Hémolyse

Hémobiologie et Transfusion Sanguine Page 1 Dr ABBASSEN N La membrane et Hémoglobine du globule rouge Le GR peut être schématiquement représenté comme un sac (= membrane) contenant de l’hémoglobine (= pigment responsable de la fonction de l’Hb) et des enzymes (=protection de l’Hb et de la membrane contre l’oxydation).60% d'eau ; Hb = 92% du poids sec. Divers électrolytes (potassium, sodium, chlore), glucose. 1. La membrane

Le culot globulaire est suspendu dans cette solution puis centrifugé. Comme précédemment, les lipides encore présents sont aspirés. Cette étape est répétée autant de fois que nécessaire pour éliminer tous les lipides. DIAPOSITIVE 9 : Etape 3 Hémolyse Cette étape est basée sur le phénomène d'osmose qui permet à l'eau de diffuser vers le compartiment le plus concentré pour diluer les solutés qui ne peuvent pas traverser la membrane semi-perméable des cellules. L’objectif est de lyser la membrane

Gastrite : inflammation de l’estomac Hématémèse : vomissement de sang Hématurie : présence de sang dans les urines Hémiplégie : paralysie de la moitié du corps Hémostase : Mécanisme amenant à l'arrêt du saignement lorsqu'un vaisseau a été blessé Hémolyse : destruction des globules rouges Homogène : similitude Incontinence : le fait de ne pas pouvoir se contenir Intradermique : sous la peau Isogroupe : être du même groupe sanguin Kleptomanie : tendance maladive qui porte l’individu à voler Lobectomie

inappropriée d’ADH Sudation Perte d’eau (diabète), soif ou apport d’eau, exercice intense Potassium b. Pathologies HYPERKALIEMIE Apport exogène HYPOKALIEMIE Apports insuffisants IS (Addison) ou ttt par antialdostérone Pertes digestives, rénales Hémolyse, chimiothérapie Hyperaldostéronisme Exercice intense Médicaments : Diurétiques thiazidiques, corticoïde IR importante Hyperglycémie Alcalose métabolique (EC IC) Acidose Rhabdomyolyse K+<3 mmol/l ou > 5.5 mmol/L = Urgence : Prévenir un médecin

Remarque : L’incubation après ensemencement de ce milieu se fait à 30°c à l’étuve pendant 24 à 48H. La pousse des levures conduit à la réalisation du TEST DE FILAMENTATION sur sérum humain. Méthodologie du test de filamentation - Dans un tube à hémolyse, introduire quelques gouttes de sérum humain ; - Prélever une colonie de levures sur la boite de pétri à l’aide de l’anse de platine stérilisée et l’introduire dans le tube ; - Homogénéiser le mélange au vortex ; - Incuber à 37°c pendant 3h ;

dépôts migrés et séparés par le rouge Ponceau S, un composé aromatique qui se lie de façon réversible aux acides aminés. Résultats. 1. Résultats après analyse au spectrophotomètre. Le collecteur est réglé pour distribuer 1,5 mL dans chaque tube à hémolyse pour que tous les échantillons, gamme étalon et blanc compris, correspondent tous à 1,5 mL de solution + 2 mL de Biuret, au total 3,5 mL. Ainsi toutes les valeurs d'absorbance mesurées peuvent être comparées entre elle sans calculs supplémentaires

vide Hotte aspirante Agarose Tampon Phosphate PBS 1x Solution de BSA à 10mg/mL Solution anti-albumine bovine Solution d’antisérum bovin total Solution de sérum bovin total Solution inconnue A Solution inconnue B Papier Parafilm Tube à hémolyse Tube Falcon Tube Eppendorf Pipette graduée de 10 mL Pipette Pasteur B. Méthodes Préparation du gel d’agarose Un gel à 1% d’agarose est un gel dont 1000mg d’agarose aura été dissout pour obtenir pour 100mL de solution donc pour préparer

(dilué) au milieu hypertonique (concentré), canaux ioniques spécifiques= aquaporine, l’eau modifie le volume cellulaire (tonicité) Trois cas de figure : * Solution hypotonique : l’eau rentre + qu’elle ne sort, la cellule gonfle (si explosion hémolyse) * Solution hypertonique : l’eau sort + qu’elle ne rentre, la cellule rétrécie (crénelés) * Solution isotonique : l’eau entre aussi vite qu’elle ne sort b) transport actif : Concerne les substances trop grosses pour les canaux, qui

squelettiques et cardiaques) et dans les GR Répartition dans la cellule : cytoplasmique et mitochondriale Au cours de l’IDM Elévation : 10h Activité maximale : 24-48h Normalisation : 3-6j Autres causes d’augmentation Rhabdomyolyse Cytolyse hépatique Hémolyse Embolie pulmonaire Myocardite et péricardite  Lactate-déshydrogénase (LDH) Présente dans les tissus : Cœur, reins, foie, muscles, rate, poumons, utérus, GR Enzyme tétramérique formée de 2 type de sous-unité : M (muscle) et H (cœur) Il existe

  Culture  numéro  6       GSF : Isolement de bonne qualité : on observe nettement les 2 types de colonies présentant le même aspect (bombées et rondes). Sur les plus grosses, on remarque un halo complet à bord net signifiant une hémolyse totale donc une bactérie bétahémolytique. Cette gélose sera sélectionnée dans le but de différencier les deux colonies, vue que ces dernières sont bien isolées. Chapman : Isolement de très bonne qualité, on observe le virage du rouge de phénol vers