Microtube

sodium) l'ADN dénaturé se renature et s'agrège, sous forme d’un précipité, insoluble (pelote), qui peut être extrait du surnageant. [10] 3. Protocole d’extraction de l’ADN plasmidique 3.1 Récolter les bactéries transformées Prélever, dans un microtube, 1,5 ml de la culture bactérienne et centrifuger pendant 1 minute. Un dépôt bactérien se forme au fond du tube. Vider délicatement, avec une micropipette 200μL, le surnageant pour ne conserver que le dépôt. Recharger le tube avec 1,5 ml de la

fin d’élongation.protocole experimentalDans un microtube PCR, vous réaliserez le mélange suivant dans l’ordre indiqué : ADN génomique matrice 1,5 µl Tampon d’action (x 5) 10 lMgCl2 25 mM 2 µlMélange dNTP (10 µM chacun) 1 µlAmorce sens (10 µM) 2,5 µlAmorce antisens (10 µM) 2,5 µlEau ultrapure DNAse free 30 µlADN polymerase (GoTaq) 0.5 µl· Mélanger et rassembler le liquide en centrifugeant quelques secondes le microtube· Mettre le tube dans le thermocycleur. Le thermocycleur

nous allons rechercher un anticorps contre la BSA, c'est-à-dire, la sérum albumine bovine. I-Matériels et méthodes 1) Liste du matériel Avant toute manipulation, nous avons besoin sur notre paillasse : de pipettes et multipipettes, des microtubes et des portoirs, Trois barettes de microtitration, un appareil à vortex. Attention, ce TP nécessite l'utilisation de substances présentant des risques, c'est pourquoi il est utile de manipuler avec des gants et des lunettes certains produits

Explication de la méthode de Sanger    La  méthode  de  Sanger  est  un  procédé  utilisé  pour  le  séquençage  de  l’ADN,  c’est­à­dire  déterminer  l’ordre  d’enchaînement  des  nucléotides  (A­T­C­G)  dans   un  fragment  d’ADN particulier.   Pour  ce   faire,  quatre  microtubes  sont  nécessaires.  Chacun  contient  un  fragment  de  l’ADN  a  séquencer,  une  amorce, un ADN polymérase (enzyme)  et des désoxyribonucléotides  (dATP,  dCTP,  dTTP  et  dGTP).  De  plus,  les  tubes  contiennent  aussi  des  didésoxyribonucléotides

mitochondries Schéma : -servent à la fabrication d’energie = ATP dans la cellule -produise l’ATP au cours de la respiration cellulaire -il posède aussi de l’ADN et des ribosomes 5. Le cytosquelette Forme & mouvement de la cellule Microtubes microfilament 6. Les péroxysomes

Sécurité Microbiologique) - Incubateur (étuve) - Spectrophotomètre de plaque réglé à 570 nm Consommables - Microplaque 96 puits (avec les cellules à tester) - Pipettes multicanaux / micropipettes (p20/p200/p1000/p5000) - Cônes - Tubes / Microtubes / Falcons - Poubelle - DASRI - Gants - Blouse Réactifs 0,3M 0,4M 0,45M 0,5M 0,55M 0,6M 0,65M 0,7M 0,8M 1M Témoin négatif 5M Témoin positif 0M - + Concentrations d’éthanol en mol/L de plus en plus importante -

nous avons Rf1 = 3,9/5,1=0,76 Pour la tâche 2, nous avons Rf2=2,8/5,1 = 0,55 Pour la tâche 3, nous avons Rf3 = 2/5,1 = 0,39 Pour la tâche 4, nous avons Rf4= 1,1/5,1=0,22 Nous avons ensuite gratté les taches, nous avons mis les résidus dans des microtubes, nous y avons ajouté de l’acétone et secoué afin d’homogénéiser la solution. A l’œil nu, nous pouvons déjà observer des tubes de différentes couleurs, gris, jaune, vert clair et vert foncé ; couleurs présentes sur la chromatographie. Nous avons

reposer les cellules dans la glace pendant 30 minutes avant de les employer. INSERTION DU PLASMIDE RECOMBINANT DANS UNE BACTERIE COMPETENTE Protocole n° 2 A cette étape, il faudra manipuler dans des conditions stériles. 1. Dans 2 microtubes stériles et froids, mélanger 20 µL du contenu des tubes A et B (A dans un tube, B dans l’autre) avec 200 µL de suspension de bactéries compétentes. Penser à identifier les tubes, par exemple A’ et B’. 2. Incuber au moins 20 min dans la

des 4 bases et son complément. La séquence de restriction du MstII est un exemple de palindrome imparfait puisqu'il comporte un nombre impair de paires de bases. Utilisation en génétique Les digestions enzymatiques se font généralement dans un microtube mis au bain-marie à température convenablement réglée (généralement 37 °C) sur un portoir flottant.

paire est dite hétérosome > détermine le sexe, XX chez la femme, XY chez l’homme) Division cellulaire Interphase : période où la C se développe et où à lieu la réplication de l’ADN Phase 1 de la mitose > Prophase : phase la plus longue, les microtubes forment le fuseau mitotique, chaque chromosomes est formés de 2 chromatides reliées au centomètre, les 2paires de centrioles s’écartent et se dirigent vers les pôles opposées de la C Phase 2 > Métaphase: organisation des chromosomes sur le plan