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Pages: 7 (1720 mots) Publié le: 7 avril 2014
CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE

I - PRINCIPE
La chromatographie est une méthode physique de séparation de mélanges en leurs constituants; elle est
basée sur les différences d’affinité des substances à l’égard de deux phases, l’une stationnaire ou fixe, l’autre
mobile.
La chromatographie sur couche mince, ou sur plaque (CCM), est effectuée surtout en vue d’une analyse d’un
mélange.
Laphase stationnaire solide est fixée sur une plaque, et la phase mobile liquide, nommée éluant, est un solvant
ou un mélange de solvants.
On dépose sur la phase fixe une petite quantité du mélange à séparer et on met cette phase au contact de la phase
mobile.
La phase mobile migre de bas en haut, par capillarité, le long de la phase fixe en entraînant les constituants du
mélange. C’est lephénomène d’élution, qui permet la séparation des constituants du mélange à analyser.
Chaque constituant migre d’une certaine hauteur, caractéristique de la substance, que l’on appelle rapport
frontal ou rétention frontale (Rf) :

hauteur de la tache
Rf =
hauteur du front du solvant

Chaque tache correspond à un constituant et on l’identifie par comparaison du Rf avec un témoin (une mêmesubstance migre à la même hauteur dans des conditions opératoires identiques; même Rf).

II - ETUDE DE SUBSTANCES COLOREES
1 - But
Le but est de séparer trois colorants alimentaires :
- Le jaune de tartrazine; E 102,
- Le rouge d’azorubine; E 122,
- Le vert; E 102 (jaune de tartrazine) et E 131 (bleu patenté).

2 - Mode opératoire
- Remplir la cuve chromatographique du mélange de solvants(hauteur ≅ 0,5 cm).
(60 mL de butan-1-ol + 15 mL d’acide éthanoïque + 15 mL d’eau)
- La recouvrir, afin que l’atmosphère dans la cuve reste saturée en vapeurs d’éluant.
- Sur la plaque chromatographique, tracer au crayon de papier un trait horizontal à 1 cm environ du bord
inférieur. Ce trait ne doit pas tremper dans le solvant d’élution contenu dans la cuve.
- Déposer sur le trait, à l’aidede cure-dents, à 0,5 cm d’intervalle, une microgoutte de :
* jaune de tartrazine,
* rouge d’azorubine,
* vert,
* mélange des trois colorants.
- Laisser sécher les taches avant d’éluer (ou sèche-cheveux).
- Déposer la plaque verticalement dans la cuve et la couvrir.
- Lorsque le solvant a atteint les ¾ environ de la hauteur de la plaque (1 cm du bord supérieur), sortir la plaque
de lacuve et marquer immédiatement le front du solvant (car le solvant s’évapore très vite).
- Lorsque le solvant s’est évaporé, mesurer :

* la hauteur du front,
* les Rf des substances différentes (centre des taches).

III - ETUDE D’UNE SUBSTANCE INCOLORE
1 - But
Le but est de réaliser une analyse d’un produit de synthèse : le paracétamol obtenu à partir du para-aminophénol.

2 - Modeopératoire
- Saturer une cuve chromatographique avec l’éluant suivant :
mélange

toluène / éthoxyéthane / acide éthanoïque / méthanol (60/30/9/1 mL).

- Réaliser, dans des petits tubes à hémolyse ou sur une plaque à godets, les trois solutions dans l’éthanol :
* du para-aminophénol de départ,
* du paracétamol brut obtenu,
* du paracétamol pur obtenu.
- Sur la même plaque chromatographique,faire un dépôt de chaque solution.
- Développer le chromatogramme.
- Révéler en exposant la plaque sous une lampe UV.

IV - IMPORTANCE DE LA GROSSEUR DES TACHES
1 - But
Le but est de tirer des conclusions sur la grosseur des taches à déposer sur les plaques CCM.

2 - Mode opératoire
Réaliser des essais avec un des colorants alimentaires (jaune ou rouge).

V - INFLUENCE DE LA CONCENTRATION1 - But
Le but est de tirer des conclusions sur la concentration du produit à déposer sur les plaques CCM.

2 - Mode opératoire
Réaliser des essais avec du paracétamol pur.

Rq : la manipulation de solvants organiques volatils, inflammables et à odeur piquante nécessite
l’utilisation de la ventilation.

CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE / CCM

I - GENERALITES

Les techniques...
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