ADN polymérase

Rôle : détermination des séquences génomiques des Organismes importants 2-La PCR (Polymerase Chain Reaction) : ACP= Amplification en Chaîne par Polymérase Principe : *Succession de réplication d’une molécule d’ADN db ciblé (Millions de fragments précis/heure) *3ème cycle : la quantité initiale d’ADN x 8 *La PCR a lieu dans un petit tube installé dans un thermocycleur. Contenu du tube : ADN cible , Les oligonucléotides, Taq poly ,bases azotées 3- Les puces d’ADN; Outil technologique

Première S Durée conseillée : 6 semaines Nombre de TP : En rouge : Bilans à faire noter aux élèves En bleu : Activités pratiques En vert : Problématique et hypothèses RAPPELS http://www.cea.fr/var/cea/storage/static/fr/jeunes/animation/aLaLoupe/ADN/index.htm 1 – La cellule : - Cellule : Les cellules sont constituées d’une membrane plasmique, d’un cytoplasme et d’un noyau. - Eucaryotes : Cellules qui possèdent un noyau - Procaryotes : Cellules qui ne possèdent pas de noyau - Organites :

désoxyribose – R = ribose 4.2. Mécanisme de transcription Document 6 : Quelques informations sur le mécanisme de transcription  Donnée 1 : Séquences d’une portion d’un gène et de l’ARNm correspondant ADN  Brin 1 AATGCTTCAATGC Brin 2 TTACGAAGTTACG ARNm UUACGAAGUUACG Donnée 2 : L’ARN polymérase (ADN dépendante) est une enzyme qui permet la synthèse de l’ARN dans la cellule. Elle intervient après l’ouverture et le déroulement d’une petite portion de la double hélice d’ADN. Elle se fixe sur le brin

modificat° de l ADN Pdt replicat° de l adn,des erreurs spontannees peuvent de produire--> reparées par un systme enzymatiq= endonuclease qui sont capables de verifier l adn et de reparer les erreurs: activite de ces system est indispensable au maintient d'un faible taux de mutat°--> de =/ types selon leur nature : substitut°: remplacmt d'1 paire de nucleotitde delet°:perte d 1 paire de nucleotide addit°: ajout d 1 paire de nucletides Mutat° aleatoires mais des facteurs de l environmt comme

peut modifier son activité enzymatique. On a donc une modification du phénotype en fonction de l'environnement. Le génotype d'un individu s'exprime donc en fonction de l'environnement. Problématique: Comment passer d’une séquence de nucléotide (ADN) à une séquence de protéine III La synthèse des protéines A-Passage de l’ADN à la protéine Un gène est une succession de nucléotide, 3 nucléotides formant un codon ou triplet. Chaque triplet correspond à un acide aminé, il existe 64

Légende des couleurs : EXON et INTRON Séquence du gène : TAC CGA GGG GAT TTT CCG ACG ATT AAG GCA CGC ATC AAA (brin transcrit) A disposition : 1 2 3 4 A B C Titre Exercice 3 : Exploitation de documents – Expérience d’hybridation entre ADN et ARN / 4 Des agents chimiques permettent de séparer les deux chaînes de l’ADN. Après cette dénaturation, les brins d’ADN peuvent s’hybrides, c’est-à-dire se réassocier avec d’autres molécules de séquence complémentaire. Une telle expérience d’hybridation

de protéinase K qui hydrolyse les membranes peptidiques. Cette lyse a donc pour but de casser les membranes cellulaire et nucléaire mais aussi de dénaturer les protéines. La deuxième étape consiste à faire une purification de cet ADN à l’aide premièrement du phénol-chloroforme qui permet l’élimination de tous les contaminants et deuxièmement de l’éthanol qui permet une précipitation de l’ADN et de solubiliser toutes les impuretés restantes. 2. Contrôle

Chapitre 3 : REPLICATION ET REPARATION DE L’ADN p20 l’expérience voir 2 eme partie de la page utilise ADN avec de l’azote lourd incorporer dans les bases et sera supérieur a celle des bactéries = tt ADN bactérien avec N lourd gradient à l’équilibre au fond du tube ADN dble brin on change les b de milieu on incorpore les bactérie dans un milieu avec N 14 léger comprenant des bases résultat au bout de 20 min (une génération c formé)= 1 type d’ADN hybride densité intermédiaire après 40 min

milieu. Rif r est le phénotype d’une souche mutante résistante à la Rif. La Rifampicicine est un antibiotique qui bloque la synthèse du RNA ; cette souche a subi une mutation au niveau du gène rpo B qui code la sous unité de la RNA polymérase et devient résistante à la Rif. La souche sauvage est Rif s. IV- Les différents types de mutation La mutation est tout changement héréditaire dans les séquences nucléotidiques du DNA. *Une paire de bases peut

Nature 411: 848-853.. BIOTECHNOLOGIES VEGETALES ET MICROBIENNES (BVM)- D. DIOUF- Maîtres de Conférences - 2009-2010 Vue d’ensemble de l’induction de l’inhibition de l’expression de gènes viraux Réplication de l’ARN viral RNAdépendent RNA polymérase Viral dsRNA ARN viral simple brin La plupart des virus de plantes sont des virus à ARN qui se répliquent via un intermediaire double brin L’ARN double brin est coupé par DCL pour produire des siRNA qui s’associent avec AGO pour inhiber