Hybridation in situ

L’évolution se définit comme l’évolution des caractéristiques d’une population Rappels des années antérieures : ARNm : Molécule permettant le transfert de l’information portée par le gène (situé dans le noyau) aux systèmes de fabrication des protéines (situés dans le cytoplasme). Expression d’un gène : On dit qu’un gène s’exprime quand on observe dans la cellule la fabrication de la protéine qu’il code. Toutes les cellules du corps à l’exception des gamètes possèdent les mêmes gènes, mais elles ne possèdent

mécanismes. Elle s’appuie sur des techniques morphologiques (c'est à dire l'analyse de la forme des objets) : -Examen macroscopique (à l’œil nu) -Microscopique photonique (dit aussi « optique ») et électronique -Immunohistochimie -Hybridation in situ -Parfois quantifiées (morphométrie) -et sur d’autres méthodes utilisées parallèlement (PCR sur coupes ou cellules isolées, microbiologie...). Elle nécessite une collaboration étroite entre l’anatomo-pathologiste, le biologiste, l’imageur

cellules, et il pourrait également être important de distinguer le cellulaire localisation des produits des gènes. En technologies in situ tels que l'immunohistochimie (IHC), de l'ARN par hybridation in situ (ARN-ISH), ou de la fluorescence in situ (FISH) sont donc optimal pour l'étude de l'épidémiologie moléculaire. Cependant, à grande échelle dans les tissus in situ Les analyses ne sont pas pratiques et lent lorsque les méthodes traditionnelles d'moléculaire pathologie sont utilisés. En outre

des chr sans que la cellule parentale ne se divise EX : luzerne, café, cacahuètes -Croisement 2N x 4N EX : PdT Solanum Bananes commerciales 9 Mitose sous colchicine place du fuseau mitotique blocage de la mise en cellule 4N b. Alloploïdie : hybridation de deux espèces proches Alloploïdes Allotétraploïde 10 Exemple d’amphidiploïdie chez les plantes : le coton cultivé américain Gossypium hirsutum Coton du vieux monde 13 paires de grands chromosomes x Coton sauvage américain 13 paires de petits

cytogénétiques classique soit par des préparation purifiées d’ADN ou d’ARN. A partir des chromosomes : hybridation in situ (FISH) permet de visualiser les chromosomes par des marquages les fluoro-chromosomes. Les anomalies de nombre et de structure de chromosomes sont détectables telle que les translocations (chr Philadelphie entre 9 et 22 responsable d’une leucémie myéloïde chronique). Hybridation génomique comparative (CGH) : révèle perte ou gaine de matériel génétique par compétition de fluorescence

trapue. Les sillons et le positionnement des bases sont différents. L’hélice est dissymétrique, les paires de bases ne sont plus au centre. ADN de forme Z ou ADN en zigzag. L’hélice est gauche de 18 Angström. ~~> Voir tableau. On trouve la forme A in vivo mais la forme Z ne se trouve certainement qu’in vitro. L’ARN double-brin a une conformation A. Les liaisons hydrogènes. Elles contribuent à la stabilité de la double-hélice. Les forces d’empilement sont hydrophobes entre les bases, elles peuvent

chromosomes. S’en suivent des étapes de choc hypotonique et de fixation. Les préparations chromosomiques sont obtenues sur des lames. Il y a à la fois des chromosomes et des noyaux interphasiques. On va pouvoir réaliser un caryotype et des hybridations in situ en fluorescence FISH. a – Caryotype On colore les chromosomes par des techniques particulières de marquage qui permettent de visualiser bandes sombres ou claires sur les chromosomes. Pour le liquide amniotique et les villosités choriales

électronique à transmission 1- Les ultrastructures fondamentales Le noyau 1- Les ultrastructures fondamentales Le noyau 1- Observation 2-2-2- Principe hybridation in situ Localisation d’ADN ou ARN Microscope optique Fluorescence 1- Observation Microscope optique Fluorescence 2-2-2- Principe hybridation in situ Localisation d’ADN ou ARN Séquence nucléotidique recherchée Sonde synthétisée complémentaire de la séquence nucléotidique recherchée Acide nucléique

profils d’expression des micro‐ARN caractérisés seront ensuite comparés en fonction du régime maternel, du sexe et du noyau hypothalamique. La localisation cellulaire des micro‐ARN dont les niveaux d’expression varieront le plus sera réalisée par hybridation in situ fluorescente (FISH) sur coupe d’hypothalamus. Résultats attendus. Ces travaux permettront : 1/ de définir des atlas de profils d’expression cellulaires des micro‐ARN dans les noyaux de l’hypothalamus contrôlant la prise alimentaire et la

positions relatives des locus (gènes ou séquences d’ADN) sur un chromosome. Les cartes de liaison sont obtenues à partir de la fréquence de recombinaison entre les locus. Les cartes physiques sont généralement obtenues par l’utilisation de l’hybridation in situ des fragments d’ADN clonés avec des chromosomes en métaphase, ou l’utilisation d’hybrides somatiques ou hybrides d’irradiation. Histoire de la cartographie génétique[modifier | modifier le code] La première carte génétique est réalisée en 1913