Hémolyse

Problème : Je n’ai pas réussi à avoir un retour veineux lors du premier prélèvement j’en ai donc effectué 2 autres sur l’autre bras où j’ai pu remplir mes tubes mais le garrot était resté trop longtemps et le laboratoire nous ont informé que le sang était hémolysé. Ce jour là c’était la première fois que je réalisais un prélèvement veineux dans son ensemble et j’étais donc un peu stressée, je manquais de dextérité dans mes gestes et je prenais mon temps pour acquérir la bonne technique. Axes d’améliorations :

avec l’âge - 2 types de calcul Cholestéroliques - Les plus fréquents (80%) - Purs ou mixtes (part pigmentaire) - Facteurs associés Femme Obésité Grossesse Facteurs génétiques Médicaments Pigmentaires - Noirs Faits de bilirubine non conjuguée Hémolyse (drépanocytose+++) Cirrhose - Bruns Faits de bilirubine conjuguée (Calcium) Calculs de la VBP Infection des voies bilaiires Sténose V – HISTOIRE NATURELLE DE LA LITHIASE BILIAIRE - Asymptomatique dans 80% des cas - 10 à 15% de la population -

découvrent par eux-mêmes. Sur le protocole n°2, nous avons eu quelques soucis avec la méthode en milieu liquide. En effet, nous ne savions pas quelle quantité d’antibiotique, de bouillon Mueller-Hinton et de suspension bactérienne mettre dans les tubes à hémolyse. De ce fait, lors de notre premier essai, nous avons réalisé une galerie d’antibiogrammes avec une concentration en antibiotique mille fois plus élevée que la concentration théorique. Les résultats obtenus n’étaient pas exploitables. Après cet

entre 80 et 100 fl) seront séparées en fonction de la numération des réticulocytes : - Support de Cours (Version PDF) ● Anémie régénérative avec réticulocytes > 150 G/L : Elles traduisent une régénération médullaire après hémorragie aiguë, hémolyse ou chimiothérapie. Anémie régénérative avec réticulocytes < 150 G/L : Elles traduisent une atteinte centrale et seront explorées par le myélogramme après avoir éliminé systématiquement : ○ ○ ○ ● Une insuffisance rénale Une pathologie thyroïdienne

prélèvements : à t = 0, 10, 25, 40, 60 et 75 min. Le prélèvement à t0 sert à définir la valeur normale de référence de la glycémie chez le rat. Directement après avoir prélevé, on dilue au 10ème l’échantillon sanguin, pour éviter toute coagulation ou hémolyse. Pour ce faire, on prélève 100µL de sang que l’on place dans 900µl de sérum physiologique. On centrifuge ensuite (3000 t/min à 15°C pendant 5min) pour récupérer un surnageant de plasma sanguin (ici c’est du plasma et non du sérum car c’est du sang

erlenmeyer de 100 mL avec un bouchon.- Ampoule à décanter, éprouvettes de 10 mL, 50 mL et de 100 mL.- Pipette graduée de 10 mL, poire.- Pipette d’eau distillée, marqueur pour la verrerie.- Cuve à chromatographie fermée contenant déjà l’éluant, un tube à hémolyse. - Plaque CCM, capillaires ou pipettes pasteurs. - Poudre inconnue (curcuma). - Poudre de curcumine. - Petite pipette en plastique. - Six cuves pour spectrophotométrie UV-Visible.Documents mis à disposition des élèves :- Données relatives aux risques

2 béchers de 100 mL | 3 | 45 | pH-mètre + électrode spécial lait+ solution tampon pH7 +Agitateur magnétique + barreau aimanté | | 1 poste pour le groupe | Pipette jaugée 10 mL 1 trait | 1 | 15 | Pipette jaugée 25 mL 1 trait | 1 | 15 | Tube à hémolyse | 1 | 15 | Réactifs | | | Lait (Cru et Pasteurisé) apporté par les élèves | 1 L | | Alcool à 80° | | 1 pour 2 | Solution d’hydroxyde de sodium de concentration molaire 1/9ème mol.L1 (à titrer) mettre le titre exact sur le flaconFlacon pour

destruction des cellules du foie). Dans de plus rares cas elle peut conduire à une insuffisance hépatique fulminante. 4.2. Les globules rouges L’augmentation du cuivre dans le sang peut s’accompagner d’une destruction anormale des globules rouges (hémolyse). Elle provoque une anémie, un nombre trop faible de globules rouges, donc un transport insuffisant de l’oxygène, se traduisant par une fatigue excessive et une sensation de faiblesse. 4.3 Les reins Les malades ont un excès de protéines dans

protocole du TP jusqu’au bout… Matériel (Au bureau, sous la hotte ou sur la paillasse) : - Plaque de chromatographie en silice ; - Bécher 250 mL contenant la solution de migration (0,5 cm), fermé par une boite de pétri ; - Tubes à hémolyse contenant la solution test de glucose G et la solution de maltose M ; - Bécher 100 mL contenant du champagne C ; - Coupelle pour le jus de raisin R ; - Cures dent ; - Portoir avec deux tubes à essais ; - Etuve ; - Sèche-cheveux ;

Prélèvements : - Abaisser le chauffe- ballon et attendre que l’ébullition cesse. - Faire le prélèvement à la pipette pasteur le plus rapidement possible et ouvrant le moins possible le bouchon du ballon bicol. Placer le prélèvement dans le tube à hémolyse qui correspond à la date de prélèvement et laisser ce tube bouche dans le bécher place dans la glace : on réalise ainsi "une trempe". ATTENTION : les vapeurs s’échappant par le col du ballon sont très chaudes ! - Inutile de diluer pour faire le dépôt