Électrophorèse

fragment plus ou moins long du au polymorphisme de longueur des fragments de restriction. Les étapes qui suivent servent à visualiser les différents fragments d'ADN obtenus : Les fragments de restriction sont séparés selon leur taille par une éléctrophorèse en gel d'agarose. L'ADN étant chargé négativement, il migre de la cathode vers l'anode. Les fragments les plus petits sont les plus rapides. L'ADN est transféré sous forme dénaturée sur une membrane de nylon. La position relative des fragments

Génie Génétique et Biotechnologie Végétales Walid Hamada (Maître assistant à l’INAT) CONSTRUCTION DE BANQUE GENOMIQUE Mastère INAT 2009-2010 Module Génie Génétique et Biotechnologie Végétales Walid Hamada (Maître assistant à l’INAT) ELECTROPHORESE EN CHAMP PULSE Mastère INAT 2009-2010 Module Génie Génétique et Biotechnologie Végétales Walid Hamada (Maître assistant à l’INAT) ISOLEMENT D’ADN A HAUT POIDS MOLECULAIRE Mastère INAT 2009-2010 Module Génie Génétique et Biotechnologie

déshydrogénase (LDH) Haptoglobine Frottis sanguin au doigt Recherche d'agglutinines irrégulières par test de Coombs direct ± Coombs sensibilisé Hémocultures Sérologies parasitaires Frottis sanguin et goutte épaisse à la recherche de paludisme Électrophorèse de l'hémoglobine Ponction médullaire ± biopsie médullaire avec coloration de Perls Test de résistance des hématies à l'hémolyse au saccharose, ou en milieu acide Dosage de la G6PD et de la pyruvate kinase Étude de la durée de vie des hématies

ou laboratoire sur puce voit le jour [3]. Patrick Merel nous explique que les chercheurs de laboratoires suisses ont voulu développer des dispositifs miniatures dans lesquels toutes les pièces et les techniques nécessaires à une analyse par électrophorèse seraient réunies. La photolithographie, nouvelle technique, et l’électrophorèse capillaire, une fois réunies, ont permis de voir naître les premiers prototypes de ces laboratoires sur puces. La même année, Jérôme Hinfray, journaliste à Biofutur

brièvement à 13 000 r.p.m. • Ajouter 2µl de tampon de migration dans chaque tube. • Centrifuger brièvement et mettre la totalité du volume de chaque tube dans un puits de gel d’agarose à 1%, dans le même ordre que le tableau précédent. 2. ÉLECTROPHORÈSE DE GEL D’AGAROSE • Faire migrer à 120 volts pendant 1 heure environ. • Suivre la migration et l’arrêter lors que le bleu de bromophénol atteint 1cm du bord inférieur du gel. • Observer le gel sous U.V. et prendre une photo. Séances No.

MA-F-AS313-15-PH Acide organique : chromatographie ionique (oeno 23/2004) . MA-F-AS313-16-ORGION Acide shikimique (oeno 33/2004) .......................................... MA-F-AS313-17-ACSHIK Acide sorbique (électrophorèse cap.) (oeno 4/2006) ............ MA-F-AS313-18-SORCAP Acides organiques (électrophorèse cap.) (oeno 5/2006) ...... MA-F-AS313-19-ACORG2 Acide sorbique, benzoïque, salicylique (oeno 6/2006) .......... MA-F-AS313-20-SOBESA Acide métatartrique (oeno 10/2007) ..............................

sanguine avec réticulocytose et étude attentive du frottis, +++ à la recherche : • d’une hyperleucocytose par polynucléose neutrophiles ; • d’une éosinophilie, d’une hyperlymphocytose, d’un syndrome mononucléosique. – Bilan inflammatoire : VS, électrophorèse des protides. – Radiographie pulmonaire. – Bilan hépatique : TGO, TGP, phosphatases alcalines, gamma GT. – MNI test, Dye test, Wright. – IDR à la Tuberculine. ÉTIOLOGIES Trois types de situations peuvent être observées : ADÉNOPATHIES CERVICALES

réaction. Isoenzymes : enzymes catalysant la même réaction sur le même substrat, mais ayant des structures protéiques différentes. Exemple : la LDH tétramérique possède 2 types de protomères (H et M). Il en résulte 5 isoenzymes séparables par électrophorèse (H4, H3M, H2M2, H3 et M4) La répartition des isoenzymes varie en fonction des organes (H domine dans le cœur, M dans le muscle). La plupart des enzymes = protéines Exception : certains acides ribonucléiques, les ribozymes holoprotéines (uniquement

et le même contenu génétique. Chromosomes sexuels (= gonosmes = hétérosomes = hétérochromosomes) Chromosomes X et Y déterminant le sexe d'un individu Condensation Le matériel de l'ADN se condense. Les chromosomes deviennent visibles Electrophorèse Technique permettant de séparer des molécules chatgées (fragments d’ADN, protéïnes) selon leur poids et leur taille, en les soumettant à un champ électrique. A.D.N ; protéïnes Gène Portion d’ADN comportant une information situé sur un locus

additions substitutions éliminations études de fonctions organiques Chimie analytique Dosages potentiométriques Dosages spectrophotométriques Techniques de séparation Chromatographie en phase gazeuse. Chromatographie en phase liquide. Électrophorèse. Au cours de ces différentes séances de nombreux montages didactiques d’Enseignement Assisté par Ordinateur (E.A.O.) permettent une meilleure valorisation de l’expérience pratique individuelle. Informatique Savoir utiliser les outils de base