Géloses

donc dans la flore de Veillon, côté gram négatif. Morphologiquement, ce que j’ai pu observer au microscope se rapproche plus des Fusobacterium ou des Bactéroïdes. II- Ensemencement de la galerie Type respiratoire Principe : On ensemence de la gélose en vrille afin d’observer à quel niveau le germe se développe et d’en déduire son type respiratoire. Si le tube est trouble, il y a multiplication bactérienne. S’il y a multiplication uniquement en surface (jusqu’à un centimètre de profondeur), le

les peptones, ce qui conduit à une alcalinisation du milieu.                   ü Dans le culot :   L'utilisation de la source de carbone est anaérobie. Les principaux acides organiques produits sont non volatils : ils restent enfermés dans la gélose.   - Les bactéries glucose - laissent le milieu alcalin en utilisant les peptones. Ces bactéries sont en général aérobies strictes, et leur culture sera normalement nulle dans le culot. - Les bactéries glucose + et lactose + acidifient le milieu

ensemencement Porteoirs Poires pour aspirer les solutions Milieux de culture : a- Solides : CPS : pour la culture et l'isolement des germes urinaires (ex : E.coli) Sabouraud+chloramphénicol : isolement sélectif des levures et moisissures Gélose Salmonella Shigella SS : isolement sélectif des Salmonelles et des Shigelles á partir des selles (mise en évidence des colonies lac et H2S -/+) Hektoen : isolement des Entérobactéries pathogènes Chapman : mise en évidence des colonies mannitol+

VMA Escherichia coli 0/100 ml Entérocoques intestinaux 0/100 ml Coliformes 0/100 ml Micro-organismes revivifiables à 22°c et 37°C. 20/1ml à 37°C 100/1ml à 22°C 20 Méthode Filtration sur membrane. Incubation à (44±0,5)°C/ 48h. Mis dans une gélose TSA et incubé à (36±2)°C/21h. Ensemencer sur eau peptonnée exempte d’indole, incubé à (44±0,5)°C/21±3h. Ajouter 0,2 à 0,3 ml du réactif de Kovacs dans les tubes d’eau peptonnée. L’apparition d’une coloration rouge à la surface de l’eau peptonnée confirme

courtes ou petits amas. B - CULTURE Les bactéries cultivent facilement sur milieux ordinaires entre 4°C et 45°C (optimum 30-37°C) et donnent des colonies 1-2mm, smooth, transparentes, à bords réguliers, transparentes, irisées, ß-hémolytiques sur gélose au sang (cheval 5%). Ces colonies sont catalase + et produisent une lécithinase. C'est une bactérie aéro-anaérobie, fermentant le glucose et l'esculine sans gaz. Les caractères fermentaires des sucres permettent de distinguer les espèces du genre

STIMULUS PEUT FRANCHIR L’AGAR MAIS NON LA LAME DE MICA . ENSUITE : LAME DE MICA COURBURE PAS DECOURBURE FEFER N’EN TIRE AUCUNE CONCLUSION DE CES EXPERIENCES . WENT EN 1928 ; EN REPRENANT CES EXPERIENCES A PU MONTRE : COUPE LE SOMMET & BLOC DE GELOSE ON OBTIENT UNE COURBOURE QUI EST U ALLONGEMENT DU COLEOPTILE DÛ A UN CROISSANCE INEGALE ENTRE LES DEUX MOITIES DU COLEOPTILE . EN CONCLUSION WENT ET SELON L’EXPERIENCE DE FEFER ENSE QUE LA SUBSTANCE RESPONSABLE DU PHENOMENE CIRCULE DANS LA MOITIE

bactériologie alimentaire : Haute spécificité Haute sensibilité Quantification des résultats Bref délai de réalisation Automatisation Faible cout Idéalisation, aujourd’hui rien ne répond à tous les critères. a) Les premières méthodes Dénombrement sur milieux gélosés puis identification Utilisation de milieux sélectifs, de milieu chromogéniques Techniques les plus fiables et considérées comme méthodes de référence Toutes nouvelles méthodes font être comparées à ces méthodes de référence : coefficient de corrélation

2,0 g L-tryptophane 0,3 g éthanol à 0,95 1 ml rouge de phénol 2,5 mg chlorure de sodium 0,5 g dihydrogénophosphate de potassium 0,1 g hydrogénophosphate de potassium 0,1 g Parmi les milieux empiriques, l’un des plus courants est la gélose TCS (trypto caséine soja), dont la composition permet la croissance des micro-organismes peu exigeants : peptone trypsique de caséine 15,0 g peptone papaïnique de soja 5,0 g chlorure de sodium 5,0 g agar 15,0 g Les peptones sont des protéines

mais aussi leur type de paroi, gram + pour les bactéries violettes et gram - pour les roses. Cette première identification permet déjà d’éliminer un grand nombre de possibilités. J’ai également pu me perfectionner dans les isolements sur gélose. On m’a d’abord donné quelques boites pour m’entraîner. Le but est qu’après avoir prélevé avec une oese stérile le prélèvement primaire, il faut l’isoler sur la boîte en faisant des stries les plus serrées possible afin d’obtenir après incubation

mesure de 0.01 unité de pH Protocole de la réalisation des analyses microbiologiques des denrées alimentaires : Dénombrement des coliformes thermo tolérants par comptage des colonies obtenues à 44°C : Ensemencement en profondeur du milieu gélosé à la bile, au cristal violet, au rouge neutre et au lactose(VRBL), coulé dans une boite de pétri avec une quantité déterminée de l’échantillon pour essai si le produit à examiner est liquide, ou avec une quantité déterminée de la suspension-mère dans