Réaction en chaîne par polymérase

pour l’identification de ces maladies au laboratoire et dans la serre climatisée (TableauI), telles que la sérologie et les tests biologiques qui, dans certains cas, sont associés à l’électrophorèse, enfin l’utilisation de l’immunocapture polymerase chain reaction (IC-PCR) est encore au stade expérimental. ~ ~ ~~ CIHEAM - Options Mediterraneennes 24 J. Boubker Tableau I - Les différentes méthodes d'identification des maladiesà virus, à viroides et à phytoplasmes ~ ~~ Maladies

révolutionnaire La PCR (de l'anglais polymerase chain reaction) est la technique d’amplification de l'ADN (acide désoxyribonucléique) la plus utilisée en biologie moléculaire. Elle est à l'origine du décodage complet du génome humain et ses applications concernent de nombreux secteurs de la recherche scientifique (diagnostic de certaines maladies, identification génétique à partir d'échantillons de cheveux en criminologie, etc.). La PCR utilise une enzyme, l'ADN polymérase, capable de répliquer rapidement

599 2. Plasmide pUT 654 3. Plasmide pUT 807 4. Intérêt du plasmide pUT 807 II. Principe des méthodes utilisées. 1. La PCR 2. Intérêt de la PCR et conditions opératoires 3. Réactions enzymatiques : restriction et ligation 4. Electrophorèse en gel d’agarose a) Migration/Séparation b) Conditions opératoires c) Visualisation d) Purification

processus de copie du matériel génétique (ADN ou ARN) en ARN. Chez les eucaryotes, trois ARN polymérases (ARNpol) interviennent : l'ARNpol I ou A pour les ARN ribosomiques transcrits dans le nucléole (28S, 18S et 5,8S), l'ARNpol II ou B pour les ARNm, et l'ARNpol III ou C pour les petits ARN (ARNt, ARNr 5S, ARNsn). Intéressons-nous plus particulièrement à la transcription des gènes codant pour les chaînes polypeptidiques chez les eucaryotes. Leur transcription se déroule en deux étapes : formation

placent en face de chacun des 2 brins initiaux selon le principe de complémentarité des nucléotides. Chaque brin de la molécule initiale sert donc de modèle à la synthèse d’un nouveau brin complémentaire. La réaction de polymérisation des nucléotides est permise par une enzyme, l’ADN polymérase qui progresse à mesure que la fourche de réplication s’écarte. La réplication se termine lorsque tous les yeux de réplication ont fusionné. Elle permet la formation de 2 molécules d’ADN génétiquement identiques

Acide aminé (n.m.): Molécule organique portant sur le même carbone une fonction amine (NH2), une fonc¬tion acide (COOH), un hydrogène et une chaîne laté¬rale notée R. Vingt acides aminés différents entrent dans la composition des protéines. Ils diffèrent par la structure et les propriétés de leur chaîne latérale (polaire, apolaire, hydrophobe, hydrophile, soufrée, acide, basique). Adaptation (n.f.): Ensemble de caractères phéno¬typiques acquis génétiquement, en réponse à une contrainte environnementale

une Pyrine) NLRP3: Nod Like Receptor Protein3 (Protéine de type Récepteur NOD) PCR : Polymerase Chain Reaction (Amplification en Chaine par Polymérisation) PAPA : Pyogenic Sterile Arthritis, Pyoderma (arthrites puriformes, acné kystique, pyoderma gangrenosum) SQF-PCR: Quantitative Multiplex PCR of Short Fluorescent fragment (PCR multiplexe de courts fragments fluorescents) Q-PCR : Polymerase Chain Reaction Quantification (PCR quantitative) SNP : Single Nucleotid Polymorphism (Polymorphisme d’un

réplication = 2 types hybride + léger N 14 réplication semi conservative résultat obtenu n’est pas un modèle dispersive ms semi conservative p21 la double hélice s’ouvre au niveau de l’origine de réplication riche en A et T chez e coli 3 activités polymérase la vrai pol III fction ADN pol : p22 fonctionne sur le mm modèle besoin de précurseurs : amorce(primer)avec un OH 3’ pour que la pol s’accroche sr celle-ci pour apporter le désoxyribose tri P on crée une liaison phosphodiester avec le OH de

LUMINOL. ● Il permet de détecter les traces de sang effacées. Les ions Fer III dans l'hémoglobine permettent les réactions chimiques : 1) H2O2 + Fe3+ → O2 + 2H+ + 2Fe²+ 2) H2O2 + Fe²+ + 2H+ → 2H2O + Fe3+ ● ● ● III. Au Laboratoire. Au laboratoire, pour découvrir des indices à partir des taches de sang, on utilisent différents outils : Polymérase Chain Réaction (P.C.R) ● A partir de petits échantillons cette technique permet d'avoir un nombre exploitable d'ADN. Des propriétés

biologique. Les modèles développés sont très performants pour décrire la réalité et surtout, de très faibles activités sont facilement mesurables. La précision des comptages atteint l’atome, ce qu’aucune autre technique autorise. I REACTIONS RADIOCHIMIQUES Ces réactions initiales conditionnent les effets biologiques des rayonnements ionisants. Les rayons X , gamma ou particulaires transmettent leurs énergies sous forme d’énergie cinétique aux électrons de la matière. Les rayonnements sont ionisants