Site actif

réagit la plus rapidement et celle qui possède la plus grande affinité avec le substrat. On constate donc les deux mutations RS16K et RS16Q n’ont pas une bonne action sur l’activité de la GOX. En conclusion, la modification d’un acide aminé du site actif peut avoir de mauvaise conséquence sur l’activité de la GOX. Une mutation rend l’activité plus lente et une affinité enzyme/substrat plus faible. Dans le document 4, on peut observer les modèles de la structure de la mutation RS16K

Enzyme seule : - début de la chaîne bleu ALA 1 - Fin de la chaîne rouge ASN 307 Structure spatiale : La chaîne forme des liaisons secondaires, elle se replie sur elle-même. La forme est arrondie, on note la présence d’une cavité. Creux : Site actif, site de fixation du substrat et de sa transformation en produit L(entrée) = 11x 10-7 m l = 9 .24x 10-7 m Profondeur = 14x10-7 m DESSIN Distance SER 199.CB – ILE 247.C6 = 8.1 Angström. Distance ASP 273 – GLU 72 = 10.7 A Distance (turquoise-vert)

Définition des inhibiteurs Inhibiteurs : un inhibiteur est un composé qui ralentit une réaction chimique. Il permet de ralentir ou stoppe une réaction enzymatique. En se liant sur une enzyme, un inhibiteur peut empêcher la fixation du substrat sur le site actif, ou provoquer une déformation de l’enzyme qui rend celle-ci inactive. L’inhibition des enzymes joue un rôle important dans le contrôle des mécanismes biologiques, et notamment dans la régulation des voies métaboliques. On distingue généralement

enzymes qui fournissent une courbe sigmoïdale quand leur activité est tracée on fonction de la concentration en substrat et qui n’obéissent pas à la cinétique classique de Michaelis-Menten .Ces enzymes constituées en sous-unités, contiennent plus d’un site actif par molécule la courbe sigmoïdale s’explique du fait qu’une molécule qui se lie va faciliter la fixation d’une deuxième molécules. La phosphatase alcaline est une enzyme à deux substrats, pour la réaction de ce TP les deux substrats sont l’eau

(car enzyme protéique). Spécificité d’action (en fonction des différentes classes d’enzymes). Spécificité de substrat : amylase sur amidon et invertase sur saccharose et pas l’inverse (modèle clé/serrure : stéréo-complémentarité au niveau du site actif (endroit ou a lieu l’hydrolyse)). Parfois pour faciliter le contact entre substrat et enzyme, on a besoin d’une autre molécule (= coenzyme) ou d’un ion. Le coenzyme ne reste pas forcément intact à la fin de la réaction. Agit à dose infime

faibles doses d’aspirine modifie cet équilibre en faveur de la prostacycline. L’aspirine provoque un inhibition irréversible de la cyclo-ogénase en acétylant un résidu de sérine (c’est pourquoi elle n’était plus visible sur le pdb de Thamy) de son site actif ce qui bloque temporairement le production de Thromboxane A2 et de prostacycline. Les cellules endothéliales reforment la cyclo-ogénase en quelques heures et se remettent à produire la prostacycline alors que les plaquettes ne reforment pas l’enzyme

l’on nomme complexe de Michaelis2. Par contre, les enzymes peuvent être inhibées de façon irréversibles par la liaison covalente d’autres molécules chimiques que l’on nomme inhibiteur. On parle d’inhibition compétitive si l’inhibiteur se lie au site actif de l’enzyme et empêche le substrat de s’y lier. La vitesse maximale reste alors inchangée, et le KM est augmenté d’un facteur de (1 + [I]/Ki) (Figure 1). Dans le cas d’une inhibition compétitive, la constante d’inhibition (Ki) correspond à la concentration

C’est la fin de la réaction : le substrat a été transformé en produit. 2 – Mécanisme de la catalyse enzymatique La catalyse enzymatique se fait en trois étapes. La formation du complexe enzyme substrat a lieu sur le site actif de l’enzyme. Le schéma suivant représente l’action d’une enzyme (ici une hydrolase) sur son substrat. [pic]

Ainsi seule l’absorbance des produits est mesurée, permettant d’en déduire l’activité de la trypsine. Quelques définitions : * Enzyme : C’est une protéine constituée d’acide aminé catalysant une réaction biochimique. Elle est formée d’un site actif que se fixe le substrat qui pourra alors être soumis à l'action de l'enzyme afin de le transformer en produit. Une enzyme est spécifique d’une réaction qu’elle accélère sans se modifier elle-même et sans modifier les composants qui participent à

l’évaluation. * Dispositions non conformes aux IFRS : possibilité de comptabiliser des provisions pour gros entretien ou grandes révisions. Règlement 2002-10 : amortissements et dépréciation des actifs * Dispositions conformes aux IFRS : * définition de l’amortissement et de la dépréciation d’un actif ; * approche par composants ; * prise en compte de la valeur résiduelle pour le calcul de l’amortissement. * Dispositions non conformes : comptabilisation des dépenses de gros