Gelose

prélèvements existent à savoir : par écouvillonnage, par empreinte sur gélose (Petrifilm, Boîtes Rodac) et par d'autres techniques (impédance-métrie et ATP-métrie,...). Ø La méthode par écouvillonnage consiste à frotter une surface déterminée avec un écouvillon humide qui est placé au départ dans un tube. Elle est surtout appliquée pour les surfaces non accessibles aux techniques d'empreinte sur gélose. Ø La méthode par empreinte sur gélose est la plus utilisée et la moins coûteuse pour les entreprises

cidessous. Ballon Carlsberg (15L) Prélèvement d'un échantillon S = suspension de Saccharomyces (maintenue dans la glace) 30 numérations automatiques (sur compteur COULTER 30 numérations sur cellule de Malassez 1 dénombrement sur milieu gélosé 1 test de viabilité (méthode de FUNK) 2.1.1. Numération automatique des levures (12 points) Une fraction de l'échantillon S est diluée à l'aide d'un diluteur automatique : 40 µL sont complétés à 20 mL à l'aide d'une solution isotonique (Isoton)

remis en suspension le culot bactérien en le pipetant. La suspension a été finalement étalée sur la deuxième boite de LB-Agar-ampicilline. Les deux boites ont été incubées une nuit à 37°C pour permettre aux bactéries de former des colonies sur la gélose. Analyse des clones de bactérie recombinante Nous avons fait l’analyse des clones de bactéries recombinantes ensemencées lors de l'étape précédente. Cette analyse s’est effectuée sur deux étapes. Extraction plasmidique par mini-prep

passe à la méthode dite «dynamique». Les milieux de culture restent les mêmes que pour la technique statique mais les boites de Pétri remplies de milieux de culture gélosés sont placées, ouvertes, dans une sorte d’aspirateur. Pendant le temps d’aspiration, les microorganismes, transportés dans l’air aspiré, viennent s’impacter sur la gélose. L’opération d’aspiration, qui dure quelques secondes, est renouvelée pour chaque type de microorganismes, avec le milieu de culture adéquat. Les boites sont ensuite

(action bactériostatique) et/ ou les détruisant (action bactéricide). 7-2 Principe : L’antibiogramme consiste à mettre une souche bactérienne (infectant un malade) en contact avec différents antibiotiques dans une boite de Pétri sur une couche de gélose. En fonction de la taille du disque d’inhibition se formant autour des antibiotiques, il est possible de déterminer la sensibilité de la souche bactérienne pour chacun de ces antibiotiques. Intérêt : Connaitre la sensibilité d’une souche bactérienne

antibiotique antibactérien = amoxiciline quatre boîtes de pétri et gélose diluée à 10% une huile essentielle de lavande commerciale L'huile essentielle synthétisée dans l’expérience précédente pipettes graduées un yaourt nature ( contenant des bactéries lactiques Béchers Protocole expérimental: Stériliser le matériel utilisé avant toutes opérations. Introduire la gélose diluée à 10% dans les boîtes de pétri(et la laisser durcir). Étaler sur

Toujours en milieu stérile, déposer 4 gouttes de la suspension précédente dans chaque boîte de Pétri à ensemencer. Bien répartir la suspension à la surface de la gélose avec l’ensemenceur stérile. 4. Placer les boîtes à l'étuve à 22 °C. Au bout de 3/4 jours les colonies se sont développées uniformément sur toute la surface de la gélose. * Préparation des suspensions de levures des deux souches mutantes (sac- ou rho- : une boîte de Pétri ensemencée par chaque souche pour 2 ou 3 binômes). 1. - Préparer

veillon sont longs et fins. Cela permet de limiter le contact bactérie/air. Il faut au départ régénérer le milieu qu'il contient. Pour cela, on fait bouillir le tube pendant 10 à 15 minutes pour que la gélose fonde et que les gaz s'échappent. Ensuite, les tubes sont placés dans la glace afin que la gélose durcisse à nouveau rapidement. On fait cela pour éviter que le milieu ne se charge à nouveau en air. Une fois ces préparatifs terminés, on utilise un manche pasteur (fil droit métallique). On le chauffe

glace pendant 2min Ajouter 200µl de milieu SOC enrichis dans les eppendorf Mettre à incuber à 37°C pendant 45 min Puis prélever la totalité du milieu contenu dans l’eppendorf et le mettre dans sur une gélose LB +Amp (300µl) A l’aide d’un râteau, étendre tout le milieu sur la gélose pour qu’il puisse pénétrer Incuber pendant 12h à 37°C Plasmide Accessoire Tube eppendorf de 1.5ml H2O-HEPES Complété à 1ml Plasmide Enveloppe 7.5µg 5 µg 20 µg HBS2X CaCl2 0

cm * 2,5 cm) 12trous de 48 puits séparés, on peut y insérer toutes sortes de fluides corporels (sang,salive). Chaque puits a millier micro billes permettant identification de composant du liquide. _dépôt des protéine grâce a 1 robot puits film de gélose (70 a 90% d'eau) augmente durer de demi vie des protéines puis même système de sonde que puce a ADN et marquage fluo _résultat info comme puce a ADN. Différence p a ADN détermine l'expression du gène et p a protéine l'expression de la protéine cet