Plasmide

humaine est obtenue par transgénèse bactérienne. Cette manipulation consiste à prélever le gène codant de l’insuline sur le chromosome d’un Homme (espèce donneuse) puis à l’insérer dans un plasmide (molécule d’ADN circulaire d’une bactérie distincte de l’ADN chromosomique, capable de réplication autonome). Ce plasmide « recombiné » est réintroduit dans la bactérie Escherichia coli (espèce receveuse). La bactérie Escherichia coli ainsi génétiquement modifiée peut, lorsqu’elle est mise dans des conditions

de transport actif utilisant l’énergie du gradient électrochimique Mécanisme de transport actif : la translocation de groupe Mécanisme de transport actif : le transport du Fer V. 1) 2) 3) 4) 5) 6) Génome bactérien Le nucléoïde Les plasmides La réplication Expression d’un opéron (unité transcriptionnelle) bactérien La transcription La traduction VI. Les structures externes de la bactérie 1) Définition 2) Le flagelle VII. Les spores bactériennes 1) Définition et structure

Les vecteurs les plus connus sont les plasmides, petites boucles d'ADN d'origine bactérienne. • La transformation de l'organisme cible, avec une pénétration de l'ADN dans la cellule, et l'intégration de l'information génétique. L'introduction du transgène, ou du vecteur dans le génome de la cellule, peut se faire par perméabilisation des membranes (bactéries, levures), par un procédé mécanique (projection de microbilles de tungstène ou d'or portant le plasmide), ou encore par un vecteur biologique

restriction Chapitre 11 : Expression 11.1 11.2 11.3 11.4 11.5 11.6 11.7 11.8 11.9 11.10 11.11 11.12 11.13 Vecteur (définition) Cellules-hôtes Cycle du phage λ Phage λ Clonage (I) Clonage (II) EMBL Polylinker Clonage directionnel Carte du plasmide pBR322 Carte des plasmides pUC18/19 Cycle de M13 Carte du M13 6/183 Biologie génique - Pr A. Raisonnier 2006 - 2007 Plan du cours 161 163 164 165 167 168 169 170 171 172 173 175 176 177 179 181 182 183 Partie IV : Le génie génétique Chapitre

cytoplasmique ou nucléaire •  Exemples d organises vivants connus +++ Les bactéries •  Organismes unicellulaires •  Dimension 1 à 10 microns •  4 éléments : –  La paroi –  La membrane –  Le cytoplasme –  Un chromosome et/ou plasmide Structure d une bactérie PAROI PLASMIDE MEMBRANE cytoplasmique CHROMOSOME CYTOPLASME Structure d une bactérie éléments obligatoires •  La paroi : –  entoure la bactérie –  détermine sa forme –  fine ou épaisse –  rôle protecteur –  passage obligé des échanges avec

bactérienne Introduction La conjugaison est un transfert génétique à sens unique nécessitant un contact grâce aux pilis sexuels entre une bactérie donneuse F+ (qui possède le facteur F) et une bactérie receveuse F-. Elle permet la transmission de plasmides de conjugaison, en l’occurrence le facteur de fertilité F, et son intégration dans le génome de la bactérie réceptrice. Lors d'une conjugaison entre une bactérie mutante Hfr et une bactérie F-, le transfert va commencer au niveau de l’oriT. Un

ou à un stade de son développement. * Dans certains cas, l'insertion du transgène dans un vecteur. Ce vecteur peut comporter des séquences de régulation, réplication ou encore des marqueurs de sélection. Les vecteurs les plus connus sont les plasmides, petites boucles d'ADN d'origine bactérienne. Les séquences de régulation comportent obligatoirement un promoteur adapté à l'organisme receveur. Les marqueurs de sélection sont généralement des gènes de résistances à des antibiotiques ou des herbicides

représenté par un double brin d’ADN circulaire. Le génome est parfois complété par des anneaux d’ADN supplémentaires plus petits : ce sont les plasmides. Ils offrent au monde bactérien des possibilités extraordinaires d’adaptation car ils sont souvent transmissibles d’une cellule à l’autre. Les bactéries échangent entre elles des portions de séquences d’ADN ou de plasmides qui peuvent s’intégrer complètement dans le génome de la bactérie receveuse. C\ Les cils et les flagelles. Ils sont

la plupart du temps le transfert de gènes s’effectue entre espèces différentes. Un organisme peut être modifié génétiquement soit de façon naturelle ou par intervention humaine. Principales dates : Dates Evénements 1973 Identification du plasmide Ti, il a la possibilité d’accueillir un gène porteur d’un caractère recherché. Ce caractère peut être introduit dans le génome d’une plante. 1977 Découverte du transfert de gène par des bactéries. 1983 1er plan de tabac génétiquement modifié (au

Association Française Contre les Myopathies La thérapie génique Pour que toutes ces étapes soient possibles, le gène médicament sera introduit dans un vecteur. Celui-ci peut-être soit viral, soit non viral (plasmides, vecteurs lipidiques …). III.1.Les vecteurs non viraux III.1.1. Les plasmides Ils sont d’origine bactérienne, mais ne sont pas immunogènes contrairement aux vecteurs viraux. Des études sont toujours en cours pour améliorer l’efficacité de leur transfert. Des techniques complémentaires