Peroxydase

technique d'évaluer sa taille, sa concentration, les variations de cette concentration, effectuer des comparaisons de concentrations entre différents groupes, etc. on place ensuite un deuxième anticorp anti anticorp primaire qui avec l’action de la peroxydase produit de la lumière. On place ensuite la membrane sur un film photographique pendant 20 secondes les photons (particule de lumière) émit par les anticorps fixés sur les protéines sont photographier sur le film. On place ensuite ce dernier dans

électronique (très ressemblant aux lysosomes) différentiation sur critères biologiques et enzymatiques II. FONCTION - fonction OXYDATIVE - 2 familles d’enzymes : - oxydase (enzymes d’oxydo-réduction) qui sont des flavoprotéines - péroxydases (exemble de catalase) - oxydases consomment de l’oxygène moléculaire pour oxyder divers substrats et produisent du péroxyde d’hydrogène. Le péroxyde d’hydrogène est utilisé par la catalase.

moléculaire est réduit selon la formule : SH2 + O2 S H2O + ½ O2 H2O2 L’eau oxygénée qui se forme est très toxique pour les bactéries, et les bactéries aérobies possèdent des déshydrogénases oxytrophes qui détruisent l’ H2O2, soit par catalases ou par peroxydases selon la réaction : H2O2 H2O + ½ O2.  Technique : - Prélever une colonie et la déposer sur une lame propre, puis déposer sur cette colonie une goutte d’H2O2.  Lecture : - Dégagement des bulles gaz : La bactérie est Catalase +. Etude du métabolisme

saturation. La membrane est lavée 3 fois au TBS 1X- Tween 0,1% et incubée avec l’anticorps secondaire couplé à une péroxydase durant 1 h sous agitation à température ambiante dans la solution de saturation. Ensuite, la membrane est lavé 3 fois dans du TBS 1X- Twenn 0,1 %, et incubée 5 minutes avec du révélateur (Kit Pierce SuperSignal West Dura Extended), qui est un substrat des péroxydases liées aux anticorps secondaires et qui émet de la luminescence lorsque celles-ci le dégradent. La membrane est

chaine respiratoire mitochondriale. le manganèse (Mn), est utilisé pour la synthèse de vitamines (B1 et E) et sert de co-facteur à certaines enzymes du métabolisme. le molybdène (Mo), le nickel (Ni), le sélénium (Sé), constitue la gluthation péroxydase, la principale enzyme anti-oxydante cellulaire. le vanadium (V), le zinc (Zn)est retrouvé dans de nombreuses enzymes et intervient dans la spermatogénèse. Il permet également le transport de l’insuline. l’étain (Sn) sont des oligoéléments essentiels

dépourvues de catalase. Les peroxydes organiques sont également détruits par les peroxydases et par l’action des antioxydants apportés par l’alimentation : l’acide ascorbique (vitamine C) et les tocophérols (vitamine E). Parmi les enzymes qui interviennent dans le système de défense, citons les superoxydes-dismutases (SOD), enzymes à base de cuivre, de zinc ou de manganèse, et, particulièrement la sélénio-glutathion-peroxydase, enzyme à base de sélénium. L’appareil respiratoire possède ainsi un système

des enzymes (peroxydases) - une glycoprotéine : la thyroglobuline. 200. - Les cell. Thyr. captent l’I- aliment. par un symport Na+/I- (NIS) - La TSH stimule l’activité du NIS - dans les cell. Thyr. [I-] = 20-40 fois > plasma Iodation intracolloïdale I Peroxydase TSH Désiodase Symport Na+/I- (NIS) I- Na T4 (80%) T3 201. La synthèse des h. thyr. Les enz. combinent l’I- avec la tyrosine de cette thyroglobuline Toutes ces réactions sont catalysées par la peroxydase. Peroxydase T3 (6 µg/24H)

Historique (1): En 1966, le laboratoire « Ames » commercialisait des bandelettes "Dextro-stix" comme système de mesure glycémique (taux de sucre dans le sang). Ces bandelettes utilisaient la réaction chimique enzymatique : la glucose oxydase/peroxydase. Elles nécessitaient 60 secondes de contact avec une goutte de sang capillaire, puis un rinçage à l’eau et un essuyage par tamponnement, avant la lecture visuelle en mono couleur du résultat, sur la bandelette. En 1980, véritable révolution technologique

(Glutathion-S-Transferase). Cette étape est appelée le « coating ». Les préparations des scFv sont ensuite déposées dans les puits de la microplaque. Les scFv non liés sont éliminés par lavages. L'anticorps traceur est couplé à une enzyme (la « horseradish peroxydase ») catalysant la formation d'un produit coloré. Dans notre cas, les scFv sont révélés par un anticorps anti C-Myc HRP qui se lie sur notre anticorps sur l’étiquette peptidique c-Myc des scFv(fig.1). On ajoute ensuite un substrat chromogène le TMB

Remercîments : Je tiens tout d'abord à remercier Monsieur  pour m’avoir permis d’effectuer mon stage au côté de son équipe.Je remercie Mademoiselle, tuteur de stage, de m’avoir accueilli et encadré et d’avoir consacré une partie de son temps à me guider et à m'instruire dans les missions qui m’ont été confiées lors de ce stage.Et l’ensemble des biologistes et techniciens de laboratoires qui m'ont permis d’effectuer mes premiers pas dans le domaine d’analyse médicale.Je tiens à remercier M, qui nous