Réaction en chaîne par polymérase

l’ADN procaryote o 1) Pré-inscription o 2) Initiation o 3) Elongation o 4) Terminaison o 5) Maturation des transcrits primaires • III) Transcription de l’ADN eucaryote o 1) Les ARN-polymérases eucaryotes o 2) Différence dans la transcription eucaryote ▪ a) Complexe protéique nécessaire à la transcription ▪ b) Promoteur minimum et régions régulatrices o 3) Les régions cis-régulatrices

TP5 l’expression de l’ADN : la Transcription I/Un gène, une protéine Une protéine : Une protéine est un enchainement d'acides aminés. Elle peut être une enzyme qui permet de réaliser les réactions métaboliques ou des transporteur (hémoglobine) ou encore servir dans la structure d'un élément (kératine). Séquence d’acides aminés de l’hémoglobine normale et drépanocytaire et les extraits de la séquence nucléotidique du gène codant ces 2 protéines Après comparaison de la séquence d’acide aminé

ARCHITECTURE ET LOGIQUE DES ÊTRES VIVANTS STRUCTURE DES BIOMOLÉCULES CHAPITRE 1 • Aminoacides, peptides et protéines Les α-aminoacides La chaîne polypeptidique et ses conformations Reploiement des chaînes polypeptidiques des protéines globulaires hydrosolubles Des motifs de reploiement, ou structures supersecondaires, sont formés à partir d’hélices α et/ou de brins β Les chaînes polypeptidiques sont organisées en domaines Les structures des protéines peuvent être réparties en trois classes Les protéines transmembranaires

L’ADNc TAT par PCR : Le principe de la Polymerase Chain Reaction est d’obtenir en grande quantité un fragment d’ADN précis. Pour cela il faut un fragment d’ADN de base (celui que l’on veut dupliquer), des nucléotides (dNTPs), des amorces choisies pour amplifier que la partie qui nous intéresse, une ADN polymérase (ici la Taq polymérase isolé de la bactérie thermophilus aquaticus résistante à de hautes températures) et des cofacteur de l’ADN polymérase (MgCl2…). Le mécanisme est le suivant : 5’

production du péroxyde d’hydrogène ( H2O2) composé toxique au fort pouvoir oxydant qui va être par la suite utilisé pour des réactions de réticulation au sein de la paroi ou dans la transduction de signaux. Réaction : OxO (COOH)2+O2 ====> CO2+H2O2 Dans la première partie de ce TP, nous allons d’abord mettre en évidence la présence du gène de cette enzyme chez le blé avec la réaction de PCR, en testant 4 méthodes d’extractions et lors de la seconde partie, nous utiliserons 2 méthodes différentes pour caractériser

cellule), les réactions chimiques ,la transmission des signaux, ainsi que la modification du fonctionnement des cellules aussi appelée rôle hormonal (ex :l’insuline qui régule la glycémie). Une protéine est constituée par un ou plusieurs polypeptides composées chacun d’une chaine d’acides aminés, petites molécules qui sont liées par des liaisons peptidiques. Dans un polypeptide, les acides aminés réagissent selon leur affinité chimique avec leur voisin, ce qui attribue à la chaine polypeptidique

bactérienne pure. Jay (1985) [13] a recensé et détaillé l’ensemble des tests physico-chimiques ainsi que leurs applications en analyse agroalimentaire, seules l’impédance et la bioluminescence seront détaillées ci-après. 2.2.1 Impédance Au cours des réactions métaboliques qui permettent la croissance du micro-organisme, certaines molécules électriquement inertes, les sucres par exemple, sont transformées en molécules ionisées telles que des acides ; ce fait se traduit par un accroissement de la conductance

bain-marie· 2 Eppendorf de 1,5 mL · gel d’agarose 1% II. Amplification de l’ADNc TAT par PCRB. Principe de la technique de PCR, de la purification d’ADN et de l’électrophorèse (faire un A,B,C ?) La technique de PCR (Polymérase Chain Reaction) est une technique permettant d’amplifier une séquence d’ADN d’intérêt dans le but d’obtenir un grand nombre de copies de cette dernière. 3 grandes étapes constituent cette technique : la Dénaturation, l’Hybridation et l'Élongation. On utilise

développement et au fonctionnement d’un organisme. C’est aussi le support de l’hérédité. L’ADN renferme donc l’information génétique et constitue le génome, c’est-à-dire l’ensemble des gènes. L’ADN est formé de deux brins. Un brin est composé d'une chaîne de molécules appelées nucléotides. Un nucléotide est composé de 3 éléments : * Un groupement de phosphate (ou acide phosphorique) * un sucre (désoxyribose) * une base azotée : l’Adénine (A), la Thymine(T), la Guanine (G) etla Cytosine(C)

quatre bases azoté (adénine guanine cytosine et la thymine) NB: en l’absence du groupement phosphate, la base et le désoxyribose forment un nucléoside. Voir figure Structure de la double hélice imaginée par Watson et Crick: Chaque hélice est une chaine de nucléotides par des liaisons phosphodiester Les deux hélices sont maintenues ensembles par des liaisons hydrogènes qui se forment entre les paires de bases. Chaque paire de bases comporte une base purique et une base pyrimidique appariées selon