Absorbance

réaction chimique (ordres et constantes). TABLEAUXDE LECTURES Tableau 1 : Absorbance de la solution de NaOH à 1mol/L en fonction du temps Temps (s) ±0,5 Absorbance1 ±0,001 0 0,800 120 0,701 240 0,611 360 0,535 480 0,472 600 0,412 720 0,363 840 0,322 960 0,283 1080 0,251 1200 0,219 1320 0,193 1 L’appareil a été ajusté à une λ=590nm et calibré avec une solution de NaOH à 1M Tableau 2 : Absorbance de la solution de NaOH à 0,5 mol/L en fonction du temps Temps (s) ±0

trop concentrée (et donc trop sombre) pour que son absorbance soit mesurée directement, on la dilue 100 fois puis on mesure l’absorbance de la solution diluée : ASol diluée = 0,67 Ensuite, on prépare à partir d’une solution mère S0 de concentration en diiode c0 = 1,0.10-2 mol/L, trois solutions filles S1, S2 et S3 de concentrations respectives en diiode c1 = 7,5.10-3 mol/L, c2 = 5,0.10-3 mol/L et c3 = 2,5.10-3 mol/L puis on mesure les absorbances de la solution mère et des trois solutions filles

UV-visible Contrôle des longueurs d'onde   Contrôle des absorbances   Contrôle de la lumière parasite   Contrôle de la résolution   Bruit   Dérive   Tests PE 6 Journées Qualité et Chimie - Autrans 12-15 octobre 2010 41 Spectrophotomètres UV-visible   Contrôle des longueurs d'onde   Perchlorure d'holmium   Dichromate de potassium   Solution contrôle de l'absorbance   λ max : 235, 257, 313, 350 et 430 nm   Contrôle des absorbances   Dichromate de potassium (solution 60mg/l dans H2SO4

diluée dans le tube à essai correspondant tout en respectant l'ordre *Verser les solutions dans des cuves et à l'aide de spectrophotomètre,mesurer leur absorbance Après avoir obtenu l'échelle de teinte et mesuré l'absorbance de chaque solution,on obtient le tableau suivant: Volume (en L) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,05 Absorbance 0,233 0,484 0,745 0,910 1,154 0,742 Concentration (en mol.L-1) 1x10-6 2x10-6 3x10-6 4x10-6 5x10-6 3,174x10-6 La concentration

étudiée. A=KxC Dans le SC (système courant) : A : absorbance de la solution (sans unité) C : concentration de la solution (mol/l)

 Il est alors possible de répartir les tâches entre différents groupes :  chaque  groupe  proposant  et  réalisant  le  protocole. A l’issue de ce travail, on obtient  le spectre  d’absorption  du  diiode,  des  mesures  montrant  la  proportionnalité  entre  largeur  de  la  cuve  et  absorbance  (si  le   lycée  possède  des  cuves  de  largeurs  différentes,  ou  s’il  est  possible  d’en  intercaler  plusieurs  sur  le  trajet  du  faisceau),  et  la  courbe   de  l’absorbance  en  fonction  de  la  concentration (modélisable par un

les  tâches  entre  différents  groupes :  chaque  groupe  proposant  et  réalisant  le  protocole. A l’issue de ce travail, on obtient  le  spectre  d’absorption  du  diiode, des mesures montrant la proportionnalité entre largeur de la  cuve  et  absorbance  (si  le  lycée  possède  des  cuves  de  largeurs  différentes,  ou  s’il  est  possible  d’en  intercaler  plusieurs  sur  le  trajet  du  faisceau),  et  la courbe de l’absorbance en fonction de  la concentration (modélisable par une droite uniquement pour les faibles concentrations)

concentration de la molécule qui absorbe dans le milieu de culture. A=ε*l*C ε varie en fonction de la longueur d’onde. Condition de validité : • Lumière monochromatique • Solution diluée • Milieu homogène non fluorescent Loi d’additivité des absorbance dans un mélange AMélange = A1+A2…= ε1lC1+ ε2lC2 Conséquence : il faut tenir compte de l’absorbance du réactif, de la cuve, donc, soit on les mesure séparément, et on les soustrait, soit on lit directement un blanc réactif (spectro. bi faisceau,

est récupéré. Pour déterminer la concentration en caséine, on mesure l'absorbance de solution de tyrosine de concentration différente (entre 0 et 50mg/L). On ajoute à ces solutions, de l'HCl (0,2 M), du NaOH (0,2 M) et du réactif de Folin. Les absorbances obtenues permettent de réaliser une courbe d’étalonnage. On va déterminer la composition des tri-peptides provenant de l’hydrolysât de caséine à l'aide d'une chromatographie sur couche mince, dans un solvant contenant de l'eau, de l'acide acétique

Détermine l’absorbance de la solution d’amidon qui n’est pas hydrolysé, on soustrait la valeur de cette absorbance aux autres tubes qui contiennent de l’amidon et chacun a un pH qui varie pour obtenir seulement l’absorbance seulement l’absorbance et donc la concentration de l’amidon hydrolysé. Calcul de V₀ : On détermine grâce à la gamme étalon quelle concentration en amidon est présente à cette absorbance. Cette concentration en amidon hydrolysé est synthétisée au bout de 15 min. Pour retrouver la vitesse