Chromatographie Sur Colonne

2,1/ Le principe de l'UPLC La chromatographie est une techniques analytique qui permet de séparation des constituant d'un mélange en phase homogène liquide ou gazeux. Le principe repose dur l'équilibre de concentration des composés présent entre deux phases en contact: la phase stationnaire ( emprisonnée dans la colonnes) et la phase mobile qui se déplace. La séparation est basée sur l'entraînement différentiel des constituant présent dans la colonnes. Ces derniers la parcourent avec des

Donner une conséquence sur l’aspect du beurre et de la margarine. III.A.3 Pour identifier les triglycérides présents dans un échantillon de matière grasse (beurre ou margarine), on peut réaliser une chromatographie en phase gazeuse. Pour cela, il faut injecter un échantillon à analyser dans une colonne. L’échantillon est alors vaporisé. Les triglycérides ayant des températures d’ébullition très élevées, il faut commencer par réaliser une transestérification des triglycérides en esters méthyliques

8 5- Cosédimentation ……………………………………………………..9 II) Résultats et discussion 1- Purification de la stathmine ……………………………………..9 a- La pré-culture ……………………………………………………….9 b- La culture bactérienne ………………………………………….11 c- La chromatographie ……………………………………………..11 2- Caractérisation de la stathmine ……………………………….13 a- Dosage de la stathmine ………………………………………..13 b- Turbidimétrie (test de fonctionnalité) ………………….14 c-Expérience de cosédimentation …………………………….16 Conclusion

TP – Séparation de l’albumine du sérum par chromatographie d’affinité I) But Le but de ce TP est l’extraction de l’albumine du sérum humain. II) Principe On effectue pour cela une chromatographie d’affinité. Le sérum est déposé dans une colonne à chromatographie contenant une résine de Bleu Sépharose CL-6B, spécifique à l’albumine, et est élué à l’aide de 2 tampons différents. Lors du lavage, où l’on utilise le tampon A, les protéines non spécifiques ne sont pas retenues dans la résine et sont

sur plusieurs paramètres du sirop (dosage de Fer, uniformité de masse, dosage des paraben) qui permettent d’informer sur sa qualité. Dans notre travail, nous nous intéresserons à l’analyse de détermination du poids moléculaire en utilisant la chromatographie par perméation de gel. Elle permet d’identifier le principe actif de notre forme pharmaceutique. L’objectif de notre travail est de valider la méthode de détermination du poids moléculaire. Ce travail se divise en quatre parties : Présentation

ou par précipitation. Méthodes de purification Les méthodes de purification des acides nucléiques issus d’extraits cellulaires sont généralement des combinaisons de deux ou plusieurs des techniques suivantes : • extraction/précipitation, • chromatographie, • centrifugation et • séparation par affinité. Une brève description de ces techniques sera donnée dans les paragraphes suivants (Zimmermann et al., 1998). Analyse d’échantillons alimentaires pour la présence d’organismes génétiquement

(Graisser la partie male de la colonne)- Connecter le bas de la colonne à l’arrivée d’eau - Mettre l’eau en route à faible débit- Placer la colonne sur le ballon - Installer le système de chauffage et d’agitation- Monter le support élévateur - Allumer l’agitateur magnétique chauffantIV- Consignes et précautions / Erreurs à éviterAlimentation d’eau : - Mettre l’eau en route avant le système de chauffage - Les tuyaux ne doivent pas toucher la plaque chauffante - La colonne réfrigérant doit être alimentée

interactions polaires sont caractérisées par des liaisons hydrogène, dipôle-dipôle, dipôle induit/dipôle, p/p. Les interactions apolaires sont généralement caractérisées par les liaisons de Van der Waals ou forces dipolaires. Remarque : en chromatographie, ces phases sont aussi appelées phases inverses. 2.1.3 Séparation par échangeurs d’ions • Polymères organiques Les interactions ioniques ou électrostatiques ont lieu entre un soluté chargé (ionique) et une phase solide portant des

ensuite les révéler par réaction colorée à la ninhydrine. Chromatographie par échange d'ions On a des billes de résine qui portent des groupement chargés. On fait varier le pH. On a des profils de chromatographie par échange d'ions: acides; hydrophobes (sans charge); basiques. Chromatographie Liquide Haute Pression HPLC Technique la plus utilisée, la plus populaire dans les laboratoire. On a une colonne de chromatographie où on fait passer un solvant sous haute pression. Le détecteur

Cortisol sanguin et urinaire. Ferritinémie. Et aussi le dosage des Facteurs tumoraux : -CA 15-3 : Ag circulant associé au tissu mammaire. -CA 19-9 : Ag circulant associé cancer du pancréas et du colon. -CA 125 : Ag circulant associé cancer de l’ovaire. -ACE : Ag circulant associé au cancer du colon et rectum - αfoeto protéine : est une glycoprotéine du sérum fœtal : cancer du foie et du testicule. -Le prélèvement est acheminé vers l’unité d’hormonologie en tube sec sans anticoagulant. -Puis