Castel Beer

8/Fonctionnement d’un spectrophotomètre L'absorbance sert à mesurer la capacité d'un milieu donné à absorber une lumière qui le traverse. Elle dépend essentiellement de la longueur d’onde de cette lumière. L'absorbance est donc mesurée expérimentalement à l'aide d'un spectrophotomètre. Un spectrophotomètre permet de mesurer la lumière absorbée par une solution à une certaine longueur d’onde donnée. Grâce à cela, on peut donc en déduire la concentration. C : Concentration Massique C= m/

émergente. Par définition : La transmission T = I / I0. Souvent exprimée en %, elle mesure la transmission de la solution. L'absorbance est A = - log T. Souvent appelée densité optique (d.o.), elle mesure l'absorption de la solution. b) Loi de Beer-Lambert A la longueur d’onde λ, l’absorbance Aλ est proportionnelle à l’épaisseur l (en cm) traversée et à la concentration c de la substance absorbante. Aλ = ε λ . l . c ε est le coefficient d’absorption molaire. Il dépend de λ et de la substance

Classe de TS TP de Chimie N° 3 ABSORBANCE ET CINETIQUE CHIMIQUE Objectifs : 1- Faire le suivi d'une réaction chimique par spectrophotométrie 2- Passer de l'absorbance d'une solution à la concentration d'une espèce (loi de Beer – Lambert) 3- Déterminer graphiquement la vitesse d'une réaction à partir de la courbe de l'absorbance en fonction du temps 4- Etudier l'influence de la concentration initiale des réactifs sur la vitesse d'une réaction 1. Solutions utilisées • Solution S1

Elaboration d’un nouvel outil pour suivre l’évolution d’une transformation chimique : le tableau d’avancement ou d’évolution d’un système chimique. Type d’activité : - Démarche scientifique Activité expérimentale Pré- requis : - Loi de Beer-Lambert Notions et contenus: Réaction chimique : réactif limitant, stœchiométrie, notion d’avancement.  Compétences spécifiques à cette activité : Identifier le réactif limitant, décrire quantitativement l’état final d’un système chimique

couleur. Exemple : permanganate de potassium : violet, il absorbe du bleu turquoise. Plus l’absorbance est grande plus il y a de soluté dans la solution. Logiciel sur ostra.net Chimie Spectrophotométrie C’est par la relation de la loi de Beer-Lambert [pic] Pour connaître la concentration molaire d’une espèce il suffit de faire une courbe d’étalonnage grâce aux absorbances de solution connue puis de tracer la courbe A=f(c) celle-ci étant une droite passant par l’origine, il ne reste

longueur d'onde à laquelle la CF absorbe. On remarque que notre composé CF absorbe à 492nm. A partir de ce spectre d'absorption, nous avons pu déterminer deux paramètres sui sont : - le coefficient d'extinction molaire : Epsilon grâce à la loi de beer-lambert : A=Epsilon.l.C où A = 0.073 ; l = 1cm et C = 1mM -le pic d'absorption. -> Mesure du spectre d'émission au spectrofluorimètre: Le paramètre accessible est le pic d'émission à 515 nm. Pour réaliser ce spectre nous avons excité la molécule

l’ensemble des longueurs d’onde comprises entre deux valeurs choisies par l’opérateur. Schéma : La loi que nous utiliserons afin de caractériser les relations entre les différents facteurs jouant dans l'absorption de la lumière est celle de Beer Lambert. Cette loi établit une proportionnalité entre la concentration d'une entité chimique en solution, l'absorbance de celle-ci et la longueur du trajet parcouru par la lumière dans la solution. VALIDITE DE LA LOI Seulement cette loi entraine

Vitesse initiale ∆Do /min (fig2) V de [PNP] apparu par min • Calcul du coefficient d’extinction molaire : Grace à la gamme étalon (fig1-a) on va calculer le coefficient d’extinction molaire ε qui correspond à la pente de la courbe .D’après la loi de Beer-Lambert : A=ε. L .C D’où ∆A= ε.l.∆C donc ∆A/∆C x l= ε ε=0,01632µM-1.cm-1. On a pour A=0,104 une concentration de PNP de 6,25 µM et pour A=0,206 la concentration en

des données de pourcentage de transmettance émis par le spectrophotomètre, les équations T=IIO et T%=IIo×100 % et A=-logT ont été servites pour produire l’équation d’absorbance : A=-logT%100 % Alors, puisque l’équation donnée par la loi de Beer-Lambert (A=εbc) a fait qu’avec cette expérience ε (le coefficient spécifique d’absorbance molaire) et b (le diamètre de la cuvette) demeure constant, l’absorbance est directement proportionnelle à la concentration. Alors, pour cette expérience, l’absorbance

une coloration jaune, il est possible, en mesurant l'intensité de la coloration, de suivre l'apparition d'ONP. 2* Principe du dosage Pour mesurer la quantité d'ONP formé on mesure la densité optique du mélange réactionnel. Selon la loi de Beer-Lambert: D.O. = ε C l où: ε - est le coefficient d'extinction molaire C - concentration du ONP formé l - la longueur de la cuve (l=1cm) Il suffit donc de suivre l'évolution de la D.O. (à 420 nm) pour pouvoir déterminer la quantité de