Cinétique enzymatique

Exercice 1 Exercice enzymologie Pour l’étude d’une poudre A possédant une activité enzymatique, on en dissout 0,1 g dans une solution tampon convenable et on complète à 10 ml, on obtient ainsi la solution B. Les mesures d’activités enzymatiques sont effectuées après dilution de 1 ml de solution B dans 9 ml de solution de substrat (S). La concentration en substrat dans le milieu réactionnel est de 10 Km (Km = 1 mmol.L-1) [P] (µmol.L-1) 10 5ème année de Pharmacie 2010-2011 K. CHIKH 8 6 4 2 0 2

enzymes participent à: •Synthèses de molécules biologiques L acides aminés; exhausteurs de goût etc…. •Technologie alimentaire (viande; lait; fromage, boissons etc….) •Elaboration de nouvelles techniques analytiques (électrodes et capteurs enzymatiques) pour détection et dosage immédiat et donc de contrôle en temps réel d’un produit donné L’avenir des enzymes sera plus prometteur Dès que la protéine sera : plus efficace, plus stable , et d’une durée de vie plus longue ce qui nous conduit

Cinétique enzymatique Mesure de l’activité enzymatiqaue Dr AKSAS 1 Cinétique enzymatique La R enzymatique peut être subdivisée en 3 étapes: 1. Phase préstationnaire; 2. Phase stationnaire; 3. Phase post-stationnaire. 2 Cinétique Michaelienne Représentons les vitesses initiales de R en fonction des concentrations du substrats 3 Cinétique Michaelienne  Les vitesses mesurées croissent en fonction des concentrations du substrat.  Mais cette relation n’est pas linéaire :

Enzymologie Introduction : Nature biochimique : Protéine Rôle : = biocatalyseur ( accélération de la vitesse d'une réaction) La catalyse enzymatique : 1.1 Définition : Catalyseur : -Augmente la vitesse de la réaction -Se retrouve intact à la fin de la réaction -Agit à très faible dose -"Réutilisable" -Ne modifie jamais le sens de la réaction -Ne change pas la constante d'équilibre L'enzyme diminue l'énergie d'activation d'une réaction 1.2 Caractéristique générales -Une enzyme réagit sur une seul

une réaction enzymatique : pour transporter un substrat ; pour accepter un produit ; comme participant à la structure de l’enzyme. Ions (exemple : atome de zinc de l’anhydrase carbonique) ou petites molécules minérales (exemple : H2O, milieux biologiques) Certains cofacteurs = molécules + complexes synthétisés par la cellule = coenzymes Coenzyme : molécule biologique (synthèse uniquement dans les cellules vivantes) intervenant comme cofacteur indispensable dans la catalyse enzymatique d’une réaction

paramètres cinétiques vis-à-vis de l’ONPG de l’enzyme soluble : 5 b. Etude de l’influence de la concentration en enzyme soluble et détermination de la vitesse de réaction et des paramètres cinétiques vis-à-vis de l’ONPG de l’enzyme immobilisée : 5 c. Détermination de la vitesse de réaction et des paramètres cinétiques vis-à-vis du lactose de l’enzyme soluble et étude de l’influence d’un effecteur chimique (ONPG) : 6 d. Détermination de la vitesse de réaction et des paramètres cinétiques vis-à-vis

biochimiques. Partie enzymologie Définir les termes d'enzymologie : enzyme, substrat, produit, coenzyme, activateur, inhibiteur, réaction enzymatique, propriétés et classification des enzymes (nomenclature). Rappeler la cinétique chimique, en terme de notion d'ordre d'une réaction, réactions élémentaires et complexes formées. Etudier la vitesse d'une réaction enzymatique en fonction du temps, de la concentration d'enzyme, de la concentration du substrat, en représentation graphique normale ou en double

universite de limoges | TRAVAUX PRATIQUES UE ENZYMOLOGIE | Faculté des Sciences et Techniques, L3 BBMCG | | Claire Carpenet;Guillaume Kerbiquet;Pierre Peynichou | 02/05/2011 | Etude cinétique d’une enzyme multimérique : l’uréase. | uréase uréase L’uréase est une enzyme catalysant l’hydrolyse de l’urée (CH4N2O) en ammoniac (NH3) et dioxyde de carbone (CO2) par la réaction suivante : NH2-CO-NH2 + H2O CO2 + 2NH3 En 1926, James Summer

Exercices - Cinétique enzymatique 1. Que devient la valeur de v /Vmax quand [S ] = 4 K m ? 2. Si Vmax = 100 μmol / ml / s et Km = 2mM, quelle est la vitesse de la réaction quand [S]=20 mM ? 3. Dans une réaction à cinétique de type Michaelis-Menten, k1 = 7 X 10 7 M −1 s −1 , k −1 = 1 X 103 s −1 , et k 2 = 2 X 10 4 s −1. Quelles sont les valeurs de Ks et de Km? La fixation du substrat atteint-elle l’équilibre ou plutôt l’état stationnaire? 4. Les résultats suivants sont obtenus au cours d’une

ETUDE CINETIQUE DE LA TRYPSINE I.BUT : Le but de ce TP est de déterminer les paramètres cinétiques de la Trypsine. Tout d’abord, en étudiant la vitesse de la réaction au cours du temps puis en étudiant l’influence de la concentration d’enzyme et de substrat sur la cinétique enzymatique de la Trypsine. II.PRINCIPE : La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. C’est une endonucléase qui hydrolyse les liaisons peptidiques