Incube

initiées trois jours avant l’expérience. Il faut rincer les éphippie afin d’éliminer toute trace du milieu de stockage, on les transfert ensuite dans une boîte de pétrie à laquelle on ajoute 15mL de freshwater. La boîte de pétrie a été recouverte et incuber environ 3 jours à 20°C sous une illumination minimale de 6000 lux. . Le maximum d’éclosion aura lieu entre 72 et 96h. On nourrit Les éphippies avec des algues sèches environ 2heures avant notre expérience. On verse dans un tube de poudre de Spiruline

Coating » de l’antigène On incube dans les puits la solution d’antigène spécifique de l’anticorps recherché. L’antigène va se fixer électrostatiquement au fond des puits de plaques de microtitration immunologique. Les puits sont ensuite lavés pour éliminer l’antigène en excès. On incube dans les puits la solution d’anticorps à doser. Ils se fixent spécifiquement sur l’antigène. Les puits sont ensuite lavés pour en enlever les anticorps de détection en excès non fixés On incube dans les puits l’anticorps

Méthodes d’ensemencement : a. La méthode des cadrans : [pic] b. La méthode des oeses calibrés (pour les urines) - Ensemencer dix (10) millilitres d’urines à l’oese calibrée sur un rayon de la boîte sans recharger l’oese ; - Incuber à trente sept degré Celsius (37°C) pendant seize à vingt quatre heures ; - Comparer la densité des colonies à celle figurant à la dernière page. 2) Les milieux de culture : a. Milieux de culture sélectif ou peu sélectif : -

tampon d’extraction préchauffé à 74°C à l’aide d’un mortier et pilon • Lorsque le broyage est complet ajouter encore 300 µl de tampon d’extraction et transférer le broyat dans un tube eppendorf de 1.5ml • Bien mélanger au vortex • Incuber à 74°C pendant 30 min au bain marie • Refroidir a température ambiante • Ajouter 500 µl de chloroforme/isoamylalcool (24:1) • Mélanger lentement par inversions pendant 3 min • Centrifuger à vitesse maximale (4000rpm ou 12000g)

Ensemencer d'abord la pente par stries serrées, puis le culot par piqûre centrale. La pente doit être largement ensemencée, contrairement au culot. Ne pas visser complètement le bouchon du tube, de façon à permettre l'aération du milieu (aérobiose). Incuber 24h à 30 ou 37°C. Principe : La bactérie, si elle le peut, attaque le glucose. Celui-ci étant de consommation faible (1 g/L) produira une acidification uniquement en zone d'anaérobie donc, dans le culot. Une fois le glucose dégradé, la bactérie

lorsque l’accouplement est terminer les partenaires construisent un nid directement fait à partir de vase de boue de cailloux, d’argile ou de sable, situer généralement sur des îlot pour se protégés des prédateurs où les deux partenaires pourrons y incubé l’œuf (le couver et le réchauffer entre la ponte et l’éclosion de l’oiseau) pendant 29 jours l’un à leurs tour, il n’y en a qu’un seul car c’est très rare qu’il y en est deux. Nid de Flamants rose. Parade nuptiale. LA REPRODUCTION CHEZ LES OISEAUX :

Les partenariats entre acteurs Rappel : l'ensemble des questions suivantes s'appliquent au seul domaine de l'innovation ... Question 16 - Avec quels organismes collaborez-vous régulièrement : Alès Myriapolis CREAUDE / Castelnaudary Alter Incub Derbi ARACT Eurobiomed BIC Montpellier Agglomération Incubateur Sup Agro CEEI Rivesaltes INNOVOSUD Chambre d'Agriculture de la Lozère Innov'up Chambre d'Agriculture de l'Aude INPI Chambre d'Agriculture de l'Hérault

III- Interprétations des résultats Culture On réalise 30 mL de préculture bactérienne à partir d’une colonie isolée transformée par le vecteur pGEX-2T-IDH dans un bouillon de culture BL contenant de l’ampicilline à 50µG.mL-1. La préculture incube pendant une nuit à 37°C sous agitation. Au matin la Densité optique de la préculture est mesurée après dilution au dixième. Il est ajouté dans un litre de bouillon BL un volume de préculture tel que la densité optique de la culture ainsi obtenue soit

|Interprétation : | |Flacons d’hémocultures à garder ≈ 1 mois incubés à 37°C. |Agglutination à 1/80 = +. | |(Autres produits pathogènes :

avec du PBS stérile. Une solution d’hypochloride de sodium (NaOCl) de 5,5 % est ajouté au culot, le mélange est homogénéisé puis incubé à 4 °C pendant 60 min. Les traces de NaOCl sont éliminées par plusieurs lavages et les oocystes sont ensuite broyés à l’aide d’un broyeur de Potter dans une solution de PBS stérile. Les sporocystes libérés sont incubés à 41°C pendant 15 min dans une solution d’excystation contenant 0,25 % de trypsine et 0,1 % d’acide glycodéoxycholinique pour la libération