Solution de Lugol

Préparation  : ajouter à la gélose Columbia préparée de façon habituelle, juste avant de la couler en boite de pétri, le mélange d’antibiotiques. Ce mélange ANC sous forme lyophilisée est dissous dans 2ml d’eau distillée stérile par flacon. La solution obtenue contient la quantité d’antibiotiques nécessaire pour 100ml de milieu (c’est-à-dire 1,5mg d’acide nalidixique et 1mg de colimycine base) Intérêt : La gélose Columbia ANC est un milieu d’isolement sélectif à toutes les espèces de streptocoques

en utilisant la méthode de Beer-Lambert . Principe Il s’agit de comparer l’absorbance de la solution de glycogène obtenue par l’extraction à celle d’autre solution de concentration connue Mode opératoire a. Matériels Balance, Broyeur mortier, Fiole à vide, Bêcher, Éprouvette, tubes de centrifugeuse, centrifugation, couteau b. Produits Foie de volaille frais, Eau iodée, alcool à 95%, lugol, eau distillée, l’acide trichloroacétique TCA à 40% c. Protocole : Peser et couper en petits

place une plante avec un cache exposée à la lumière intense. Après 24 heure d’éclairement, on révèle la présence d’amidon qui est l’un des produits de la photosynthèse. Pour cela on effectue une décoloration de la feuille puis une coloration par du Lugol. Si le résultat est négatif la feuille reste jaune, sinon elle devient marron. Interprétation1. Importance de la lumière Pour fabriquer sa matière organique, la feuille a besoin d’énergie lumineuse 2. Importance de la chlorophyllePour fabriquer sa

fonction aldéhyde des sucres réducteurs (ou cétone libre), en acide carboxylique, en formant un précipité rouge brique d’oxyde cuivreux (Cu2O). Selon la réaction d’oxydo-réduction suivante : · Réaction à l’eau iodée : on utilise le réactif de Lugol (solution d’iodure de potassium iodée), un réactif de couleur initiale orangée, qui au contact de l’amidon, va s’insérer dans la molécule hélicoïdale d’amylose et la colorer en bleu nuit tandis que l’amylopectine est colorée en rouge. · Test de glucose

gentiane * SOLUTION A : Violet de gentiane 2 g Alcool à 95° 20 ml * SOLUTION B : Oxalate d'ammonium : 0,8 g Eau distillée 80 ml Mélanger les solutions A et B, Laisser reposer 24 heures avant l'emploi, Verser à travers un papier filtre dans un flacon. * Solution iodée de Gram * Iode 1 g * Iodure de potassium 2 g * Eau distillée 300 ml Conserver dans un flacon en verre brun ou en plastique opaque (à l'abri de la lumière). * Solution de safranine * SOLUTION A : Safranine

préparation de cellules artificiellement compétentes : Les cellules d'E. coli sont cultivées jusqu'en phase exponentielle puis concentrées par centrifugation. Ces cellules sont rendues compétentes pour la transformation par resuspension dans une solution de chlorure de calcium. En présence d'ions calcium, les cellules sont capables d'ingérer des petites molécules d'ADN, comme un plasmide. Revoir les notions en TP. 1) Une culture bactérienne d’E. coli à DO600nm = 0,4 de volume « Vi » (volume initial)

selles persistent alors : soit des cellules arrondies, sacs contenant des grains d'amidon soit ces mêmes grains d'amidon libres ovalaires leur contenu est homogène ou strié. Le degré de digestion de l'amidon peut être estimé en ajoutant de l'iode (Lugol) : coloration bleutée : l'amidon n'est pas digéré coloration jaune orangée : l'amidon est digéré Cellules scléreuses Résidus végétaux provenant des fruits des rosacées (poire, olive, abricot, prune...) formés de substances très dures pouvant

liquide, l'ajout d'eau n'est pas nécessaire. b- Les techniques de coloration: Coloration au lugol: Cette coloration est facile et extemporanée. Elle permet le diagnostic différentiel des amibes. Elle colore en brun les vacuoles iodophiles et les noyaux. Technique: Ajouter une goutte de lugol au montage préparé pour l'examen direct. Observer au microscope aux grossissements 100 puis 400. Réactifs: Lugol Iode 1g Iodure de potassium 2g Eau distillée 100ml Durée de conservation: 3 semaines

pour chaque paillasse, solution de rouge neutre à 1g/L (Dissoudre 0,1g de rouge neutre dans 100 ml de tampon phosphate à pH 6,5 : la pénétration du rouge neutre dans les cellules n’est possible qu’à ce pH), solution d’eau iodo-iodurée ou lugol (4g d’iode, 8g de KI dans 1L d’eau distillée), cristallisoir avec eau de Javel pour lames et lamelles usagées 3. PRÉPARATION DES LAMES - On prépare simultanément 2 colorants dans 2 verres de montre : - Rouge neutre - Solution d’eau iodo-iodurée - A

glucose. L'amidon est identifiable par un test de coloration à l'eau iodée (ou Lugol), il prend une teinte "bleu nuit". Certains oses et disaccharides ont la propriété de réduire la Liqueur de Fehling (solution alcaline de sulfate de cuivre), il se forme alors un précipité rouge brique caractéristique à chaud. Cette méthode est utilisée pour révéler la présence de ce type de sucre, dit réducteur dans une solution. (Voir aussi expérience du livre p.28-29) Le tableau ci-dessous présente les résultats