Chymotrypsine

d'intermédiaires réactionnels qui permettent de baisser la barrière d'énergie d'activation. DOCUMENT : L'EXEMPLE DE LA CHYMOTRYPSINE, ENZYME PROTÉOLYTIQUE La chymotrypsine (protéase à sérine) est constituée de trois segments d'une même chaîne polypeptidique originelle reliés par des ponts disulfure. 1 13 16 146 149 245 Lorsqu'elle se replie, la chymotrypsine adopte une conformation qui correspond à deux domaines structuraux. [pic] • Le domaine N-terminal porte deux des

la PZ-CCK -PZ-CCK : favorise la sécrétion de la bile et du suc pancréatique -Lipides sont les derniers à sortir de l’estomac => sous forme d’une émulsion grossière instable | PANCRÉAS | -Enzymes protéolytiques sécrétées : la trypsine, la chymotrypsine et l’élastase qui vont hydrolyser les liaisons peptidiques. Elles coupent en C-terminal certains acides aminés comme les AA basiques -Protéines deviennent des oligopeptides etyotéines deviennent des p cytoplasmique l'i ou tri-peptidesions du TDrol

intérêts et défauts. La bonne connaissance des propriétés des peptides et de leurs éléments constitutifs, les acides aminés, est à acquérir avant et au cours de ce TP. Méthodes : Vous allez effectuer la digestion protéolytique d’un peptide grâce à la chymotrypsine, analyser en HPLC par chromatographie en phase inversée avec appariement d’ion les fragments obtenus et tester la capacité de ces fragments à interagir avec l’héparine par chromatographie d’affinité. ASPECT THEORIQUE, RAPPELS Rappels sur les

spécifique le clivage de l’aminoacide C-terminal des peptides. Cette catalyse libère l’aa C-terminal. LA trypsine hydrolyse des liaisons peptidiques dans lesquelles la fonction carbonyle est fournie par la lysine ou l’arginine. Spécificité de la chymotrypsine -AA1-CO--NH-AA2L’aminoacide 1= Phe, Trp, ou TYR Le tryptophane est detruit par l’hydrolyse acide à 120 °C Bromure de cyanogène 9 λ nm Spectres d’absorption des aminoacides de l’UV Interprétation Nona peptide = 9 résidus, (Ala,

(en rouge) donc notre peptide est polaire. On a un pic à 9,58 minutes ce qui correspond au temps de rétention du peptide non digéré donc il en reste mais le pic est petit (environ 75 mAU) donc en faible quantité. Le peptide est digéré par l’α chymotrypsine qui coupe préférentiellement après les gros résidus et plus particulièrement après les acides aminés aromatiques, ici la phénylalanine en position 12. Il y a donc 2 fragments. On a trois pics correspondant au pic d’injection (0,55 minutes)

les plus importantes, le trypsinogène et le chymotrypsinogène, sont sécrétées sous une forme inactive. Ces enzymes sont ensuite activées dans l’intestin par une entéropeptidase (entérokinase) qui les transforme en trypsine et en chymotrypsine. La trypsine et la chymotrypsine rompent les liaisons peptidiques à l’intérieur de la molécule protéique. Le contrôle de la sécrétion pancréatique est double : nerveuse et hormonale. La commande nerveuse utilise la voie du pneumogastrique. C’est un mécanisme

enzymes. La trypsine et la chymotrypsine agissent sur la digestion des protéines, l'amylase pancréatique sur la digestion des sucres et la lipase sur la digestion des graisses. L’α-amylase qui transforme l’amidon et le glycogène en maltose. Elle est semblable à l’amylase salivaire. La lipase qui hydrolyse les graisses neutres en acides gras et glycérol. Elle a comme cofacteur la colipase sécrétée par le pancréas sous forme inactive Les protéases (trypsine chymotrypsine) sécrétées sous forme inactive

liaisons H) 3) Exemple de la Rnase pancréatique En ce qui concerne le site actif de la Rnase : - 1 Lysine 41 assure le positionnement du substrat - 2 Histidines 12 et 119 assurent la catalyse Voir Doc 5. 4) Exemple de la chymotrypsine pancréatique La chymotrypsine est une protéase : - C’est une enzyme qui clive les liaisons peptidiques des protéines (protéolyse) - Cette réaction nécessite l’utilisation d’une molécule d’eau ce qui classe cette enzyme parmi les hydrolases. - C’est une endopeptidase

Antibiotiques Pénicilline Céphalosporine Tétracycline Streptomycine Sulfamide Anesthésiques locaux Procaïne Anesthésiques généraux Curare Barbituriques Anti-inflammatoires Certains types d'hormones Produits de contraste Iode Enzymes (chymotrypsine) utilisées dans le traitement de certaine hernie discale Aliments : Poissons Crustacés Cacahuètes Etc… Piqûres d'insectes : Abeilles Guêpes Le choc anaphylactique se traduit par les symptômes suivants : Agitation Angoisse Prurit (démangeaisons

disaccharide différent. Dans l'estomac, la pepsine prépare les protéines à la digestion en les morcelant, puis un groupe d'enzymes de l'intestin grêle décompose complètement les polypeptides en leurs composants, les acides aminés. La trypsine et la chymotrypsine agissent spécifiquement sur les liaisons peptidiques entre certains acides aminés; par conséquent, comme la pepsine, elles décomposent les polypeptides en chaînes plus courtes. Les carboxypeptidases (A et B) enlèvent un acide aminé à la fois, en