gel de polyacrylamide communément appelée SDS-PAGE est sans doute une des techniques plus amplement utilisées pour caractériser des mélanges complexes de protéines, la méthode est rapide et nécessite de faibles quantités de protéine. SDS-PAGE est un type d’électrophorèse dénaturante dans laquelle les protéines sont dénaturées et séparés en chaînes polypeptidiques isolées, ce processus requière de la chaleur et la présence d’agents dénaturants comme le beta-mercaptoéthanol qui détruit les ponts disulfures et le SDS (Sodium dodecyl sulfate) qui se lié aux chaines polypeptidiques, cette liaison bloque la charge propre de la protéine et donne au complexe une charge nette négative proportionnelle à sa masse donc tous les complexes SDS-protéine migrent vers l’anode. On peut donc déterminer le poids moléculaire apparent de n’importe quelle protéine en comparaison avec un standard de protéines de poids moléculaire connu.
Dans cette expérience la technique d’électrophorèse SDS-PAGE a été utilisée pour tracer la droite logarithmique du poids moléculaire en fonction de la distance de migration en utilisant comme référence deux standards qui contiennent des complexes SDS-polypeptide, puis les poids moléculaire d’inconnus ont été déterminés.
RÉSULTATS M | L | Poids