Méthode De Dosage Des Proteines

Support élévateur Les tests d’identification à connaître Espèce chimique à identifier Ion fer II Fe2+ Ion fer III Fe3+ Ion cuivre II Cu2+ Élément cuivre Cu Ion aluminium Al3+ Ion zinc Zn2+ Ion calcium Ca2+ Ion chlorure ClÉlément sodium Na Eau H2O Protéines Glucose C6H12O6 Amidon Test On ajoute de la soude Na+ + HOOn ajoute de la soude Na+ + HOOn ajoute de la soude Na+ + HOTest à la flamme On ajoute de la soude Na+ + HOOn ajoute de la soude Na+ + HOOn ajoute de l’oxalate d’ammonium On ajoute du nitrate

-analyse du vin les analyses visent a donner des renseignements sur les caractéristiques du vin et de son évolution au court de son élaboration. Les dosages les plus fréquents : sont les dosages des sucres par réfractométrie, le dosage de l’acidité de l’azote total et le dosage qui concerne les mesures colorimétrique. Dans les labo les dosages sont réalisé de manière chromatogratique HPLC (haute pression) CPG (phase gazeuse). Ils sont également réalisé de manière enzymatique ou des techniques

LYSOZYME BUT Le but de ce travail pratique est de qualifier et de quantifier la protéine majoritaire dans le blanc d'œuf : le lysozyme. Pour cela, il est tout d'abord nécessaire de la purifier à l'aide d'une chromatographie échangeuse d'ions. Ainsi, on pourra mesurer l'activité enzymatique et doser les protéines présentes. PRINCIPE Chromatographie échangeuse d'ions La chromatographie est une méthode d'analyse physico-chimique de séparation. Les constituants d'un mélange se séparent

I/ Introduction : Le lysozyme est une protéine globulaire de 129 AA. C'est une hydrolase acide secrétée par les granulocytes et les monocytes, appartenant à la famille des O-glycosyl hydrolases. Il est retrouvé chez les mammifères dans différentes secrétions (urine, salive, larme, lait), dans le sérum et dans le blanc d’œuf où il permet la nutrition du poussin en développement. Le lysozyme détruit la paroi bactérienne en catalysant l'hydrolyse des peptidoglycanes de cette dernière et constitue

problématique à l’origine du PROJET développé pendant le stage. Expliquer quelle démarche scientifique va être appliquée de manière générale Exemple : purifier la protéine enzymatique X extraite de l’organisme Y, qui est prometteuse pour le procédé Z qui intéresse l’entreprise E dans le but B … Dans ce but, on utilisera les méthodes de purifcation M1, M2, etc. • Présentation du terrain de stage : - Nommer l’entreprise, la situer géographiquement. - Présenter ses activités générales et

lactose et former de l’acide lactique qui acidifie le lait. A force de manipuler nos deux flacons de lait, les laits ont été en contact avec des bactéries. 6- la caséine : Pour les deux laits la caséine est dans les normes. La caséine est une protéine. Celle-ci est composée de différents fragments dans le lait: α1, α2, β, γ et K. La dernière (K signifiant kappa) permet au lait de rester homogène et non pas décanté. Elle est riche en acides aminés et en phosphore. On l'appelle un composant azoté

- 5 - RESULTATS ANALYTIQUES OBTENUS - 6 - 1. Détermination du pH : méthode potentiométrique - 6 - Principe analytique - 6 - Résultats - 6 - Validation - 6 - 2. Détermination de la teneur en matière grasse : méthode acido-butyrométrique de Van Gulick - 7 - Principe analytique - 7 - Résultats - 7 - Répétabilité - 7 - Validation - 7 - 3. Détermination de la teneur en matière sèche : méthode par étuvage (méthode de référence) - 8 - Principe analytique - 8 - Résultats - 8 - Répétabilité

Hill sera déterminée par la réduction de l'accepteur artificiel d'électrons 2,6-dichlorophénolindophénol (DCPIP), qui est bleu sous sa forme oxydée et incolore sous sa forme réduite : DCPIP oxydé (bleu) DCPIP réduit (incolore) MÉTHODE A- Extraction des chloroplastes Il est important que toutes les opérations soient effectuées à 0-4C avec un minimum d'exposition à la lumière (utiliser une ampoule verte). Pour 4 équipes, pesez 40 g de feuilles d’épinard propres et fraîches

procéder par différents procédés tels que : L’extraction, la purification, la mesure de l’activité enzymatique par spectrophotométrie, des électrophorèses et pour finir des dosages de protéines. L’extraction et la purification : vont nous permettre d’obtenir une enzyme lavée de toutes les molécules « parasites » (comme les protéines ou les inhibiteurs). La mesure de l’activité par spectrophotométrie : va nous permettre d’identifier l’enzyme dans les différents tubes et nous permettre de voir son activité

l'insulite n'est pas accessible à l'analyse. Ce sont : - les auto-anticorps anti-îlots de Langerhans = ICA (Islet cell antibodies) ; - les auto-anticorps anti-acide glutamique décarboxylase = anti-GAD ; - les auto-anticorps anti-insulinoma associated protein 2 = anti-IA2 ou ICA 512 et anticorps anti-phogrine ; - les auto-anticorps anti-insuline. - ICA Ils sont recherchés par immunofluorescence indirecte (IFI) sur coupe à congélation de pancréas de primate. Leur sensibilité au début de l'affection est