Plasmide

transgenèse : Le vecteur ADN le plus perfectionné est un plasmide d'Agrobacterium tumefaciens, une bactérie. Un plasmide est un petit ADN circulaire qui se multiplie de manière autonome dans la bactérie. Il peut abriter un fragment d'ADN étranger ; et permet ainsi d'isoler les gènes d'un être vivant. Dans la nature, l'Agrobacterium tumefaciens infecte les végétaux et cause des tumeurs (« galle du collet »). Le plasmide, nommé plasmide Ti (Tumor-Inducing) provoque l'apparition de ces tumeurs. Il

autonome dans une bactérie : PLASMIDES. d. Techniques d’insertion stable d’un gène étranger dans l’ADN d’un organisme : TRANSGENESE. Vrai ou faux ? a. Tous les organismes possèdent dans leurs cellules des enzymes de restriction : FAUX, elles existent chez les bactéries mais pas chez les animaux ni les végétaux. b. Les plasmides présents dans toutes les bactéries d’un clone ont la même molécule d’ADN : VRAI. c. On peut récupérer une séquence clonée dans un plasmide en découpant celui-ci avec l’enzyme

ET DE QUANTIFICATION DES ACIDES NUCLEIQUES, 08 I. Extraction, précipitation de L’ADN des eucaryotes et des procaryotes II. Contrôle de la pureté de l'ADN extrait III: Quantification de l'ADN 10 CHAPITRE II : 08 10 LES VECTEURS : PLASMIDES, PHAGES, COSMIDES, YAC, BAC, VIRUS 13 I- Les vecteurs en génie génétique : l'ADN plasmidique II- L'ADN phagique III. Cosmides, YAC et BAC 13 17 20 Chapitre III: ENZYME DE RESTRICTION, ÉLECTROPHORÈSE, CARTE DE RESTRICTION 24

concentré en ions Ca la structure des membranes cellulaire va être altéré et il y aura la création de plusieurs micro perforations par lesquels l’ADN pourra pénétrer les cellules vont être capables d’ingérer des petites molécules d’ADN, comme un plasmide. Toutes les opérations ont été effectuées à 4°C afin de ne pas endommager les bactéries. . 2) Transformation des cellules compétentes Dans cette étape nous avons mélangé les cellules d’E.coli rendues artificiellement compétente avec de l’ADN

1 copie 1 allèle de chaque gène 1 origine de réplication par Chromosomes Plasmides (ADN db circulaire et autonome) Transmission verticale à la descendance Ex: E.coli contient ≈ 5000 kb, soit 1 400 μm dans une cellule de 2-6 μm! S’il y a une règle, il y a des exceptions… 2 chromosomes circulaires 1 chromosome linéaire … Dans certaines bactéries ont un petit génome fait d’un chromosome mais aussi d’un plasmide qui fait partie intégrante du génome. Transmission verticale de la totalité

d’anticorps ainsi que la quantité insuffisante des GTPases Rho endogènes pour mettre en évidence ces liaisons. Il est possible de tester la deuxième hypothèse en sur-exprimant les GTPases Rho par transfection de cellules eucaryotes avec des plasmides codant ces protéines de manière à augmenter leur concentration intracellulaire. Le but de mon stage consiste donc à purifier les scFv à partir de cultures de bactéries Escherichia coli, de valider mes préparations de fragments d’anticorps sur

chocs électriques. Ce mélange est composé de protoplastes et d'ADN; le champ électrique provoque l'ouverture des pores membranaires du protoplaste, facilitant ainsi le passage de l'ADN dans le noyau. Les protoplastes baignent dans une solution de plasmides. Ces derniers passent donc dans la cellule qui se trouve ainsi à son tour génétiquement modifiée. Cette manipulation est possible car le phénomène d’ouverture des pores est réversible; donc la cellule reprend sa forme initiale seulement si le choc

fourches. Cette enzyme est inhibée la norobiocine (antibiotique). d\ Les plasmides. *Définition : ce sont des molécules d’ADN double brin, circulaire, qui, extrachromosomique, ne constituent pas le génome bactérien. Ils ont une réplication autonome (un pouvoir infectieux), une petite taille et codent pour une information génétique non-indispensable. Ils peuvent infecter des bactéries ou être échangés entre elles. Ces plasmides ont été découverts en 1952 sur Shigella dysenteriae. Shigella résistante

Option : BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE (SVI) EXTRACTION D’ADN PLASMIDIQUE ET TRANSFORMATION D’ESCHERICHIA COLI PAR UN PLASMIDE Présenté par : •USANASE VIVENS Soutenu, le 28 Juin 2013 Devant

préparé l'insert et le plasmide, que nous avons ligaturé. Les bactéries ont ensuite été rendues compétentes avant qu'elles ne soient transformées par le plasmide recombinant. Enfin ; nous avons procédé à l'analyse de notre produit de clonage. Introduction Le travail réalisé lors de ce TP aura pour but la réalisation d'un clonage, c'est à dire l'insertion d'un fragment d'ADN contenu dans un vecteur initial dans un autre vecteur puis la transformation de ce plasmide recombiné dans les bactéries