Géloses

Mise en culture : - Milieu de culture gélosé en boite de Pétri auquel on ajoute quelques gouttes d’une suspension d’entérobactéries : Eschericha coli (les amibes étant bactériovores, E. coli est utilisée comme nutriment) - Ensemencer le culot de centrifugation du LCR. - Incuber à 37 ° C. - Première lecture à 48 heures puis tous les 4 jours pendant 3 semaines. - Lire directement en plaçant la gélose sous le microscope ou en prélevant à la surface de la gélose.  Résultats :  Naegleria : On retrouve

contenu des tubes est étalé sur des géloses recouvertes de bactériophages : 50 échantillons égaux sont prélevés du flacon et étalés séparément ; le contenu de chacun des 50 petits tubes est aussi étalé séparement. On observe les faits suivants : le nombre de colonies bactériennes résistant aux bactériophages est à peu près le même, entre 3 et 7 colonies résistantes, sur chacune des cinquante géloses ensemencées à partir du flacon. En evanche, parmi les géloses ensemencées à partir des 50 petits tubes

été observée sur les boites de gélose Palcam ensemencées par des échantillons de produits pâtisserie et de produits charcuterie. Produits Alimentaires Nombre des colonies comptés Dénombrem ent de Listeria monocytoge Produits de pâtisseries Produits de charcuterie C1 = 0 C2 = 0 C1 = 0 C2 = 0 a1 = 0 <1/d1*V <1/10-1*0,1 <1/10-2 UFC/g Résultats et Discussion 80% des échantillons de lait en poudre analysés sont contaminés Colonie typiques de Listeria spp sur gélose Oxford Résultats et Discussion

est effectué et une souche bactérienne pathogène A identifiée.Cette souche est ensemencée sur un milieu nutritif gélosé d’une boîte de Petri. Afin d’évaluer l’efficacité de différents antibiotiques sur la souche bactérienne, un antibiogramme est réalisé : des pastilles imprégnées de différents antibiotiques sont déposées à la surface de la gélose. Ces antibiotiques diffusent dans la gélose et tuent ou empêchent de se multiplier les bactéries qui y sont sensibles.Ceci se traduit par l’apparition d’une

être visualisée par la réaction au Lugol 2. Matériel et réactifs - Graines de maïs imbibées depuis quelques heures ou mis à germer - Gélose ou agar-agar et amidon soluble - Lugol dilué (1/10) - Boîtes de Pétri - Solution d’amylase - Bain-marie 3. Protocole expérimental - Préparer une solution contenant 1g de gélose, 1 g d’amidon soluble et 100 ml d’eau - Chauffer au bain-marie bouillant, en remuant avec un agitateur, jusqu’à ce que la solution devienne limpide

plasmide et purification de l’ADN plasmide Matériaux : 1 aliquot de 15µL d’ADN plasmide stérile (pGFP-actin à 12ng/µL) 200mL de milieu LB stérile à température ambiante (dans un erlenmeyer couvert de papier d’aluminium) 3 pétris gélose LB-ampicilline (50µg/mL) 1 pétri gélose LB 50mL de CaCl2 à 100mM, 4°C Solution saturée de bactéries DH5alpha préparée d’avance par l’instructeur Tampons P1, P2, N3, PB, PE Tampon d’élution TE (10mM Tris – 1mM EDTA) ddH2O Éthanol Culture de bactéries transformées

problèmes à résoudre. Sur le protocole n°1, nous avons pu observer qu’il y avait des Antibiotiques Antagonistes : le ciprofloxacine, l’acide nalidixique et la gentamycine donnaient des halos plus importants lorsqu’ils étaient déposés côte à côte dans la gélose. Nous avons fait le choix de ne pas le préciser lors de la manipulation en classe entière, car nous voulions que les élèves le découvrent par eux-mêmes. Sur le protocole n°2, nous avons eu quelques soucis avec la méthode en milieu liquide. En effet

des bactéries et des champignons viables sur une gélose nutritive sont celles qui offrent les meilleures chances d’identifier les espèces présentes; ce sont elles, dès lors, qui sont le plus souvent utilisées. Le milieu gélosé est mis en incubation jusqu’à ce que les colonies se développent à partir des bioparticules piégées et qu’elles puissent être identifiées et comptées, ou repiquées sur d’autres milieux pour examen ultérieur. Les milieux gélosés nécessaires aux bactéries diffèrent de ceux des

par la bactérie pour dégrader le glucose. Le métabolisme fermentaire engendre la formation d’acides ou d’alcool alors que le métabolisme oxydatif n’en produit pas. L’épreuve de HUGH et LEIFSON permet de déterminer la voie empruntée en utilisant des géloses molles, faiblement peptonnées et présentées en culot (M.E.V.AG.).  Technique : - 2 tubes de milieu sont régénérés par chauffage aux bains-marie puis additionnés de glucose puis solidifiés. - L’ensemencement se fait par piqûre centrale : Un tube est

chimique d’urines Multistix® 10 SG Appareil de lecture « Clinitek 50 de Bayer » Lames porte objet et lamelles couvre objet Tubes à centrifuger coniques de 15 ml Centrifugeuse « Beckman Coulter Allegra X-12R» Incubateurs à 37°C Oese Bec Bunsen Milieu gélosé : Cystine Lactose Electrolyte Déficient (CLED)[2] (préparé au laboratoire) Milieu chromogène : Chromagar Bordet-Gengou Sélénite (CPS3)[3] (Biomérieux) Disques : antibiotiques, oxydase, Orthonitrophényl-β-D-galactopyrannoside (ONPG)[4] Galeries API