Zénobe Gramme

hétérotrophe cela veut dire qu’elle utilise des composés organiques comme source de carbone, source d’électron et source d’hydrogène pour les biosynthèses. Yersinia pestis fait partie de la famille des entérobactéries, c’est un coccobacille, ovoïde Gram négatif, immobile, court et non sporulé qui mesure 1.5 x 0.75. A l’aide d’une teinture à base d’aniline, les extrémités du bacille se colorent plus vivement c’est ce que l’on nomme une coloration bipolaire. Cette réaction caractérise le bacille

inclut l'ampicilline et amoxicilline, utilisé dans les infections des voies respiratoires supérieures, infections des voies urinaires, la méningite, les infections à Salmonella.  Peptidoglycane : forme la paroi bactérienne des bactéries à Gram positif et à Gram négatif, assurant la forme des cellules ainsi qu'une protection mécanique et physique. Lyse : désintégration de la membrane d'une cellule biologique par un agent physique, chimique ou biologique, menant à la mort de la cellule. Ribosome :

la préparation des milieux de culture pour le contrôle biologique des aliments ; (page 3) 2- recherche et dénombrement de micro-organismes (bactéries et champignons) ; (page 5) 3- isolement et identification des bactéries pathogènes (coloration de gram, tests d oxydase et de catalase, test sur galerie API) ; (page 8) 4- test de toxicité sur souris ; (page 12) 5- dosage des toxines protéiques (méthode de BRADFORD). (page 14) INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT :

bactéries présentes dans le yaourt. Puis, dans une deuxième partie, nous observerons et nous déterminerons la concentration en levures d’une suspension. Enfin, dans un troisième temps, nous utiliserons différents tests biochimiques tel que la coloration de GRAM, la recherche d’activité catalase/oxydase, la recherche d’endospores bactériennes ou encore la détermination du type respiratoire, afin d’identifier les microorganismes présents sur des aliments contaminés. Pendant toute la durée de ce TP nous travailleront

diverses associations de colorants nucléaires et cytoplasmiques (Papanicolaou, Harris-Shorr) - éventuellement par des colorations particulières dérivées des techniques histochimiques utilisées en histopathologie, comme par exemple, le PAS, coloration de Gram, de Ziehl, argentation de Grocott,...(à la recherche d'agents pathogènes)ou par des techniques immunohistochimiques utilisant des anticorps marqués. L’observation microscopique permet de faire une étude morphologique des cellules d’une espèce bactérienne

frottis – Séchage du frottis Réalisation d’un frottis – Fixation à l’alcool Réalisation d’un frottis – Flambage à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration au violet de gentiane Coloration de GRAM – Mordançage au lugol Coloration de GRAM – Décoloration à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration à fuchsine Coloration de GRAM – Séchage de la coloration V Manipulations : Premier jour 1) Prélèvement de microorganismes dans l’environnement : - Réalisez un prélèvement avec

(contamination de surface, enveloppe) • Potentiel épidémique – Nul (pas de contamination inter-humaine) • Taux d’attaque – 25 à 50 % Bacillus anthracis • 2 formes – Spores : • 2 à 5 µ, Forme de résistance, peut survivre > 100 ans dans les sols – Bacille à Gram positif après germination Charbon « Historique » • Infection des animaux dans les champs contaminés par le charbon • Contamination humaine : – à partir de produits animaux • Laine, poudre d’os ou de sang, peau de chèvre • Ingestion de viande – Pas

différente pour les gram + et les grampeut avoir un rôle dans l’antigénicité. est la cible de certains antibiotiques Membrane cytoplasmique:  membrane trilamellaire formée de phospholipides  barrière osmotique,  contient systèmes de transfert (perméases) qui assurent la pénétration sélective de différentes substances (nutriments, antibiotiques)  le mésosome (invagination)  intervient dans la division cellulaire STRUCTURE BACTERIENNE - Paroi des bactéries à Gram positif : Le peptidoglycane

janvier 2014 Dr I. MARTIN Unité d’Hygiène Inter-Hospitalière CHU SE Plan Rappels • Infection et types d’agents pathogènes • Milieux ordinaires de vie des agents infectieux • Modes de transmission Bactéries : • • • • Structure et coloration de Gram Culture – antibiogramme - nomenclature Flores bactériennes Ultrastructure Antibiotiques et mécanismes d’action Résistances bactériennes, BMR voire BHR Infection Une infection est la pénétration puis le développement de micro-organismes dans un

: –  pathogènes spécifiques pour l homme provoquent une maladie cliniquement définie et physiopathologiquement spécifique •  Ex : BK => Tuberculose Les bactéries Cocci G+ Principaux micro organismes responsables d infections nosocomiales COCCI GRAM POSITIF Microorganisme Staphylococcus Espèce Réservoir principal Mode de transmission Porte d entrée principale epidermidis Humain et animal Contact direct Contact indirect peau et muqueuses dont manuportage Cutanéomuqueux Percutanée   aureus