Séphadex

(Mars 1994) et intitulé:" Dosage du magnésium dans un médicament" 5. Exemple de chromatographie d'exclusion: Bibliographie: Journal of Chemical Education Décembre 92 p 993 et 994 Préparation du gel Sephadex: Le Sephadex est un gel fait à partir de polyosides bactériens: les dextrans. Les Sephadex présentent une grande affinité pour l'eau, ils s'hydratent fortement, fixant jusqu'à dix fois leur masse d'eau, et gonflent jusqu'à former un réseau dont le nombre et les dimensions des mailles sont déterminés

(Mars 1994) et intitulé:" Dosage du magnésium dans un médicament" 5. Exemple de chromatographie d'exclusion: Bibliographie: Journal of Chemical Education Décembre 92 p 993 et 994 Préparation du gel Sephadex: Le Sephadex est un gel fait à partir de polyosides bactériens: les dextrans. Les Sephadex présentent une grande affinité pour l'eau, ils s'hydratent fortement, fixant jusqu'à dix fois leur masse d'eau, et gonflent jusqu'à former un réseau dont le nombre et les dimensions des mailles sont déterminés

risques d’encéphalopathie en cas d’ictère : (bilirubine non conjuguée soluble dans lipides passage BHE fixation dans le cerveau lésions De masse moléculaire bilirubine/complexe bilirubine-albumine * Séparation par chromatographie sur gel de Séphadex sur colonne * Bilirubine ensuite dosée par diazoréaction dans les fractions Méthodes enzymatiques Bilirubine + ½ O2 (par bilirubine oxydase) biliverdine + H20 Mesure de la bilirubine par la de longueur d’onde entre 467nm et 550nm (pics

permet de recueillir un surnageant de couleur brune (5 s, tabl. 1) dont on détermine la concentration en protéine et l’activité. Séparation entre Acy 1 et Acy 2 La fraction 5 s est passée sur une colonne (40 X 5 cm) de Sephadex G-200 pH 7,4 dans un chromatograpbe à colonne K 50/60 (Pharmacia (G.B.) Ltd, London, W.5, U.K.). On élue à un débit de 30 ml/h avec un gradient de MgCl, entre 20 et 90 mM. Une bande brune (6 s tabl. 1) est éluée avec MgClz, 50 mM; elle

centrifugation une partie du surnageant sera prélevé ( S1 , S2) et le culot sera resuspendu dans une solution saline avant d'être réprécipité à nouveau ( C1 , C2 ). '' chromatographie échangeuse d'ions : cette étape consiste à fixer sur une colonne DEAE-Sephadex échangeuse d'ion les protéines; en effet cette colonne comprend des groupements diéthylaminoéthyl (DEAE) chargés positivement qui vont retenir les protéines quant à elles chargées négativement. Il va ensuite falloir laver la colonne grâce à un tampon

plasma. Cette dernière s’entoure d’ions baryum au détriment des molécules d’eau et devient insoluble. Il s’agit de la précipitation au BaCl2. La deuxième étape est une chromatographie échangeuse d’ions sur une colonne Diéthyl-amino-ethyl(DEAE)-Sephadex A-50 chargée positivement avec une élution de la prothrombine grâce un gradient de NaCl. Un test enzymatique nous permettra de suivre spécifiquement cette activité. II. Introduction La prothrombine est une chaîne polypeptidique précurseur de

Cristallisation de l'uréase.  Détermination de la nature protéique des enzymes Enzymologie 2010/2011 Pr Mohammed Bekkali Université Hassan II Casablanca 1930 Environ 80 enzymes sont isolées 1947 Début des techniques de filtration sur gel de Sephadex et électrophorèse. Et donc plus de 200 enzymes isolées. 1968 Plus de 1300 enzymes isolées. 1980 Grâce à la Chromatographie d'affinité, plus de 2000 enzymes purifiées. De nos jours , environ 3500 enzymes purifiées. Enzymologie 2010/2011

Fruits - vol. 34, n°7-8, 1979 -479 Extraction, dosage et stabilisation des caroténoïdes d'agrumes. Les caroténo ïdes d'agrumes, pigments jaunes et rouges, se rencontrenl dans la partie externe du péricarpe des fruits, le ftavedo, et dans la pulpe. Ils sont d .issous dans les globules lipidiques qui remplissent les chromoplastes, organites de la cellule végétale dérivés des chloroplastes. GROSS et al (29) ont répertorié 110 caroténoïdes dans les Citrus. La composition qualitative de ces

chromatographie d’exclusion qui s’appel aussi t’amisable moléculaire il s’agit d’une technique de chromatographie qui permet la séparation des molécules en fonction de leurs taille et forme la phase fixe est constitué des granules gels poreux par exemple sephadex le diamètre des pores étant une caractéristique. Les solutés sont élever dans l’ordre inverse des masse moléculaire il existe une relation entre le volume délutions et le log : log(MM) = F (ve) la chromatographie d’exclusion moléculaire est très

par filtration sur gel La fraction radioactive est déposée sur une colonne de chromatographie par filtration sur gel de Sephadex G100 et éluée par un tampon phosphate 20 mM, pH 7, NaCl 150 mM. Nous rapportons le profil d’élution sur le schéma ci-dessous (D.O = densité optique à 280 nm ; R.A. = radioactivité; dps = désintégration par seconde ou becquerel). La colonne de Sephadex G100 a été préalablement calibrée avec 4 protéines de masses moléculaires connues dont les volumes d’élution respectifs