ARN polymérase

maladies secondaires deviennent apparentes. De plus, les rétrovirus, incluant le VIH, sont incapables de survivre sans infecter les cellules d’un organisme. Celui du SIDA, de par sa structure complexe, se compose d’un matériel génétique formé par un ARN simple brin (présent en double exemplaire) pour permettre sa reproduction, de protéines associées et des enzymes virales provoquant les réactions chimiques dans les cellules infectées, le tout contenu dans deux « coques » protéiques appelées capsides

sont plus spécifiques et plus sensibles que les sondes courtes Le degré de spécificité est aussi fonction des conditions d’hybridation, de lavages. Pour la détermination de l’espèce bactérienne -> sondes ADN dirigées contre les ARNr (en particulier ARN 16S) Les ARNr sont présents à plus de 100 000 copies par bactérie ->bonne sensibilité de la méthode ->très conservés au sein d’une même espèce Révélation des hybrides sondes-acide nucléique cible s’effectue par un marqueur incorporé dans la structure

de plus en plus fiables et performants. D’autre part, on maîtrise de mieux en mieux la production des ADN par les bactéries recombinantes et l’on parvient à des rendements de l’ordre de 5 mg d’ADN par litre de culture. L’utilisation de sondes à ARN (acide ribonucléique) est plus intéressante que l’utilisation de sondes à ADN. En effet, la plupart des cibles d’ADN sont présentes en une copie unique dans les chromosomes bactériens. Quelques rares séquences d’ADN sont au nombre de 2 à 10 copies

résulte de l'expression du matériel génétique, elle se déroule en plusieurs étapes : transcription de l'ADN en ARN, traduction de l'ARN en une chaîne polypeptidique, repliement de celle-ci (chez les eucaryotes s'insèrent des phases de maturation où l'on coupe et modifie la séquence synthétisée). La copie du génome est réalisée par toute une machinerie protéique permettant à l'ADN polymérase d'accéder à la séquence et de la copier, selon le principe d'appariement des bases. La partition de la cellule

de décalage du cadre de lecture, pas besoin d’ajouter un nucléotide.Préparer les ARN totaux (l’origine des cellules doit être humaine puisque car la protéine Raf est produite dans tous les types cellulaires).Après la composition des amorces viens l’extraction des ARN totaux :Du détergent SDS (ou Sarcosyl), un agent dissociant, une solution tampon et un agent réducteur sont utilisés pour mettre en suspension ces ARN et centrifuger le tout pour éliminer les débris cellulaires.L’ARN est extrait par

par la cellule) interviennent et augmentent le taux de transcription. Les répresseurs, au contraire, le diminuent. Ils agissent tous les deux en se liant à l’ADN sur des séquences bien définies au niveau des promoteurs et interagissent avec l’ARN polymérase. * Il y a deux modes de régulation majeurs : ▪ Le contrôle négatif : un répresseur se lie à une séquence d’ADN au niveau du promoteur et empêche la traduction. ◦ Lors de la régulation de protéines répressibles, le répresseur est rendu

(permettant la glycolyse, la biosynthèse des oses, des acides gras, des acices aminés et des nuclotides) et des protéines libres du cytosquelette. Toutes ses protéines représentent 20% du poids du cytosol. β) Les autres constituants - ARN (10 à 20% des ARN totaux de la cellule) - Sucres - Nucléosides et nucléotides - Ribosomes et polysomes (=association de l’ARN avec tous ses ribosomes) - Acides aminés - Ions (K+, Mg2+) Le cytosol est le siège du métabolisme intermédiaire, c'est-à-dire

par endocytose , par exocytose . ), communication ( grâce a des récepteur elle peu reconnaître les substance avec qui elle va interagir , les substances de l’extérieur . ) Le noyaux qui est lui même compose de nucléole ( le noyaux du noyaux forme de ARN ) , de nucleoplasme ( gel dans lequel baigne la chromatide ) , les chromatides ( forme d ADN ) : isole le matériel génétique ( ide ) et donc le protégé des lésion dans la cellules . ( avantage que la cellule procaryote ( sans noyaux ) n'as pas . )

intermembranaire-->matrice. Il contient les protons qui proviennent de la chaîne respiratoire mitochondriale ainsi que le cytochrome C qui circule entre les deux membranes. La matrice (compartiment intérieur) contenant l’ADN mitochondrial circulaire, des ARN, des mitoribosomes, des ions et toutes les enzymes impliquées dans la fonction de la mitochondrie. Figure 2. Passage passif des petites molécules par la porine de la membrane externe des mitochondries.

PCR est constitué de trois étapes importantes : • Dénaturation par chauffage ADN pour séparer les deux brins qui le composent. • Hybridation des amorces (PU, PR) aux extimités de la séquence recherchée ESR1 • Elongation grâce à l’action de ADN Polymérase (mix Go Taq). Figure 5 : Amplification PCR La technique de l'électrophorèse sur gel d'agarose est basée sur la séparation des acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique. Cette séparation s'effectue à travers la