Endonucléase

CAVALLI SFORZA, « Synthetic gene frequency maps of man and selective effects of climate ». M. J. Johnson, D.C. WALLACE, S. D. FERRIS, M. C. RALTAZZI and L. L. CAVALLI SFORZA, « Radiations of human mitochondria DNA types analysed by Restruction Endonuclease Cleavage Patterns ». La Recherche n° 148, octobre 1983. G. BEAUJOUAN, La Science antique et médiévale, PUF, 1957. Dictionnaire archéologique des techniques, Éditions de l'accueil, 1963, Tomes I et II. Jean GIMPEL, La Révolution industrielle au

potentiel hydrogène PPI pour préparation injectable p/v poids par volume PVP polyvinylpyrrolidine Pb Qsp RAPD quantité suffisante pour ramdom amplified polymorphic DNA (Polymorphisme de l’ADN amplifié aléatoirement) REA restriction endonucleases analysis (analyse des restrictions endonucléasiques) RFLP restriction fragment length polymorphism (polymorphisme de la longueur des fragments de restriction) RNase ribonucléase rpm révolution par minute rpoB sous-unité Bêta de l’ARN polymérase

encombrants à l’ADN résultant de la fixation covalente d’un génotoxique électrophile sur un site nucléophile d’une base de l’ADN. L’ADN est extrait puis purifié avant d’être totalement hydrolysé en nucléotides simples par l’action de deux enzymes, une endonucléase et une exonucléase. Le milieu réactionnel contient alors un mélange de nucléotides normaux (en très grand nombre) et modifiés (les adduits, peu abondants). L’étape d’enrichissement réalisée par action de la nucléase P1 va permettre de cibler le

enzymes qui catalysent ces réactions et le transcrit lui-même sont étroitement associés au domaine C-terminal de Pol II par l’intermédiaire d’un complexe dénommé CBP (de cap-binding complex). Les coiffes protègent les mRNA des phosphatases et des endonucléases et stimulent leur traduction. Figure 19.4 (A) Début de la transcription et formation de la coiffe Pol II Coiffe 5' Transcrit primaire Exon Intron Séquence terminale non codante 3' AAA(A) n Fin de la transcription, Épissage

enzymes qui catalysent ces réactions et le transcrit lui-même sont étroitement associés au domaine C-terminal de Pol II par l’intermédiaire d’un complexe dénommé CBP (de cap-binding complex). Les coiffes protègent les mRNA des phosphatases et des endonucléases et stimulent leur traduction. Figure 19.4 (A) Pol II Début de la transcription et formation de la coiffe Coiffe 5' Exon Intron Fin de la transcription, Transcrit primaire Épissage, clivage, polyadénylation mRNA 5' Séquence terminale non

protection. Elles permettent également d’évacuer les protéines endommagées (Bearson et al., 1997). Pour lutter contre le phénomène de dégradation de l’ADN, les bactéries vont augmenter la production des enzymes ou des systèmes de réparations comme les endonucléases, et de protection , comme les méthyltransférases (Cotter et Hill, 2003) Si dans le cas d’un stress alcalin le catabolisme des sucres peut aider à abaisser le pHint, dans le cas d’un stress acide la décarboxylation des acides aminés permet de diminuer

18:1752–1762 Burwinkel B, Kilimann MW (1998) Unequal homologous recombination between LINE-1 elements as a mutational mechanism in human genetic disease. J Mol Biol 277:513–517 Chen JM, Stenson PD, Cooper DN, Ferec C (2005) A systematic analysis of LINE-1 endonuclease-dependent retranspositional events causing human genetic disease. Hum Genet 117:411–427 De S, Teichmann SA, Babu MM (2009) The impact of genomic neighborhood on the evolution of human and chimpanzee transcriptome. Genome Res 19:785–794 Deininger

plasmides conférant, par transformation, le phénotype [trp+ ; arg+] à la souche arg1-1 sont étudiés in vitro; les 4 inserts présentent des cartes de restriction se recouvrant en partie (fig. 10.3). a. Qu’en concluez-vous ? b. Par digestion avec des endonucléases, on isole les sous-fragments o, p, q et r, tels qu’indiqués ci-dessus. Ces fragments sont clonés dans un plasmide réplicatif multicopie porteur de l’allèle sauvage trp1+ de TRP1. On transforme, avec chacun de ces plasmides, la souche (arg1-1;

révolution agricole du néolithique, la biotechnologie moderne commence avec la découverte en 1953 de la structure de l’ADN en tant que support matériel du code génétique. La seconde découverte fondamentale a été celle d’une famille d’enzymes dites endonucléases de restriction, qui peuvent reconnaître certaines séquences d’ADN et les cliver au point voulu, d’où la possibilité de reproduire à volonté un fragment d’ADN donné. Une autre technique a permis de séparer les différents segments d’ADN en groupes

cytosine ou des méthylations de l’ADN. Ce processus met en jeu des ADN glycosylases qui clivent la liaison N glycosidique unissant le désoxyribose et la base endommagée (figure 2). Ceci crée un site AP (apurique ou apyrimidique), reconnu par une AP-endonucléase. Cette dernière coupe la liaison phosphodiester du côté 5’ de la lésion. Il s’ensuit l’excision du désoxyribose phosphate et de quelques nucléotides adjacents et la synthèse du fragment manquant. 104 Figure 2 Étapes du processus de réparation