CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE

I - PRINCIPE
La chromatographie est une méthode physique de séparation de mélanges en leurs constituants; elle est basée sur les différences d’affinité des substances à l’égard de deux phases, l’une stationnaire ou fixe, l’autre mobile. La chromatographie sur couche mince, ou sur plaque (CCM), est effectuée surtout en vue d’une analyse d’un mélange. La phase stationnaire solide est fixée sur une plaque, et la phase mobile liquide, nommée éluant, est un solvant ou un mélange de solvants.
On dépose sur la phase fixe une petite quantité du mélange à séparer et on met cette phase au contact de la phase mobile. La phase mobile migre de bas en haut, par capillarité, le long de la phase fixe en entraînant les constituants du mélange. C’est le phénomène d’élution, qui permet la séparation des constituants du mélange à analyser.
Chaque constituant migre d’une certaine hauteur, caractéristique de la substance, que l’on appelle rapport frontal ou rétention frontale (Rf) :

hauteur de la tache
Rf = hauteur du front du solvant

Chaque tache correspond à un constituant et on l’identifie par comparaison du Rf avec un témoin (une même substance migre à la même hauteur dans des conditions opératoires identiques; même Rf).

II - ETUDE DE SUBSTANCES COLOREES
1 - But
Le but est de séparer trois colorants alimentaires :
- Le jaune de tartrazine; E 102,
- Le rouge d’azorubine; E 122,
- Le vert; E 102 (jaune de tartrazine) et E 131 (bleu patenté).

2 - Mode opératoire
- Remplir la cuve chromatographique du mélange de solvants (hauteur ≅ 0,5 cm).
(60 mL de butan-1-ol + 15 mL d’acide éthanoïque + 15 mL d’eau)
- La recouvrir, afin que l’atmosphère dans la cuve reste saturée en vapeurs d’éluant.
- Sur la plaque chromatographique, tracer au crayon de papier un trait horizontal à 1 cm environ du bord inférieur. Ce trait ne doit pas tremper dans le solvant d’élution contenu dans la cuve.
- Déposer sur le trait, à l’aide de