tp hplc 2014 2015
NICOLAS Marion 2014/2015
PEREIRA Jérémy
CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE
I Introduction :
Au cours de ce TP nous avons réalisé la séparation et l’identification d’un mélange d’alkylbenzène par chromatographie en phase liquide.
La chromatographie est une méthode chimique de séparation de composés en fonction de leur différence d’affinité avec d’autres molécules. Il existe de nombreux types de chromatographies mais celle qui nous intéresse aujourd’hui est la chromatographie de partage ou liquide-liquide. Le but de cette manipulation est de séparer les différents composants d’un mélange résultant du partage des solutés entre deux phases : l’une dite « stationnaire » qui est contenue dans la colonne et l’autre dite « mobile ». Dans notre cas la phase stationnaire est totalement apolaire, la chromatographie réalisée est dite à polarité de phase inversée et la phase mobile choisie est donc très polaire.
Dans cette méthode, le constituant le plus polaire (parmi tous les solutés qui sont peu polaire) est élué le premier car c’est celui qui présente le moins d’affinité pour la phase stationnaire. C’est sur cette différence de polarité croissante que sont basées nos manipulations. Nous allons déterminer et optimiser les paramètres de composition de la phase mobile ainsi que son débit afin d’avoir une séparation des composants qui soit la plus performante. Pour cela nous allons faire varier la composition de la phase mobile et effectuer une analyse à chaque modification. Ensuite nous calculerons les paramètres d’efficacité, de rétention, qui nous permettrons de déterminer les paramètres optimums.
Le but final de ce TP est d’obtenir la formule brute d’un alkylbenzène inconnu. Après avoir