Nucléase

mécanique. Ça c'est au niveau de l'estomac avec la fameuse pepsine ogène qui devient de la pepsine donc ça c'est c'est chimique au niveau du pancréas qui va sécréter la lipase c'est la digestion chimique mastication c'est de la digestion mécanique nucléase et protéase ça c'est évidemment chimique 3.Voyez-vous un effet de la quantité de trypsine sur l’amplitude de la digestion? Expliquez ce résultat. Alors évident la réponse c'est oui donc est-ce qu'il y a une différence donc la réponse c'est oui

long du brin retardé ouvrant l’hélice et créant une fourche de réplication. Le stress de torsion créé par le déroulement est libéré par l’activité de l’ADN topoisomérase. Pour éviter les réappariements des simples brins (et leur digestion par des nucléases) les protéines SSB ou RP-A se lient aux simples brins. Selon le modèle accepté aujourd’hui, le brin retardé est sous forme d’une boucle permettant la synthèse en parallèle des deux brins. Voir figure Chez les bactéries: -synthèse des amorces

phosphore α d’une mol GTP c. Méthyl transférase qui ajoute un résidu méthyl sur le guanine terminal Cette coiffe intervient dans l’initiation et la synthèse protéique et stabilise les ARNm en protégeant leur extrémité 5’ des phosphotases et des nucléases. 2- Mise en place de la queue polyA pour 70% des ARNm. Séquence non codée par l’ADN. Les ARNm dépourvus de PolyA sont dits PolyA- (ARNm des histones); Elle est introduite par un polyA phosphotase ou polyA polymérase, après formation du pré-m

généralement inférieure de 15°C à la Tm de l’ADN concerné. Les hybrides formés sont quantifiés selon trois méthodes: 1. les méthodes spectrophotométriques (la diminution en DO à 260nm est due à l’augmentation du taux des hybrides) 2. la technique de la nucléase S1 (digestion des ADN et ARN simples brins) 3. La chromatographie sur hydroxylapatite (Seuls les doubles brins se fixent en raison d’une forte concentration en sels). 2/ Hybridation sur support solide • La séquence complémentaire cible est

d’ADN. 8- A propos du nucléosome et des histones, on peut énoncer les propositions suivantes : a. Le nucléosome est constitué de quatre types d’histones et d’environ 200 pb d’ADN. Entraînement n°8 b. L’ADN de liaison est sensible à l’action des nucléases contrairement à l’ADN interagissant avec les histones du nucléosome. c. Les histones du nucléosome s’associent en hétérodimères. (H2A-H2B et H3H4) d. La queue C-ter des histones qui s’étend à l’extérieur du noyau du nucléosome est soumise à différentes

à des hybrides de ADN/ARN 3    Présence de bases modifiées: dihydrouracile, pseudouridine,.. On trouve un OH en 2' ce qui porte à: o pas de duplex de type hélice B o réactivité chimique o sensibilité au traitement alcalin sensibilité aux nucléases: Rnase A, H Fonction Les ARN peuvent avoir différentes fonctions selon leur types. En effet, on a différents types de ARN:    ARN r: o participe à la traduction de l'information génétique en protéines ARN m: o il a une vie très brève ARN t:

primase = synthèse ARN (10 bases)+ADN (20-30 bases) - Fragments d’Okasaki : plus petits ~ 100-200 bases - 2 ADN polymérases pour synthèse : Pol et Pol (fidèle, vitesse 50 nucléotides/s) - Réplication discontinue (dissociation, reformation) - Nucléase FEN1, RNase H = élimine amorce ARN (voir diapo suivante) FEN1 = Flap EndoNuclease 1 IV – TERMINAISON DE LA REPLICATION 4.1 – Chez procaryotes Site ter : ‘’voie en unique’’ sens 10 séquences de 23 pb orientées en sens inverse.

étapes de l’extraction de l’ADN? Réponse : Maintenir le mélange filtré à la température la plus froide possible permet de ralentir l’action des enzymes naturellement présentes dans les cellules d’oignon. En effet, il existe dans les cellules des nucléases qui pourraient s’attaquer à l’ADN et le dégrader. Pourquoi utilise-t-on de l’éthanol à 95 %? Réponse : Lorsque l’ADN est libéré de son noyau et de la cellule, il faut ajouter de l’alcool pour le récupérer. L’alcool à 95 % est moins dense que

quantités croissantes échantillon + - SO3 + + + + + + Echangeur d’anions = gel porteur de charges fixes positives Echangeur de cations = gel porteur de charges fixes négatives Chromatographie d’affinité é t i affi n é t i n Purification de la nucléase de staphylocoque par chromatographie d’affinité -le compose représenté en (b) a été lie par covalence à de l’agarose activé par le CNBr ffi a e s a h P e é s r e v in La chromatographie en phase inverse la silice dite "C18" est un gel de silice

cogiter! Certaines bactéries produisent des toxines dirigées contre d'autres bactéries: Changements morphologiques de lignées cellulaires induits par des toxines Bactériocines ex colicines d'E. coli: colicine A (pore forming) & colicine E (nucléases) 3 domaines: interaction avec un récepteur, translocation, et activité ex microcines (peptides entrée 8