Chromatographie Sur Colonne

Première partie : notion de Chromatographie Définition La chromatographie est une technique physique de séparation d'espèces chimiques. L'échantillon contenant une ou plusieurs espèces est entraîné par un courant de phase mobile (liquide, gaz ou fluide supercritique) le long d'une phase stationnaire (papier, gélatine, silice, polymère, silice greffée etc.) ; chaque espèce se déplace à une vitesse propre dépendant de ses caractéristiques et de celles des deux phases. Cette technique d'analyse chimique

HPLC I. Introduction aux méthodes chromatographiques a) Définition : La chromatographie est une méthode d’analyse qui est couramment utilisée pour la séparation, l’identification et le dosage des constituants chimiques dans des mélanges complexes. Il n’existe aucune autre méthode qui soit aussi puissante et d’application aussi générale. b) Principe : La chromatographie est une technique dans laquelle les constituants d’un mélange se séparent en fonction des vitesses

140.58 °C - toluène : 110.58 °C Ce sont donc des composés volatils pour lesquels on pourra utiliser une chromatographie en phase gazeuse (C.P.G ou C.P.V) afin d’analyser notre échantillon. De plus on préfère la CPV à une chromatographie en phase liquide car l’analyse est plus rapide, quantitative et nécessite moins de produit. II. Principe de la CPV La chromatographie en phase gazeuse sert à l’analyse des molécules organiques. Cette méthode chromatographique permet de séparer

La chromatographie permet la séparation ou la purification d’un ou de plusieurs composés d’un mélange en vue de leur identification et de leur quantification. La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n’étaient auparavant pas possible avec les techniques sur couche mince ou en phase gazeuse. A l’origine la chromatographie en phase liquide se faisait sur des colonnes en verre. Le liquide traversait la phase stationnaire par gravité ou sous faible pression. Puis

SOMMAIRE INTRODUCTION I- séparation des lipides par CCM………………………………………. 1- But ………………………………………………………………….. 2- Principe…………………………………………………………….. 3- Mode opératoire……………………………………………………. 4- Résultats et interprétations………………………………………… Chromatographie en phase gazeuse(CPG) ………………………….. 1- But…………………………………………………………………. 2- Principe……………………………………………………………. 3- Analyse qualitative………………………………………………… a- Principe………………………………………………………… b- Mode opératoire………………………………………………... c- Résultats et interprétations……………………………………

baryum, dialyse et chromatographie échangeuse d'ions. Au cours de ce TP, nous avons pu réalisé que 2 de ces étapes: la précipitation et la chromatographie car l'étape de dialyse prend trop de temps. Durant la 1° étape, nous avons utilisé une méthode de précipitation au chlorure de baryum (BaCl2), ce qui nous a permis d’isoler de la prothrombine à partir de plasma sanguin. La dernière étape de purification de la prothrombine est une chromatographie échangeuse d’ions sur une colonne de diéthyl-amino-éthyl

Section 2 item 5 CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE - HPLC Introduction 1 Appareillage 1.1 Réservoir de PM 1.2 Pompe 1.3 Dispositif d’injection 1.4 Les colonnes 1.5 La phase stationnaire 1.6 Les détecteurs 1/Spectrophotométrique +++ 2/Fluorimétrique 3/Réfractometre 4/Condutimètre 5/Electrochimique 6/SM 2 Différents types de chromatographie liquide 2.1 Chromatographie d’adsorption (S/L) 2.2 Chromatographie de partage (L/L) +++ En phase normale En phase inversée 2.3 Chromatographie par échanges d’ion

Généralités Classification selon la nature des phases : – Chromatographie en phase gazeuse : φ mobile gazeuse - φ stationnaire liquide : chromato gaz / liquide - φ stationnaire solide : chromato gaz / solide – Chromatographie en phase liquide : φ mobile liquide - φ stationnaire liquide : chromato liquide / liquide – φ stationnaire solide : chromato liquide / solide Temps mort, temps de rétention : T0 : temps mort : temps entre l'injecteur et le détecteur TR : temps de rétention : caractéristique

DUT 1 Semestre 2 Sommaire Introduction p.1 I / Principe de la séparation p.1 1) Méthodes p.1 a – Préparation de l’extrait brut b- Chromatographie d’affinité et d’exclusion 2) Résultats et discussion p.5 a – Chromatographie d’affinité b- Chromatographie d’exclusion II / Etude des fractions purifiées p.7 1) Méthodes p.7 2) Résultats et discussion p.8 a – Détermination des concentrations en protéines b-

suspension de Sargenor par chromatographie sur colonne échangeuse d’ions.Cette chromatographie est basée sur un processus d’échanges d’ions : les ions liés électrostatiquement à un supporte insoluble (ici la résine Amberlite IR120) sont remplacés de manière réversible par des ions en solution (éluant : ici Solution 1 à pH 3.3 ou Solution 2 à pH 12).Dans un second temps, d’analyser les différents solvants récupérés dans les tubes à essai grâce à des CCM ( chromatographie sur couche mince ) afin de