Lambert Wilson

dispose d'un sel de phosphate stoechiométrique et sec que l'on va dissoudre dans l'eau acide. La première opération consiste à cerner le domaine d'applicabilité de la méthode, c'est à dire la gamme de concentration où on pourra appliquer la loi de Beer-Lambert, généralement pour une absorbance inférieure à 1. Pour cela, préparer des solutions colorées correspondant à 50 ppm, 5 ppm, 0,5 ppm et 0,05 ppm. En déduire un ensemble de 5 concentrations régulièrement espacées qui permettront d'établir une relation

concentration de ce produit est le fruit d’une activité enzymatique plus ou moins intense de la trypsine, c'est-à-dire de la production de la p-nitroaniline. La concentration en p-nitroaniline peut alors être déduite de l’absorbance par la loi de Beer Lambert où A est l’absorbance sans unité, ε est le coefficient d'extinction molaire spécifique d’une substance en L.mol-1.cm-1, l est la longueur de la cuve en cm et c, la concentration de la substance dosée en mol.L-1 : A=ε×l×c III) Mode opératoire

photoélectroniques (ou d’ionisation) b) Les spectroscopies électroniques : ultraviolet et visible c) Les spectroscopies vibrationnelles d) Les spectroscopies rotationnelles e) Les spectroscopies magnétiques ou de spin f) Spectrométrie de masse 4) LOI DE BEER-LAMBERT a) Démonstration et énoncé b) Additivité des absorbances c) Limites 5) SPECTROPHOTOMETRE a) Eléments constitutifs b) Un exemple : spectrophotomètre ultraviolet-visible c) Sources d) Transparence des supports 6) ALLURE DU SPECTRE page 8 page

sa mise en marche. - zéro de DO en mode absorbance avec le tube témoin en place dans le porte-cuve, appuyer sur le bouton «0 ABS » . La valeur affichée doit alors se stabiliser sur la valeur DO = O. Loi de Beer Lambert Les dosages colorimétriques s'appuient sur la loi de Beer Lambert qui indique que la densité optique (DO) ou absorbance d'un produit en solution est proportionnelle à sa concentration DO = ε . c . l ε : coefficient d'extinction molaire du produit coloré unité: M-1. cm-1 c : concentration

ou de la conductance G de la solution. • spectrophotométrie • méthode utilisée pour une solution colorée. • grandeur mesurée : l’absorbance de la solution notée ………………. • unité de la grandeur utilisé : ………………………………. Loi de Beer-Lambert : ………………………………………………………….. ATTENTION aux unités : Une transformation est-elle totale ?  PH Le pH est défini par : pH = ………………………………………. et ……………………. = …………………..  TAUX D’AVANCEMENT Lorsque la composition du mélange réactionnel n’évolue

A 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0 0,0002 A = f(c) A = 1821C 0,0004 0,0006 0,0008 0,001 c (m o lL ) / b) Trouver son équation. Préciser les unités. Coefficient directeur de la droite k = 1821 L/mol c) La loi de Beer-Lambert est-elle vérifiée? La courbe obtenue est une droite passant par l’origine A est proportionnel à c ; la loi est vérifiée. 3. Pour étudier la réaction, on opère de la façon suivante : • • • On prépare, dans un bécher, un volume V1 = 5,0 mL d'une solution

solution siège d’une réaction chimique mettant en jeu un réactif ou un produit coloré.  Pratiquer une démarche expérimentale pour déterminer la concentration d’une espèce colorée à partir d’une courbe d’étalonnage en utilisant la loi de Beer-Lambert.* (*) Savoir-faire expérimentaux. Rappels (p. 12) Masse m m = n x M V = n = Quantité de matière n m M m = V x ρ V = n x M ρ n = V x ρ M m(A) Masse (g) m(A) = n(A) x M(A) n(A) = n(A) Quantité de matière

Permet de doser une espèce chimique ionique en solution Utilisation d’une gamme d’étalonnage, constituées de solutions étalons de concentrations connues L’absorbance A est mesurée avec un spectrophotomètre L’absorbance est soumise à la loi de Beer-Lambert : A=kxc La conductivité est mesurée avec un conductimètre La conductivité est soumise à la loi de Kohlrausch : σ=λxc 1) Choisir la méthode à utiliser : spectrophotométrie ou conductivité 2) Réaliser les solutions étalons par dilution d’une solution

4) C réelle =C diluée x 2 la solution initiale est 2 fois plus concentrée Comme la concentration est directement proportionnel à l'absorbance selon la formule de Beer Lambert il suffit de multiplier la concentration de la solution diluée par 2 pour obtenir notre concentration réelle C réelle figure 6 : Loi de Beer Lambert A=ϵ l C l : la longueur spectrophotométrie C : la concentration de la cuve à C réelle =0,046 Calcul du volume plasmatique V Q C - avec Q la quantité

massique en caféine est 17 mg.L−1. c) La concentration molaire de caféine est égale à 8,8.10-5 mol.L-1. 4. Loi de Beer-Lambert : avec Aλ : absorbance de la solution (sans unité) ; ℓ : épaisseur de solution traversée (en cm) ; c : concentration molaire de la solution (en mol.L-1) ; ελ : coefficient d'absorption molaire (en L.mol-1.cm-1) 5. D'après la loi de Beer-Lambert, . Le coefficient d'absorption molaire de la caféine pour λ = 271 nm est de 6,0.103 L.mol-1.cm-1. Exercice 2 : Analyse