Chromatographie Sur Colonne

Lactate déshydrogénase : purification partielle par chromatographie d'affinité La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme présente dans une grande diversité d'organismes, aussi bien végétaux qu'animaux. Elle catalyse la conversion réciproque de la pyruvate et de la lactate accompagnée de la conversion concomitante du NADH en NAD+ (et inversement). Ce tétramère est composé de 4 sous unité (isoenzyme) différents de par leurs constance cinétiques et leurs pH isoélectriques. Le but de ce TP

CHROMATOGRAPHIQUES : 1. La chromatographie en phase liquide (CPL) La chromatographie sur couche mince (CGM) La chromatographie sur papier La chromatographie sur colonne (HPLC) a) La chromatographie d’absorption en phase normale b) La chromatographie de partage : La chromatographie de partage en phase normale. La chromatographie de partage en phase inverse. c) La chromatographie par échange des ions. d) La chromatographie par exclusion stérique ou filtration sur gel 2. La chromatographie en phase gazeuse

séparer deux acides aminés constitutifs d’un peptide : l’alanine et l’arginine par une hydrolyse puis par chromatographie sur échangeuse d’ions, puis d’effectuer le dosage de l’alanine et la mise en évidence de l’arginine. 2. PRINCIPES Nous réaliserons pour commencer le TP, l’élution de l’alanine afin de pouvoir la doser. La chromatographie échangeuse d’ions est un type de chromatographie en phase liquide permettant d’isoler une substance chargée électriquement d’un mélange de molécules chargée

sont des méthodes bien plus variées et plus complexes qui font la loi dans les laboratoires. Le R. les décrit de façon systématique et simple, mais précise. Que ce soit pour les méthodes de séparation comme, bien sûr, toutes les variantes des chromatographies, ou pour les méthodes d’identification structurale on y trouvera une introduction bien équilibrée. Livre d’enseignement, le R. l’est dans la mesure où un chimiste qui en connaîtrait tout le contenu (et aurait reçu une initiation pratique, bien

d’un extrait cellulaire de tissu bovin foetal au moyen d’une chromatographie d’affinité sur bleu Cibacron. (le bleu Cibacron a une structure proche du NAD⁺ qui est un cofacteur de la réaction impliquant la LDH d'où son utilisation) Principe de la chromatographie d’affinité : Il existe différents types de chromatographie liquide (d'exclusion, d'affinité, échangeuse d'ions et hydrophobe). Nous avons utilisé la chromatographie d’affinité car c’est la plus sélective puisqu’il y a complémentarité

Analytique U.V. ANA 1 CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE MISE AU POINT D'UN SYSTEME CHROMATOGRAPHIQUE Le travail proposé a pour but la mise au point d'un système chromatographique permettant l'étude de la pureté d'échantillons de cyclohexane de différentes provenances, pouvant contenir du benzène. On cherchera donc à optimiser les conditions de la séparation benzène - cyclohexane. ?) PRINCIPE THEORIQUE Schéma d’un chromatographe en phase gazeuse . La chromatographie en phase gazeuse est

technique de chromatographie : 1)Définition : Question aux élèves : Étymologie du mot ? D’après vous pourquoi ce mot ? A l’origine, cette technique servait à séparer des substances colorées. La chromatographie est une technique très complète puisque elle permet de séparer et d’identifier les constituants d’un mélange. C’est une méthode physique. 2)Remarque : Il existe différents types de chromatographie, on utilisera cette année uniquement la technique de chromatographie sur couche

EXTRACTION DE L'ALBUMINE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITE BUT Le but de ce tp est de séparer une protéine précise, l’albumine d’un mélange de protéines par chromatographie d’affinité. PRINCIPES Purification de l'abumine par chromatographie d'adsorption : Les chromatographies d'adsorption sont des méthodes de séparation où la molécule d'intérêt d'un mélange complexe (albumine dans notre cas) est isolée des autres constituants parce qu'elle se lie spécifiquement à la résine ou matrice

Principe 6 b) Pesée 6 c) Solubilisation des protéines dans le SDS 6 d) Solubilisation des protéines insolubles dans le tampon 7 f) Evaporation du chloroforme 8 g) Récupération des oxylipides pour l’analyse 8 3.4 Méthode d’analyse 8 a) La chromatographie en phase liquide à haute performance(CLHP) 8 b) Mise en œuvre 11 4 Effet de l’ajout de glucose, GOX et acide férulique 12 4.1 Les formulations des pâtes 12 4.2 Résultats 13 4.2.1 Oxylipides totaux 13 4.2.2 ROH 14 4.2.3 Acide linoléique

La première étape consiste à séparer la prothrombine du plasma. Cette dernière s’entoure d’ions baryum au détriment des molécules d’eau et devient insoluble. Il s’agit de la précipitation au BaCl2. La deuxième étape est une chromatographie échangeuse d’ions sur une colonne Diéthyl-amino-ethyl(DEAE)-Sephadex A-50 chargée positivement avec une élution de la prothrombine grâce un gradient de NaCl. Un test enzymatique nous permettra de suivre spécifiquement cette activité. II. Introduction La prothrombine