C’est le personnage principal de la pièce. Elle est décrite comme une reine impitoyable, une criminelle impardonnable, voire une femme inhumaine. Pire que l’« Athalie » de Racine, la Lucrèce Borgia de Hugo semble incarner le démon lui-même. Elle représente l’horrible combinaison d’une femme à la beauté physique et à la grandeur royale incomparables, mais dans le cœur de qui siègent les pires vices et les difformités morales les plus hideuses. À cause de cette duplicité de caractère, Lucrèce Borgia est comparée par ses ennemis à « Un ducat d’or à l’effigie de Satan. »
Lucrèce Borgia est accusée des crimes les plus horribles, aussi bien dans l’histoire réelle que dans la pièce de Victor Hugo. La légende raconte qu’elle était une empoisonneuse qui se servait la plupart du temps du « vin de Syracuse » dans lequel elle diluait quelques gouttes du fameux « poison des Borgia » pour éliminer ses ennemis à petit feu. Comme Maffio le déclare d’ailleurs : « les Borgia ont des poisons qui tuent en un jour, en un mois, en un an, à leur gré. Ce sont d’infâmes poisons qui rendent le vin meille