Tp Sur La Réaction Enzymatique

concentration en substrat et de la présence d’un inhibiteur sur la vitesse de réaction. Dans ce TP, nous allons utiliser une préparation commerciale de phosphatase alcaline de veau. Il s’agit d’une enzyme alcaline à 2 substrats, capable d’hydrolyser les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante : R-O-PO3 2- + H2O R-OH + HPO4 2- II. Principe Afin de suivre la réaction enzymatique, nous allons réaliser un dosage spectrophotométrique des produits apparus

fallait une expérience. Nous nous sommes fixés un rendez-vous avec le professeur de chimie pour réaliser un TP. Un jeudi après-midi nous avons effecteur ce TP et le résultat était très satisfaisant et faire une TP à trois, avec une certaine liberté m’a été très bénéfique, car j’estime que je suis plus autonome pour faire des expériences. Le fait que le professeur ne dirigeait pas chaque étape du TP nous a obligé d’être rigoureux et attentif pour obtenir un résultat final positif. Après toutes ces recherches

La Phosphatase alcaline Le but du TP Nous voulons étudier la Phosphatase alcaline. Nous voulons observer ce que devient son activité lorsque l’on fait varier différents facteurs, comme la concentration en substrat initiale dans une première partie, et le pH dans une seconde. Pour s'intéresser à son activité, on se servira du calcul de son activité spécifique dans une situation donnée, et de certaines représentations de la vitesse de réaction en fonction de la concentration en substrat, ou en fonction

Compte rendu de TP : Digestion d’ADN plasmidiques par des enzymes de restriction Introduction : Le but de ce tp est de mettre en place la digestion d’ADN plasmidiques issus de deux clones différents, par différentes enzymes de restriction et ainsi pouvoir déterminer si le clonage a réussi. Pour cela, nous allons réaliser la digestion de l’ADN puis effectuer une électrophorèse. Matériel et méthodes : Pour faire ce tp, nous allons utiliser des ADN plasmidiques issu de deux clones différents

2 Dosage de l'éthanol produit par méthode enzymatique en point final: Pour ce dosage, la quantité d'éthanol dans la cuve doit être comprise entre 0,5 et 6 µg. Principe du dosage: En présence de l'alcool-déshydrogénase (ADH), l'éthanol est oxydé en acétaldéhyde par le nicotinamide adénine dinucléotide (NAD+) éthanol + NAD+ [pic] acétaldéhyde + NADH + H+ Grâce à une seconde réaction à la semicarbazide, qui piège l'acétaldéhyde, la première réaction est rendue totale. La quantité de NADH

transformé en gel de fibrine ce qui obture la brèche et consolide le caillot. Il y a les facteurs de la coagulation (lieu de synthèse, rôle de la vitamine K et durée de demi-vie courte) et les inhibiteurs qui interviennent. Il y a une cascade de réactions enzymatiques. Il y a 2voies d’activation de la coagulation : la voie intrinsèque et extrinsèque. La régulation de la coagulation se fait par les inhibiteurs. Il y a l’antithrombine et le système protéine C- Protéine S qui interviennent. La fibrinolyse :

RESPONSABLE : Pr. François CANOVAS PARTICIPENT A L’ENSEIGNEMENT F. BONNEL G. CAPTIER F. CANOVAS G. GODLEWSKI D. PRAT M. PRUDHOMME J. PUJOL VOLUME HORAIRE : Cours magistraux .................................................................. 50H00 TP .......................................................................................... 7H30 PROGRAMME : Généralités : Ostéologie et Anatomie Topographique Régions Muscles : Arthrologie Vascularisation Crâne et Rachis Système nerveux central, Périphérique

SANGUINS LE TP INR : Le TP (TAUX DE PROTHROMBINE) + INR (International Normalized Ratio) est réalisé au laboratoire pour le suivi des traitements anticoagulants par les AVK. POURQUOI LE TP ? Le Taux de Prothrombine explore la voie extrinsèque de la coagulation, et donc les facteurs II, V, VII, et X de la coagulation ; sur ces 4 facteurs, 3 (II, VII, et X) sont vitamine K dépendants ; le T.P. est donc le test de surveillance aux traitements antivitamine K. COMMENT REALISE-T-ON LE TP AU LABORATOIRE

poison: l'écarine, qui une fois injecté dans le sang va clivée le facteur II en facteur IIa et provoquer une importante thrombose. Dans ce TP nous allons donc chercher à isoler (purifier) la prothrombine de deux manières différentes : par précipitation au BaCl2 et par chromatographie échangeuse d'ion . Nous allons ensuite essayer de déterminer l'activité enzymatique de la prothrombine transformé en thrombine, sous l'action de l'écarine et grâce à un substrat chromogénique. II. Matériel et méthodes

TP : FRACTIONNEMENT CELLULAIRE, ISOLEMENT ET CARACTERISATION DES MITOCHONDRIES INTRODUCTION : GLYCOLYSE, CYCLE DE KREBS ET CHAINE RESPIRATOIRE Les cellules vivantes tirent leur énergie de l'oxydation de certains composés organiques (ex : le glucose et les acides gras). Elles convertissent cette énergie potentielle en une forme d'énergie directement utilisable, la molécule d'ATP (adénosine triphosphate). Deux grands processus sont impliqués dans cette conversion : la fermentation et la respiration