Cinétique enzymatique

WESTERN BLOT PRINCIPES : Un western blot, ou immunoblot, est une méthode de biologie moléculaire qui permet la détection de protéines spécifiques sur une membrane. La technique se déroule en plusieurs étapes : des échantillons protéiques sont déposés sur un gel d’électrophorèse et sont séparés en fonction de leur poids moléculaire. Pour cela, un courant électrique est appliqué dans le gel. Plus les protéines ont une taille importante, moins elles migrent vite ; une fois que les protéines

SIDA (Syndrome d'immunodéficience acquise) Problème : Que se passe-t-il lorsque notre système immunitaire est perturbé ? Les différentes phases de la maladie 1. Il y a la Phases dite d'incubation Cela après la pénétration du VIH, ou de cellules infectées par le VIH dans l'organisme, le VIH se multiplie très vite et infecte un grand nombre de cellules. Le système immunitaire met du temps à réagir, et le VIH en profite. Après quelques semaines, le système immunitaire a suffisamment

les systemes de recuperation d'energie cinetique. TPE 2011-2012 Introduction Le choix de notre sujet s’est porté sur le Système de Récupération de l’Énergie Cinétique, ou SREC (KERS en anglais pour Kinetic Energy Recovery System). Le système de récupération de l’énergie cinétique, dit SREC (ou KERS en anglais) est un système de freinage ayant pour but de récupérer l’énergie cinétique d’un objet lors d’une décélération et de la convertir en

Laboratoire 337, 3ème étage h.becker@ibmc.u-strasbg.fr http://www-ibmc.u-strasbg.fr/arn/enseignement/Hubert.html I. Introduction 1. Caractéristiques des enzymes Toutes les enzymes sont des protéines (presque toutes……ribozymes) • Les protéines enzymatiques sont des catalyseurs: concentrations très petites augmentent la vitesse des réactions chimiques, sans en modifier le résultat. • A la fin de la réaction la structure de l’enzyme se retrouve inchangée. • Une enzyme donnée est spécifique d’une

chimique (= catalyse ) sans être elle-même modifiée. La cinétique enzymatique étudie la vitesse des réactions enzymatiques afin de comprendre comment l’enzyme agit sur son substrat pour le transformer en produit. La vitesse initiale (= de départ) d’une réaction enzymatique est la vitesse maximale de la réaction. q13-Cours : Etudier une cinétique enzymatique pour comprendre le mode d’action d’une enzymeq13-Cours : Etudier une cinétique enzymatique pour comprendre le mode d’action d’une enzyme (Unité

pour catalyser une nouvelle réaction, ce qui explique qu’elle soit active à faible concentration. 2. Comment nomme-t-on les réactifs d’une réaction enzymatique ? Les substrats. 3. Comment nomme-t-on les composés résultant de la réaction enzymatique ? Les produits. 4. Comment nomme-t-on l’action de l’enzyme ? La catalyse enzymatique. 5. Titrez et légendez la figure suivante. Puis, décrivez la structure n°4. Enfin, décrivez les différentes étapes de la réaction illustrée.

DETERMINATION DE LA VITESSE INITIALE D'UNE REACTION ENZYMATIQUE COURBE [P] = f (t) I. PAR METHODE CINETIQUE L'enzyme étudiée est la phosphatase alcaline qui catalyse l'hydrolyse des liaisons esters lorsque l'acide engagé est l'acide phosphorique mono estérifié. On utilise la cinétique d'hydrolyse du PNPP (ParaNitroPhényl Phosphate) à 20°C à pH=9,8. Le PNP (ParaNitroPhénol) est jaune en milieu alcalin. On peut donc suivre l'apparition du PNP au cours de l'hydrolyse en enregistrant l'absorbance

réaction enzymatique Réaction enzymatique Facteurs : enzyme Facteurs : autres facteurs indispensables Ligand Cofacteur Coenzyme Partie II : Chapitre 3 : 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 Cinétique Effet de la concentration d’enzyme Vitesse de réaction Phases de la réaction Phases de la réaction Vitesse initiale Concentration de l’enzyme Passage à la forme active Dosage enzymatique Chapitre 4 : 4.1 4.2 Effet de la concentration de substrat Concentration du substrat Cinétique michaélienne

21 22 23 La réaction enzymatique Réaction enzymatique Facteurs : enzyme Facteurs : autres facteurs indispensables Ligand Cofacteur Coenzyme 25 Partie II : Cinétique 27 Chapitre 3 : Effet de la concentration d’enzyme 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 28 29 30 31 32 33 34 35 Vitesse de réaction Phases de la réaction Phases de la réaction Vitesse initiale Concentration de l’enzyme Passage à la forme active Dosage enzymatique Chapitre 4 : 36 37

5-dinitrosalicylate--------------------3 III. Etude de la cinétique d’hydrolyse-------------------------------------------5 IV. Dosage des protéines par la méthode de Lowry--------------------------12 V. Influence de la concentration en enzyme----------------------------------17 VI. Influence de la concentration en substrat et détermination du type d’inhibition---------------------------------------------------------------------20 VII. Influence du pH sur la réaction enzymatique------------------------------24