Réaction en chaîne par polymérase

lignée LEW. Les six lignées congéniques LEW.c10BN sont numérotées B, C, E, F, I et If, possédant chacune différents fragments chevauchants du QTL. 2) Méthodes mises en œuvre Une première expérience d'amplification de l'ADN par PCR (Polymerisation Reaction Chain) suivie d'une électrophorèse sur gel SDS-PAGE a été effectuée. Le protocole PCR ne sera pas entièrement détaillé dans ce rapport mais quelques points sont à préciser. En effet l'ADN des 8 lignées (BN, LEW et les lignées congéniques B, C, E, F

RNeasy Mini Kit, QIAGEN) 4.3.2 Dosage 4.3 Interprétation des résultats 4 Transcription inverse 5.4 Principe 5.5 Protocole expérimental 5.6 Migration électrophorétique sur gel d’agarose 5 Réaction de polymérisation en chaine (PCR) 6.7 Principe 6.8 Protocole expérimental 6 Identification du produit de PCR par électrophorèse sur gel d’agarose 7.9 Principe 7.10 Mode opératoire de l’électrophorèse 7.11.3 Gel d’agarose

cultiver in vitro a longtemps limité la connaissance du virus [4]. Son identification génomique a été rendu possible grâce à la biologie moléculaire seulement depuis les années 1970, avec un essor particulier après la découverte en 1985 de la polymerase chain reaction (PCR) [4]. I.3 Agent pathogène : a. Structure [4,5,6,13]: Le papillomavirus appartient à la famille des Papillomaviridae. Plus de 120 génotypes ont été décrits chez l’homme dont une quarantaine infecte préférentiellement l’épithélium du

absorbée dans l’environnement, une petite partie des bases émet de la fluorescence et l’autre subit des réactions chimiques (dont la formation de photoproduit). Molécule d'eau Uracile Cytosine Dans le cas de dimère de thymine, la liaison forte créée entre ces deux bases azotées, ces liaisons déforme la molécule et empêche les ADN-polymérase de passer le long de l'ADN. Lorsqu'une polymérase réussit à passer elle crée souvent des mésappariement. C'est à dire qu'elle synthétise une base qui

ADN appartenant à la famille des Hepadnaviridae6. La particule virale (virion) se compose d'une enveloppe extérieure lipidique et d’un noyau, unnucléocapside de forme icosaédrique composé de protéines. Le nucléocapside entoure l’ADN viral et une ADN polymérase, qui a une activité de Transcriptase inverse. Le VHB, comme le Virus de l’Hépatite C (VHC), peut survivre à la dessiccation contrairement au VIH. Le VHB est encore infectieux après sept jours de dessiccation, alors que le VHC reste infectieux pendant

extrémités cohésives produites par de nombreux types de nucléases de restriction permettent de relier deux fragments d'ADN par des appariements de hases complémentaires. Les fragments d'ADN ainsi réunis peuvent être liés de façon covalente au cours d'une réaction très efficace catalysée par t'ADN ligase. Dans cet exemple, une molécule d'ADN recombinant de plasmide contenant une insertion d'ADN chromosomique est formée. Par exemple, un fragment d'ADN contenant un gène humain peut être relié au chromosome

celles qui vous semblent correspondre à celles de la membrane plasmique (protéines et lipides): a) Barrière pour la plupart de solutés physiologiques b) Attachement à la matrice extracellulaire c) Biosynthèse des lipides d) Localisation de réactions enzymatiques e) Réceptivité à l'environnement extérieur Les protéines membranaires (1) : a) Sont toujours transmembranaires b) Peuvent-être plusieurs fois transmembranaires c) Peuvent-être fixées à la membrane par un ancrage lipidique d) Sont

forme une chaine polypeptidique STRUCTURE SECONDAIRE : repli de la chaine polypeptidique → forme soit feuillet bêta /hélice alpha STRUCTURE TERTIAIRE : feuillets / hélices orientés ds espace→ forme une boule (pr protéines globulaires) → forme un toron (dans protéines fibreuses) On retrouve un pont disulfure + liaisons hydrogènes NB : un atome hydrogène stabilise ce repliement particulier de la molécule STRUCTURE QUATERNAIRE : association de plusieurs chaines polypeptidiques

les allèles. Ex : Gene des yeux, les allèles bleu, marrons, vert … Au centre de ce chromosome, on peut observer le centromère et d’une part et d’autre de celui-ci des chromatides. (L’ADN qui s’enroule formant cela) L’ADN est constituée de deux chaînes (ou brins) qui s’enroulent l’une autour de l’autre pour former une double hélice. Chaque hélice est constituée de nucléotide. Un nucléotide est constitué d’un acide phosphorique, d’un sucre (le désoxyribose) et d’une base azotée. C’est base sont complémentaire

09/09/20222.2 La réplication à l’échelle moléculaireLa réplication commence par la séparation locales des deux brins par rupture des liaisons entre les nucléotides complémentaires grâce à une enzyme : l’ADN polymérase. Tout en progressant le long de la molécule, l’ADN polymérase insère un à un de nouveau nucléotides en face de chacun des brin en respectant la complémentarité des bases. Les deux nouvelles molécules ont une fréquence identique entre elles et