Coefficient d'extinction

Étude de la β-galactosidase 1) Sommaire : 1) Sommaire : 1 2) Résumé : 2 3) Introduction : 3 4) Matériel et méthodes : 5 a. Détermination de coefficient d’extinction molaire de l’ONP, vitesse de réaction et paramètres cinétiques vis-à-vis de l’ONPG de l’enzyme soluble : 5 b. Etude de l’influence de la concentration en enzyme soluble et détermination de la vitesse de réaction et des paramètres cinétiques vis-à-vis de l’ONPG de l’enzyme immobilisée : 5 c. Détermination de

* Calculer la concentration c en mol-L' d'une solution de tartrazine dont ‘absorbance mesurée a la longueur d'onde 2 = 425 nm est A,,, = 0,05. En déduire la concen- tration 7 de tartrazine en gL. + Largeur de la cuve : | = 1,0 cm; + Coefficient d’extinction molaire 4 425 nm: Eig, = 2,3 x 10° Lmol cm; + Masse molaire de la tartrazine : M,..-.,ine = 534 mol" (3) Indicateurs colorés gff v MATH : Effectuer des calculs numériques Le bleu de bromothymol (BBT) est un indicateur coloré dont

: concentration dans le milieu réactionnel Ce : concentration dans l’essai Ve : volume d’essai. • Vitesse initiale ∆Do /min (fig2) V de [PNP] apparu par min • Calcul du coefficient d’extinction molaire : Grace à la gamme étalon (fig1-a) on va calculer le coefficient d’extinction molaire ε qui correspond à la pente de la courbe .D’après la loi de Beer-Lambert : A=ε. L .C D’où ∆A= ε.l.∆C donc ∆A/∆C

premiers exemples 4 effet des substituants alkyles. *cyclohexadiène-1,3 : conformation s-cis à cause de la cyclisation 4 *Cyclooctadiène-1,3 proche de la conformation s-trans 2 6 1 7 8 3 6 2 1 3 5 5 coefficient d’extinction molaire, généralement plus élevé pour un dérivé s-trans (15000-25000) que pour un dérivé s-cis (5000-12000). Mais, l’encombrement stérique modification de ces valeurs (8500 pour le s-trans-diméthyl-2,4 pentadiène-1,3). H H3C

A’’λy Donc d’après la loi de Beer-Lambert : Aλx = Ɛ’x. l. Cx + Ɛ’y. l. Cy Aλy = Ɛ”x. l. Cx + Ɛ’’y. l. Cy A= absorbance sans unité. Ɛ= correspondant au coefficient d’extinction molaire de l’élément considéré en L/cm.mg. L= longueur de la cuve en cm. C= concentration du composé en mg/L. Les coefficients Ɛ seront déterminés à partir des spectres des composés purs, A sera lui déterminé a partir des spectres du mélange. Dosage d’une solution par turbidimétrie

déduire la teneur d'une capsule de médicament. Conclure. 3. Mise au point d'un dosage par méthode UV : 3.1. Réaliser un spectre de la tyrosine. 3.2. Déterminer la longueur d'onde où un dosage UV est possible. 3.3. Déterminer le coefficient d'extinction molaire de la tyrosine à cette longueur d'onde. 3.4. Réaliser le dosage de la tyrosine dans la solution T et comparer au résultat obtenu par colorimétrie. Donnée: M tyrosine = 181 g/mol Feuille de résultats Nom: Prénom

déterminé pour pouvoir supporter le poids P12 de 12 m² de coffrages dans les conditions normales d'utilisation, effort Fe à prendre en compte à 60° par rapport à l'horizontale. Fe = P12 x 1,68 x 1,15 x 1,2 (6) (6) 1,68 = 1,50 x 1,06 x 1,06 (coefficient d'oscillation x force centrifuge x vent sur charge) 1,15 = 1 / sin 60° 1,20 = poids du béton sur coffrage Valeur de calcul du dispositif de préhension : Fe = 150 x 12 x 1,68 x 1,15 x 1,2 = 4180 daN soit 41,80 kN (4,26 t) Nota : 1 kg = 9,81

| 470 | 0,339 | | 575 | 0 | | 680 | 0 | 475 | 0,277 | | 580 | 0 | | | | 480 | 0,213 | | 585 | 0 | | | | Questions 1. Déterminer la valeur du coefficient d’extinction molaire de votre ion coloré, à λ max. Précisez ses unités. Indiquer également de quelle façon vous l’avez obtenu. Coefficient d’extinction molaire = 27699 L/mol× cm × = pente, or la pente nous a été donnée avec le graphique et elle équivaut à 27699. 27699 = × 1 cm =27699/1cm = 27699 L/mol×

Il s’agit de la courbe des absorbances à 420nm en fonction de la concentration molaire.Il est obtenu une équation de droite de type : y = aX car b = 0Avec l’équation de Beer-Lambert : Absorbance = ε x [ONP]Ainsi : ε = Avec : ε : coefficient d’atténuation [ONP] : Concentration en ONP en mol/LC’est donc : = 4610 soit environ 4670 sur excel II. Influence de la concentration en β-galactosidase (Etudiant 2) · Concentration en

absorbante ;  λ (en m) est la longueur du trajet optique ;  ελ (en mol-1.m2) est le coefficient d’extinction molaire de l’espèce absorbante en solution. Il rend compte de la capacité de cette espèce à absorber la lumière, à la longueur d’onde λ. Pour déterminer la concentration d'une solution cette relation implique la connaissance préalable du coefficient d'extinction molaire de l'espèce à doser Si ce coefficient est inconnu il sera nécessaire d'établir une gamme étalon. La gamme étalon consiste