Cinétique enzymatique

ÉTUDE CINÉTIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE ET DÉTERMINATION DU pH OPTIMUM BUT: Connaître les caractéristiques de la phosphatase alcaline tels que la Vm, le Km et le pH optimum. Lors de ce T.P. On étudiera donc les propriétés phosphatase et alcaline de cette enzyme. Une phosphatase est une enzyme qui hydrolyse un monoester phosphorique et forme un phosphate et un alcool ou un phénol: R-O-PO32- + H2O → R-OH + HPO42- Pour connaître le Vm et le Km de cette enzyme, on a besoin

TP : étude expérimentale de la phosphatase alcaline But Nous cherchons à déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme, la phosphatase alcaline, en présence d’un ou de deux substrats. Pour cela nous avons, dans un premier temps, étudié l’activité de cette enzyme en présence de différentes concentrations d’un seul substrat. Ce qui nous a ensuite permis de l’étudier en présence de deux substrats. Principe Le p-nitrophényl phosphate (PNPP), qui sera notre premier substrat, est un composé

Chapitre 4 : Cinétique chimique TS8 Mercredi 13 octobre 2015 Introduction ›  Des réactions lentes… Formation de la rouille 4Fe + 6H2O + 3O2 → 2Fe2O3,3H2O Fermentation alcoolique (voir doc. 1) C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2 Introduction ›  Des réactions lentes… Une réaction est dite lente lorsqu'on peut la suivre à l'œil nu ou à l’aide d’un appareil de mesure(pH-mètre, conductimètre, spectrophotomètre,…) Introduction ›  … Et des réactions rapides Combustion CH4 + 2O2 → CO2 + 2H2O Introduction

Chapitre 2: Cinétique enzymatique. 1. Mesure des vitesses. 1.1 Méthodes (ou systèmes) discontinues. Calcul de la vitesse de transformation d'un substrat sous l'action d'une enzyme. 1. Plusieurs mesures, la première le plus tôt possible de S et de P et on regarde ensuite graphiquement la variation des concentrations. La concentration varie linéairement. Il faut être sûr d'avoir des vitesses initiales. 2. Injection dans une colonne de chromatographie les prélèvements, le chromatogramme donne l'absorbance

le volume final de ce tube devant être égal à 10mL, si l’on en prélève 7,48 mL pour le tube suivant à 0,125 mM il faut que son volume total soit de 17,48 mL. On procède exactement de la même manière pour toutes les autres dilutions en amont. Étude cinétique de la libération des produits de la réaction On prépare 7 tubes de solution de substrat avec 1,5 mL de tampon Tris-HCl servant à maintenir un pH idéal pour l’enzyme, 0,5 mL de ZnCl2, l’ion Zn2+ étant un co-facteur important pour le bon fonctionnement

hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation de phosphate minéral et d'un alcool ou d'un phénol, selon la réaction: R-O-PO32- + → R-OH + HPO42- METHODOLOGIE La manipulation permet l'étude de l'influence de plusieurs facteurs sur la réaction enzymatique. L'enzyme utilisée est une préparation commerciale partiellement purifiée de phosphatase intestinale de veau, la réaction sera suivie en dosant les produits apparus dans le milieu lorsque l'enzyme est mise en présence du substrat. Pour des raisons

___________________________________________________________________ ETUDE CINETIQUE ET DETERMINATION DU pH OPTIMUM DE LA PHOSPHATASE ALCALINE Les phosphatases ou phosphomonoestérases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation de phosphate minéral et d'un alcool ou d'un phénol, selon la réaction : R-O-PO32- + H2O  R-OH + HPO42- Méthodologie La manipulation permet l'étude de l'influence de plusieurs facteurs sur la réaction enzymatique. L'enzyme utilisée est une préparation commerciale

INTRODUCTION A LA CINETIQUE CHIMIQUE   La cinétique chimique a pour objet d’étudier la vitesse de formation, de proposer des mécanismes, donc de définir des chemins réactionnels. La cinétique commence par la cinétique empirique, c’est à dire la détermination des relations algébriques entre la concentration et le temps.   Pour établir les règles de cinétique empirique, il faut des méthodes de détermination de la concentration en fonction du temps, soit par spectroscopie (permet de mesurer la concentration

non liant, atome électronégatif, liaison double Site accepteur : atome chargé positivement, atome le moins électronégatif. Mécanisme réactionnel : indique nature des liaisons formées et rompues + ordre dans lequel les transformations ont lieu. Cinétique chimique et catalyse : évolution des systèmes chimiques au cours du temps. Couples redox : Ox / Red. Ox capte les électrons, Red perds les électrons. Ox d'un couple réagit avec Red d'un autre couple. Réduction : gain d'électrons : oxydant réduit

TS chap 9 Temps et évolution chimique : Cinétique et catalyse p 229 Hachette  Activités expérimentales p 230 et 231 : réactions lentes, rapides et facteurs cinétiques  Activité 3 p232 : suivi temporel d’une synthèse organique par CCM (étude documentaire)  Activité expérimentale 4 p 233 : suivi temporel d’une réaction par spectrophotométrie I – Réactions rapides, réactions lentes  Une réaction est rapide lorsqu’elle semble achevée dès que les réactifs entrent en contact.  Une réaction